国家高技术研究发展计划(2007AA091905) 作品数:29 被引量:118 H指数:6 相关作者: 林学政 沈继红 何培青 王能飞 李江 更多>> 相关机构: 国家海洋局第一海洋研究所 山东轻工业学院 青岛科技大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 国家公益性行业科研专项 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
南极适冷菌Rheinheimera sp.97产抗菌活性物质发酵条件的优化 被引量:2 2011年 [目的]优化南极适冷菌Rheinheimera sp.97产抗菌活性物质的发酵条件。[方法]通过单因素和正交试验对南极适冷菌R.sp.97产抗菌活性物质的发酵培养基进行了优化,并通过单因素试验对其发酵条件进行了优化。[结果]菌株R.sp.97产抗菌活性物质的最佳培养基为:蛋白胨3.0g/L,硫酸铵1.0g/L,淀粉2.0g/L,NaCl15.0g/L;最佳发酵条件为:发酵培养基初始pH8,发酵温度10℃,摇瓶装液量30.0%(V/V),接种量1.0%(V/V)。优化后菌株R.sp.97发酵液的抗菌活性较优化前提高了22.2%。[结论]为研究南极适冷菌R.sp.97的活性物质奠定了基础。 李贺 林学政 刘同军关键词:抗菌活性 发酵条件 分子伴侣共表达对低温脂肪酶Lip-837异源可溶性表达的影响 被引量:7 2011年 将南极嗜冷菌Moritellasp.2-5-10-1的低温脂肪酶基因Lip-837克隆到表达载体pColdⅢ中,成功构建了重组质粒pColdⅢ+Lip-837,并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。SDS-PAGE实验结果表明,实现了该基因在E.coli的异源表达,且其表达量达到细胞总蛋白的39%;但表达产物主要以包涵体形式存在。将该重组质粒pColdⅢ+Lip-837分别与不同分子伴侣质粒,如pGro7,pKJE7,pG-Tf2,pTf16在E.coli BL21(DE3)中实现了共表达。SDS-PAGE结果表明,4种分子伴侣均能明显提高目的蛋白—脂肪酶Lip-837的可溶性表达,但不同分子伴侣提高可溶性蛋白表达的程度有所不同,如仅表达pColdⅢ+Lip-837时,低温脂肪酶可溶性蛋白占总表达量的比例为5%;当与分子伴侣pGro7共表达时,对脂肪酶可溶性蛋白表达提高的比例最大,其可溶性酶蛋白的比例可占总表达量的42%;分子伴侣质粒pG-Tf2促进可溶性表达的效果较差,其可溶性酶蛋白的比例仅占其总表达量的16.6%。 崔硕硕 张镱 林学政 沈继红关键词:低温脂肪酶 分子伴侣 共表达 可溶性表达 共轭亚油酸对血管内皮细胞的保护作用 被引量:6 2009年 目的探讨多不饱和脂肪酸共轭亚油酸(CLA)对血管内皮细胞(VEC)的保护作用。方法应用MTT比色法测定CLA对血管内皮细胞存活率的影响;用绿色荧光蛋白标记的膜联蛋白/碘化丙啶双染色法检测细胞凋亡和死亡。结果CLA 2μmol·L-1处理细胞72h,细胞存活率为126.3%;在浓度小于5μmol·L-1时呈剂量和时间性依赖。CLA能部分阻断软脂酸(PA)和硬脂酸(SA)诱导的VEC死亡。结论CLA能部分抵抗饱和脂肪酸PA、SA诱导的血管内皮细胞死亡,对血管内皮细胞的存活率有重要意义。 衣丹 李光友 刘发义 孙修勤关键词:共轭亚油酸 血管内皮细胞 饱和脂肪酸 细胞凋亡 Optimization of Fermentation Medium and Conditions of Antibiotic Active Substances Produced by Antarctic Psychrotrophic Bacterium Rheinheimera sp. 97 2011年 [Objective] The aim was to optimize the fermentation medium and conditions of antibiotic active substances produced by Antarctic psychrotrophic bacterium Rheinheimera sp.97.[Method] Single-factor experiment and orthogonal test were adopted to optimize the fermentation medium of antibiotic active substances produced by Antarctic psychrotrophic bacterium R.sp.97,while the fermentation conditions were optimized by single-factor experiment.[Result] The optimum fermentation medium for the antibiotic active substances production was as follows:tryptone 3.0 g/L,ammonium sulfate 1.0 g/L,starch 2.0 g/L,NaCl 15.0 g/L.The optimized fermentation conditions were as follows:the starting pH of medium was 8.0,fermentation temperature was 10 ℃,liquid volume in Erlenmeyer flask was 30 %(V/V)and inoculation amount was 1%(V/V).Under the optimized fermentation medium and conditions,the antibacterial activity of R.sp.97 was increased by 18.1%.[Conclusion] This study had provided basis for the antibiotic active substances produced by Antarctic psychrotrophic bacterium R.sp.97. 