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山核桃叶总黄酮抑制C3H10T_(1/2)细胞成脂分化的作用研究被引量：3: 2017年; 目的:研究山核桃叶总黄酮对小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T_(1/2)成脂分化的影响。方法:建立C3H10T_(1/2)细胞成脂分化模型,油红O染色法分析山核桃叶总黄酮对C3H10T_(1/2)细胞成脂分化的影响;GAP-PAP酶法测定C3H10T_(1/2)细胞成脂分化过程中甘油三酯含量变化;采用荧光定量PCR和Western Blot检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)以及脂肪型脂肪酸结合蛋白4(FABP4)的mRNA和蛋白表达水平。结果:山核桃叶总黄酮能抑制C3H10T_(1/2)细胞成脂分化,20μg/m L山核桃叶总黄酮能显著减少甘油三酯的堆积,降低PPARγ、C/EBPα、FABP4的mRNA和蛋白表达水平。结论:山核桃叶总黄酮对C3H10T_(1/2)细胞成脂分化具有抑制作用,其机制可能与抑制PPARγ、C/EBPα、FABP4的表达有关。; 刘全芳谭佳宁金丽霞蒋福升金波丁志山; 关键词：成脂分化

球松素对C3H10T1/2细胞成脂分化的抑制作用研究被引量：4: 2018年; 目的探讨山核桃叶提取物球松素对小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化的影响。方法 MTS法检测不同浓度球松素处理的细胞成活率以界定适宜的浓度范围;油红O染色法结合异丙醇萃取法定性和定量分析球松素对细胞成脂分化的影响;GPO-PAP酶法检测球松素处理后细胞中甘油三酯含量的变化;荧光定量PCR和Western blot分别检测成脂分化中C/EBPα、PPARγ、FABP4 mRNA和相关蛋白的表达水平。结果 30μmol/L、50μmol/L球松素对细胞成脂分化有明显的抑制作用,且能显著减少甘油三酯堆积;10μmol/L、30μmol/L、50μmol/L球松素能明显抑制PPARγ、C/EBPαmRNA表达;5μmol/L、10μmol/L、30μmol/L、50μmol/L球松素能明显降低FABP4 mRNA表达;50μmol/L球松素能明显降低PPARγ、C/EBPα和FABP4蛋白表达。结论山核桃叶提取物球松素对C3H10T1/2细胞成脂分化具有抑制作用,可能与调控PPAR信号通路和相关基因表达有关。; 沈颖芝高承贤黄伟鹏金丽霞周芳美黄燕芬; 关键词：球松素成脂分化

山核桃叶总黄酮苷元及其主要单体成分球松素查尔酮的抗氧化活性被引量：8: 2013年; 目的:测定山核桃叶总黄酮苷元(TFA)及其主要单体成分——球松素查尔酮(PSC)的抗氧化活性。方法:采用柱层析法分离、富集山核桃叶中的总黄酮苷元及单体化合物球松素查尔酮;测定总黄酮苷元中总酚含量,通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基实验、铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法、抗脂质过氧化(LPO)实验、抗蛋白氧化羰基(PCO)生成实验,对TFA和PSC进行体外抗氧化活性研究。结果:富集的山核桃叶总黄酮苷元中总酚含量用没食子酸当量(GAE)表示为(283.75±10.82)mg·g-1;TFA和PSC对DPPH自由基清除的抑制浓度(IC50)分别为(20.05±1.74),(11.66±0.61)mg·L-1,抑制脂质过氧化的IC50分别为(74.62±5.39),(24.38±1.24)mg·L-1,抑制蛋白过氧化的IC50分别为(174.29±11.26),(86.74±7.89)mg·L-1;TFA和PSC均具有较强的抗氧化能力;除了对铁离子还原力外,其他各项指标化合物PSC均显著强于TFA。结论:山核桃叶中含有较高含量的黄酮苷元,其富集的总黄酮苷元具有较强的抗氧化活性,已知成分大于50%,而球松素查尔酮是其主要药效物质,值得进一步开发应用。; 徐敏沈勇张坤刘楠楠蒋福升丁志山; 关键词：山核桃总酚

