湖南省重点学科建设项目(2011-76) 作品数:68 被引量:470 H指数:12 相关作者: 尹爱武 刘小文 齐成媚 田润 邵金华 更多>> 相关机构: 湖南科技学院 湖南中医药高等专科学校 南华大学 更多>> 发文基金: 湖南省重点学科建设项目 湖南省高校科技创新团队支持计划 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 农业科学 更多>>
SUA41蛋白表达和纯化及其多克隆抗体制备 被引量:3 2012年 旨在制备特异性SUA41多克隆抗体,为深入研究其在植物生长发育中的功能提供有力的分子生物学和生物化学的工具。PCR扩增拟南芥SUA41基因中编码280个氨基酸(401-680位氨基酸)的特异片段,经过GATEWAY的DNA重组技术构建了原核表达载体pDEST17-SUA41,用热休克法转化到E.coliBL21(DE3)star感受态细胞,以异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达出6×His-SUA41融合蛋白,用8 mol/L尿素缓冲液溶解包涵体并且经过水逐级去除尿素获得提纯的融合蛋白,并利用Western blotting鉴定确认。融合蛋白经Ni金属螯合柱亲和层析得以纯化,用SDS-PAGE进一步纯化。纯化的融合蛋白经过SDS-PAGE后切胶回收,免疫小白兔,制备多抗血清,然后用Western blotting进行检测,鉴定血清特异性和效价。结果显示,融合蛋白6×His-SUA41免疫兔,产生特异性的SUA41兔抗血清,可以检测到细菌和拟南芥组织中SUA41蛋白。用水提纯变性剂尿素溶解的包涵体蛋白具有可行性。制备的特异性SUA41兔抗血清效价高,能够有效地识别大肠杆菌表达的和拟南芥的SUA41蛋白。在有合适的对照情况下,该兔抗血清可以用于分析植物中SUA41蛋白的功能。 黄国文 韩玉珍 傅永福关键词:融合蛋白 蛋白纯化 油茶叶片中茶皂素和黄酮含量动态变化规律 被引量:5 2015年 为了解油茶叶片中茶皂素和黄酮含量的动态变化规律,分别采用乙醇回流法与分光光度法对不同树龄、叶龄及不同月份的油茶叶片进行茶皂素和黄酮提取与含量测定。结果发现,油茶叶片中茶皂素、黄酮含量随树龄增加表现为先增加后减少,且均在5 a树龄前后达到最大值,分别为117.28、43.61 mg/g。随叶龄增加,油茶叶片黄酮含量先减少后增加,茶皂素含量则呈逐渐增加趋势。30 a树龄植株叶片中的黄酮和茶皂素含量在12个月份中波动明显,黄酮含量在20.14~22.78 mg/g变化,在4月和10月分别达到峰值;茶皂素含量在50.69~60.86 mg/g变化,在8—10月维持在较高水平。因此,以油茶叶片为原材料进行黄酮与茶皂素提取时,叶片的采摘时间应选择每年10月份前后的老叶,树龄的确定则在收益低于成本后越早越好。 闫荣玲 廖阳 陈颖 王鸽 殷小林 许路路关键词:油茶 黄酮 茶皂素 树龄 叶龄 衣原体致病机制研究进展 被引量:9 2018年 衣原体是一类严格细胞内寄生,具有独特发育周期的原核细胞型微生物,它感染人体可以引起多种疾病,包括沙眼、肺炎和泌尿生殖道感染等。由于衣原体特殊生长条件及其研究手段的局限,阻碍了衣原体致病机制的深入研究。本文从衣原体的生物学特性、黏附与穿入、调控宿主信号通路及对其产生的病理损伤、与宿主细胞凋亡相关关系、免疫逃逸几个方面对衣原体的致病机制进行综述。 陈浩 周洲关键词:衣原体 致病机制 细胞凋亡 免疫逃逸 沙眼衣原体假定蛋白CT389原核表达质粒的构建及结构预测 2017年 目的构建能表达沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)假定蛋白CT389的质粒pGEX6P-ct389及预测其结构。方法设计特异性引物,以Ct基因组为模板,PCR法扩增ct389基因,构建携带目的基因的重组质粒pGEX6Pct389;通过PCR鉴定和双酶切鉴定初筛,测序鉴定验证结果;比较ct389和tc0668基因序列及其编码产物的相似性,采用生物信息学预测CT389蛋白的二级结构和三级结构。结果获得大小约为1 300 bp的ct389基因片段,并成功得到重组质粒pGEX6P-ct389。ct389和tc0668基因及其编码产物的相似性高达84%和92%,CT389蛋白α-螺旋、无规卷曲和β片层的含量分别为27.7%、49.26%和占23.04%。与其三级结构最接近的是鼠疫耶尔森氏菌的纤溶酶原激活物。结论Ct389与tc0668基因从DNA到编码产物具有较高的相似性,ct389可能是重要的沙眼衣原体毒力基因。 唐翠连 陈浩 刘玖林 周洲关键词:沙眼衣原体 蛋白结构 生殖道衣原体质粒功能的研究进展 被引量:1 2021年 多数引起人类疾病的衣原体均携带质粒,大小约为7.5 kb。生殖道衣原体质粒含有非编码RNA与8个开放阅读框,编码8个质粒蛋白(pGP)。pGP能促进衣原体感染并调节染色体与质粒基因的表达。