李贺 林学政 刘同军关键词:OPTIMIZATION 南极芽孢杆菌Bacillus sp.107生长特性及抑制植物病原真菌的研究 被引量:10 2011年 从南极海泥中筛选获得对植物病原真菌有抑制作用的芽孢杆菌Bacillussp.107,以常见植物病原真菌为主要指示菌,测定菌株发酵上清液的抑菌谱;研究温度、NaCl质量分数和初始pH值对其生长和抑菌活性的影响,并测定菌株发酵液对黄瓜白粉病的防治作用。结果表明,芽孢杆菌Bacillussp.107发酵上清液对常见植物病原真菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、茄交链孢菌(Alternaria solani)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)和辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)均有抑制作用。产抑菌物质的适宜培养条件:温度为15~30℃,NaCl质量分数为0%~4.5%和初始pH值为5.0~9.0;当NaCl质量分数为3.0%,温度为25℃,初始pH值为7.0时抑菌活性最高。芽孢杆菌Bacillussp.107发酵液的5倍稀释液对黄瓜白粉病的防效达62.05%。该菌株在植物病害的生物防治中,具有潜在的应用价值。 何培青 王红梅 沈继红 林学政关键词:芽孢杆菌 抑菌活性 植物病原真菌 极地海洋细菌Bacillaceae sp v107代谢产物研究 2011年 从一株极地海洋细菌Bacillaceae sp v107发酵液中分离得到4个化合物,经波谱数据分析,鉴定其结构为:辅酶Q10(1)、β-谷甾醇(2)、双(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯(3)、十六烷酸甘油酯(4),以上化合物均为首次从该菌株中分离得到。 曹俊伟 钟惠民 陈颢 沈继红关键词:芽孢杆菌科 代谢产物 南极产低温脂肪酶菌株Psychrobacter sp. G发酵条件优化研究 被引量:3 2011年 从南极第24次科学考察采集的样品中分离出产低温脂肪酶菌株Psychrobacter sp.G,通过Plackett-Burman法及响应面法对其产脂肪酶条件进行优化,得出最适条件为:蛋白胨0.75%、酵母粉0.2%、NaCl 2%、Mg-SO40.1%、(NH4)2SO40.1%、K2HPO40.2%、Tween-80 1.5%、培养温度15℃、培养时间72h、装液量150mL/500mL、振荡转速150r/min。在此条件下发酵的脂肪酶活力为16.5U/mL。 衣丹 林学政 沈继红 徐国英 王能飞 王帅关键词:低温脂肪酶 南极抗细菌活性菌株的筛选及系统发育分析 被引量:19 2011年 分别以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、青枯假单胞菌、绿脓假单胞菌和苏云金芽孢杆菌为指示菌,采用琼脂扩散法对实验室保存的580株极地细菌进行了抗菌活性菌株的筛选与活性验证,从中筛选出4株对上述指示菌株具有明显抗菌效果的活性菌株,其编号分别为97、Z11、Z18及Z19,并对其生长曲线、抗菌活性曲线和系统发育地位进行研究。结果表明,4株菌均在培养24 h后进入指数生长期,菌株97在培养48 h后达到稳定期,而菌株Z11、Z18及Z19在培养60 h后达到稳定期。抗菌活性分别在培养84、96、72和72 h时达到最高。系统发育分析表明,该4株菌分别属于伦黑墨氏菌属(Rheinheimera)、嗜冷杆菌属(Psychrobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)和嗜冷杆菌属(Psychrobacter)。 李贺 林学政 何培青 刘同军关键词:抗菌活性 系统发育分析 海洋真菌zp6次级代谢产物及其抗真菌活性研究 被引量:7 2012年 目的对海洋真菌zp6发酵液的乙酸乙酯萃取部分及其抑菌活性进行研究。方法采用硅胶柱色谱及高效液相色谱进行分离纯化,根据理化性质及各种光谱技术进行结构鉴定,采用滤纸片法对分离到的化合物进行抑菌活性研究。结果从该菌中分离纯化得到8个化合物:(22E)-3β,5α,9α-三羟基-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(1)、5α,8α-环二氧-24-甲基麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(2)、赤藓糖醇(3)、腺嘌呤核苷(4)、(24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(5)、阿拉伯醇(6)、(7)、4-乙酰氧基苯甲酸(8)。结论化合物1和5具有抗真菌活性。 高常松 钟惠民 曹俊伟 陈颢关键词:海洋真菌 代谢产物 抗真菌活性 南极细菌胞外多糖溶液冻结特性的差示扫描量热研究 被引量:2 2009年 采用差示扫描量热法,测定几种南极细菌胞外多糖(简称,EPSs)溶液的结晶、熔融、焓转变以及水合性质等冻结特性,分析了EPSs的浓度和分子量与其抗冻活性的关系。结果表明,在溶液冻结过程中,仅0.25%的Pseudoalteromonas sp.S-15-13EPSs(分子量,6.2×104Da)可抑制冰核形成,溶液冻结温度较纯水的降低(1.07±0.62)℃;溶液的冻结焓降低说明冰核生长变缓,冰晶形成细小,0.125%的Shewanella sp.5-1-11-4EPSs(分子量,1.2×103Da)和Moritellasp.2-5-10-1EPSs(分子量,3.0×103Da)冻结焓分别较纯水的降低17.15%和29.13%,S-15-13EPSs在0.125%~0.5%的范围内可降低冻结焓,0.125%时冻结焓较纯水的低30%,其不冻水含量为(0.292±0.05)g/g。在冰晶熔化过程中,几种EPSs均可降低溶液熔融温度和熔融焓,促进冰晶熔化,使冰晶细小;4.0%的5-1-11-4EPSs、2-5-10-1EPSs和0.5%S-15-13EPSs的熔融温度较纯水的分别降低(2.70±0.15)℃、(2.30±0.39)℃和(4.66±0.42)℃。研究结果阐明EPSs可以通过改变菌体周围水的冻结特性,以抵御冰晶对微生物的损伤,大分子量EPSs对冰晶的抑制作用强于低分子量的。 何培青 李江 王昉 顾敏芬 沈继红关键词:胞外多糖 差示扫描量热