山核桃叶总黄酮苷元对小鼠的急性毒性研究被引量：2: 2014年; [目的]研究山核桃叶总黄酮苷元对小鼠的急性毒性作用。[方法]KM小鼠灌胃(ig)不同浓度的山核桃叶总黄酮苷元溶液,观察并记录小鼠饮食、日常活动及死亡情况,利用改良寇氏法计算半数致死量(LD50)、最大耐受量(MTD),并通过HE染色法观察小鼠肝脏、肾脏的病理切片,从而研究山核桃叶总黄酮苷元对小鼠的急性毒性作用。[结果]实验过程中小鼠的饮食活动无异常,且无死亡现象发生,故无法得出山核桃叶总黄酮苷元对小鼠的LD50值,实验小鼠对山核桃叶总黄酮苷元的最大耐受量为1130.7 mg·kg-1(相当于人用剂量125.6 mg·kg-1),HE染色结果显示各组小鼠的肝脏、肾脏均正常,无病变现象出现。[结论]山核桃叶总黄酮苷元对实验小鼠几乎无急性毒性作用。; 徐正虹张坤付宇航史珍珍俞杭苏金波蒋福升丁志山; 关键词：急性毒性最大耐受量半数致死量

浙江不同产地山核桃叶主要黄酮苷元含量的比较研究被引量：3: 2015年; 目的：测定和比较浙江不同产地山核桃叶中的主要黄酮苷元含量，为寻找黄酮苷元含量较高的山核桃叶提供了方向，将有利于山核桃叶的进一步开发利用。方法：采用反相高效液相色谱法（HPLC），以相应化合物最大吸收波长为检测波长，对不同产地山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素的含量进行测定，并比较各个产地山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素含量的差异。结果：白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素浓度分别在0．0025～0．025、0．0025—0．025、0．025～0．600和0．0125—0．250mg／mL范围内具有良好的线性关系。白杨素和球松素查尔酮以淳安县威坪镇汪川村山核桃叶最高，而小豆蔻明和球松素以浙江中医药大学滨江校区山核桃叶最高，临安市湍口镇凉溪村山核桃叶中白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素均最低。结论：浙江不同产地山核桃叶中主要黄酮苷元白杨素、小豆蔻明、球松素查尔酮和球松素含量具有较大的差异，根据需要选择不同产地的山核桃叶进行开发利用。; 朱学鑫蒋瑞彬黄晶晶蒋福升金波钱朝东丁志山; 关键词：高效液相色谱法

山核桃叶总黄酮及其单体化合物对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的抑制作用被引量：6: 2014年; 目的：研究山核桃叶总黄酮及其4种单体化合物球松素查尔酮、松属素、白杨素、汉黄芩素对血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，AngⅡ）诱导的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMC）增殖和迁移的作用。方法：组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC。调细胞密度2．0×10^4／mL，血清饥饿处理后用100nmol·L^-1 Ang Ⅱ诱导增殖12h。调细胞密度6．0×10^4／mL，用100nmol·L^-1 Ang Ⅱ诱导迁移12h。均给予12．5～62．5mg·L～总黄酮，10～50mg·L^-1球松素查尔酮、松属素、白杨素、汉黄芩素作用12h。用细胞计数法检测VSMC增殖，伤口愈合实验检测VSMC迁移。结果：12．5mg·L～总黄酮可剂量依赖性地显著抑制AngII诱导的VSMC增殖，50mg·L。球松素查尔酮、白杨素和汉黄芩素对AngⅡ诱导的VSMC增殖有微弱抑制。12．5mg·L^-1总黄酮，10mg·L^-1球松素查尔酮、松属素、白杨素、汉黄芩素均能剂量依赖性地显著抑制AngⅡ诱导的VSMC迁移。其中总黄酮、白杨素、汉黄芩素的效果优于松属素和球松素查尔酮。结论：山核桃叶总黄酮能有效抑制AngII诱导的VSMC增殖和迁移；白杨素、汉黄芩素、松属素和球松素查尔酮对AngⅡ诱导的VSMC迁移的抑制作用强于对其诱导的VSMC增殖的抑制作用。; 沈嫣婧朱学鑫蒋福升金波丁滨陆金健丁志山; 关键词：血管平滑肌细胞增殖迁移

球松素查尔酮对C3H10T1/2细胞成脂分化的影响被引量：3: 2017年; 查尔酮类化合物是一种广泛存在于多种药用植物中的黄酮类化合物,具有抑制细胞成脂分化的作用。为研究山核桃叶中提取分离得到的球松素查尔酮对小鼠胚胎间充质干细胞(C3H10T1/2)成脂分化的影响,该实验利用MTS[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,内盐]法检测细胞增殖情况;油红O染色和异丙醇萃取法检测细胞成脂分化情况;GAP-PAP酶法检测细胞中甘油三酯含量;分别采用荧光RT-PCR和Western blot检测成脂分化关键转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ),CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)和分化标志物脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)mRNA和蛋白表达。结果显示当球松素查尔酮浓度小于等于50μmol·L^(-1),对C3H10T1/2细胞的增殖活性无影响;油红O染色和异丙醇萃取法及GAP-PAP酶法检测结果表明球松素查尔酮能明显减少C3H10T1/2细胞成脂分化和甘油三酯含量;荧光RT-PCR和Western blot检测表明球松素查尔酮能下调FABP4,PPARγ和C/EBPαmRNA和蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结果提示,球松素查尔酮能够明显抑制C3H10T1/2细胞成脂分化。; 黄伟鹏黄燕芬陈建真金波谭佳宁丁志山; 关键词：成脂分化