随着对生殖道衣原体与其质粒研究的不断深入,尤其是对衣原体质粒基因编辑技术的利用,人们对生殖道衣原体质粒的功能有了新的认识。本文对引起生殖道感染的衣原体菌株中质粒的主要功能及其潜在应用价值作一概述。 宋晨晨 周洲 钟光明关键词:衣原体 质粒 生殖道 肉豆蔻挥发油抑菌及抗花生油氧化作用研究 被引量:10 2015年 以水蒸气蒸馏法提取肉豆蔻挥发油。平板法涂布研究了肉豆蔻挥发油对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌及酿酒酵母菌种的最低抑菌浓度(MIC);滤纸片固相扩散法研究了肉豆蔻挥发油对供试菌体的抑菌活性。以人工合成抗氧化剂二丁基羟基甲苯(BHT)为对照,以过氧化值、酸值为指标研究了肉豆蔻挥发油对花生油的抗氧化作用。结果表明肉豆蔻挥发油有一定的抑菌作用和抗花生油氧化作用。肉豆蔻挥发油对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌及酿酒酵母的MIC分别为:5.0、120.0、150.0、10.0 m L/L,对上述4种菌的抑菌圈直径分别为:(13.46±0.85)、(11.59±0.68)、(10.52±0.74)、(12.15±0.76)mm。在35 d的贮藏期内,添加肉豆蔻挥发油的花生油过氧化值(POV)和酸值极显著低于空白组(P〈0.01)。在0~14 d贮藏期内添加0.12%、0.18%、0.24%肉豆蔻挥发油的花生油POV值和酸值极显著低于BHT组,但从第21天起添加肉豆蔻挥发油的花生油各组过氧化值和酸值极显著高于BHT组。 黄赛金 尹爱武 龚灯关键词:肉豆蔻 挥发油 抑菌 抗氧化 桂花叶中黄酮类化合物提取工艺的研究 被引量:5 2013年 以桂花叶为原料,采用有机溶剂提取法对桂花叶中黄酮类化合物的提取工艺进行研究,通过单因素试验研究了不同浸提溶剂,提取时间,提取温度,乙醇体积分数,固液比对桂花叶黄酮提取率的影响,采用正交试验优化得出桂花叶中黄酮类化合物提取的最佳工艺条件为:浸提时间2 h,提温度85℃,乙醇体积分数75%,固液比1︰20(g/mL),在该条件下桂花叶黄酮提取率达1.926%。 邵金华 余响华 董加宝 朱智勇关键词:黄酮 长果皂荚皂苷提取工艺条件研究 被引量:5 2014年 对湖南都庞岭自然保护区特有植物——长果皂荚的皂苷提取工艺条件进行研究,采用水浸提方法,考查了提取温度、时间、次数、固液比对长果皂荚总皂苷提取效率的影响。结果表明,经过一系列的单因素实验和L16(43)正交实验,得到了长果皂荚皂苷提取工艺的最佳条件:在浸提温度70℃、时间8 h、首次浸提固液比为1:4,第2-n次为1:2,浸提4次的条件下,可获得最高总皂苷提取率29.67%,为进一步开发利用长果皂荚提供实验依据。 余响华 戴永强 邵金华关键词:皂苷 浸提 桑椹多糖对急慢性酒精中毒小鼠的护肝作用 被引量:9 2016年 探讨桑椹多糖对急慢性酒精中毒小鼠的护肝作用。给药4周后测定急性酒精中毒小鼠醉酒时间,血中乙醇浓度,肝功能酶,肝中氧化酶、氧化产物和脂肪的分布。给药10周后测定慢性中毒小鼠的自发活动次数,血清中脂质、载脂蛋白和肝中一氧化氮及细胞因子的含量。结果表明桑椹多糖(400和200 mg/kg bw)可显著缩短急性酒精中毒小鼠的醉酒睡眠与醒酒时间、血中乙醇浓度,延长醉酒潜伏期,减少肝中丙二醛和甘油三脂的含量与脂滴的分布,增加肝中谷胱甘肽的含量与超氧化物歧化酶的活性,减少血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血清碱性磷酸酶及谷胺酰转移酶的活性;显著减少慢性酒精中毒小鼠的自发活动次数、血中胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白和肝中一氧化氮、肿瘤坏死因子α的含量,增加血中高密度脂蛋白与肝中白细胞介素10的含量。桑椹多糖对急慢性酒精中毒小鼠的肝功能有保护作用。 尹爱武 田润 邓胜国 万新 刘芳玉关键词:桑椹 多糖 抗氧化 血脂 不同铅水平下紫茎泽兰细胞内铅的分布和化学形态的分析 被引量:5 2016年 该研究运用差速离心法和化学试刑逐步提取法,分析了重金属铅在紫茎泽兰亚细胞内的分布和主要化学形态。结果表明:随着Ph浓度的升高,紫茎泽兰的叶、根、茎中各亚细胞组分Pb含量逐渐增加;紫茎泽兰中的Pb在叶片分布于可溶性部分和细胞壁中,两者占总量的75.34%~84.63%;茎也主要分布于可溶性部分和细胞壁中,占总量的36.10%~57.14%和20.07%~36.52%;而在根中则富集于细胞壁和可溶性部分,分别占39.2%.49.78%和28.27%~37.62%,其他细胞器中的Pb含量均较少。紫茎泽兰叶中的Pb以盐酸提取态和水提取态为主,两者占总量的58.74%~73.04%;茎中的Pb以醋酸提取态和氯化钠提取态为主;而根中的Pb则以醋酸提取态和盐酸提取态占优势,两者占总量的39.15%~52.91%。 刘小文 齐成媚 李园 颜冬冬 王秋霞 郭美霞 曹坳程关键词:铅 紫茎泽兰 亚细胞分布 化学形态