山核桃叶总黄酮对H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用被引量：6: 2016年; 目的:研究山核桃叶总黄酮对H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:体外培养大鼠H9C2心肌细胞,用不同浓度氯化钴并优化不同缺氧及复氧时间建立缺氧复氧损伤模型。缺氧复氧前加入终浓度为2.5、5、10μg/m L的山核桃叶总黄酮预处理,通过检测细胞上清液中LDH释放量,细胞内MDA含量和SOD活性;并采用MTS检测缺氧复氧损伤后细胞的成活率以及Hoechst-PI双染和流式细胞术观察细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹检测细胞内HIF-1α蛋白表达,来考察山核桃叶总黄酮保护心肌细胞缺氧复氧损伤的作用。结果:利用1 200μmol/L氯化钴缺氧18 h,复氧2 h可建立缺氧损伤心肌细胞模型。与模型组比较,山核桃叶总黄酮能降低H9C2细胞缺氧复氧损伤后LDH释放量及细胞内MDA含量,提高SOD活性,减少细胞凋亡,并使细胞HIF-1α蛋白表达恢复正常水平。结论:山核桃叶总黄酮对心肌细胞缺氧复氧损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抗氧化、增强细胞清除自由基能力、减少脂质过氧化物产生及抑制细胞凋亡有关。; 蒋瑞彬朱学鑫邢丽婉丁志山吕圭源金波; 关键词：缺氧复氧 H9C2心肌细胞 HIF-1Α 抗氧化细胞凋亡

山核桃叶总黄酮对H9c2细胞氧化损伤的保护作用被引量：5: 2017年; 目的研究山核桃叶(Carya cathayensis)总黄酮对H2O2诱导的H9c2大鼠心肌细胞氧化损伤的保护作用及其与PI3K/Akt(磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶B)信号通路的关系。方法使用MTS(溴化噻唑蓝四氮唑)检测H2O2诱导氧化应激损伤的H9c2细胞存活率,Hoechst 33342染色观察其凋亡,Western blot技术检测p-AKT和AKT表达量,并用PI3K/Akt通路抑制剂LY294002进行验证。结果山核桃叶总黄酮可显著的提高氧化应激损伤细胞的存活率,减少细胞凋亡,增加细胞中p-AKT的表达,但其作用可被PI3Ks抑制剂LY294002抵消。结论山核桃叶总黄酮激活PI3K/Akt信号通路来有效抑制H9c2细胞的氧化损伤。; 陈宇驰黄燕芬吕敏金丽霞高承贤丁志山金波; 关键词：PI3K/AKT 山核桃总黄酮 H9C2

山核桃叶黄酮对高营养饮食去卵巢大鼠脂肪异位的改善作用研究被引量：1: 2018年; 目的:研究山核桃叶黄酮对高营养饮食诱导的去卵巢SD大鼠脂肪组织异位沉积的干预作用。方法:用高营养饲料喂养去卵巢SD大鼠,给予山核桃叶黄酮灌胃2个月,处死计算大鼠腹部脂肪系数、主动脉弓脂肪系数;制作主动脉弓血管、肝脏组织、腹部脂肪组织石蜡切片HE染色,观察脂肪这些部位的聚积和脂肪细胞的形态;检测血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、肝脏组织TG、肝脏游离脂肪酸(FFA);通过Q-PCR和Western blot检测脂肪组织过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA和蛋白表达。结果:山核桃叶黄酮能显著降低模型大鼠腹部脂肪系数、主动脉弓脂肪系数及血清TC、TG和肝脏TG、FFA含量及腹部脂肪PPARγ mRNA蛋白表达(P<0.05或P<0.01),减少肝脏细胞内脂滴数量、主动脉弓血管壁脂肪聚集及腹部脂肪细胞直径,改善血管壁光滑平整程度。结论:山核桃叶黄酮可改善高营养饮食诱导的去卵巢肥胖SD大鼠主动脉弓血管周围、肝脏和腹部的脂肪异位沉积,其作用机制可能与调节PPARγ表达,减少FFA释放,减少FFA向TG转化有关。; 唐世帆施祖建叶毅庄子谦丁志山周芳美黄燕芬; 关键词：PPARΓ

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国家自然科学基金(81303258)

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