四川省科技攻关计划(KJ200609)
- 作品数：2 被引量：17H指数：1
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- 羟基喜树碱抑制肺癌A549细胞的体外增殖并下调Bcl-2基因的表达被引量：17
- 2012年
- 目的研究羟基喜树碱对肺癌A549细胞生长抑制、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法羟基喜树碱处理A549细胞后用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色观察细胞形态学变化,琼脂糖凝胶检测DNA片段化,用流式细胞仪测定其对细胞周期影响。利用Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl-2的表达变化。结果 A549细胞经羟基喜树碱作用,提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带。经AO/EB染色,荧光显微镜下观察到早期凋亡细胞细胞核被染成绿色,呈碎片状,晚期凋亡细胞核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状,细胞周期S期由20%升高到60%。经1μmol/L羟基喜树碱处理24 h后,流式细胞术显示A549细胞的凋亡率为18.11%,明显高于对照组细胞凋亡率(0.09%,P<0.05)。经羟基喜树碱作用后,A549细胞Bcl-2基因表达下调70%(P<0.05)。结论羟基喜树碱可以明显抑制A549细胞增殖,诱导其凋亡,并下调Bcl-2基因表达,提示Bcl-2下调参与了羟基喜树碱对A549细胞的抑制作用。
- 宋海星胡洪华
- 关键词：羟基喜树碱肺腺癌A549细胞
- Bcl-2 siRNA联合10-羟基喜树碱治疗小鼠H22肝癌移植瘤的效果
- 2013年
- 目的探讨Bcl-2siRNA和10．羟基喜树碱（HCPT）联合对小鼠H22肝癌移植瘤的治疗作用。方法设计并合成针对Bcl-2mRNA序列的siRNA，将Bcl-2siRNA转染人小鼠H22肝癌移植瘤内并联合HCPT治疗，观察肿瘤体积和小鼠体重的变化以及小鼠的生存情况。对肿瘤组织进行石蜡切片，采用HE染色观察移植瘤组织的形态变化。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测移植瘤组织中Bcl-2mRNA的表达。采用流式细胞术检测移植瘤组织中H22细胞的细胞周期和凋亡变化。结果用药21d后，siRNA干扰联合HCPT治疗组H22荷瘤小鼠的肿瘤体积为（571．47±67．31）mm3，明显小于HCPT治疗组[（880．47±107．31）mm3，P〈0．05]、siRNA干扰组[（1119．55±158．60）mm3，P〈0．01]和生理盐水组[（1357．64±197．92）mm3，P〈0．01]。siRNA干扰联合HCPT治疗组小鼠的生存时间为26d，明显长于HCPT治疗组（14d，P〈0．05）、siRNA干扰组（21d，P〈0．05）和生理盐水组（12d，P〈0．05）。siRNA干扰联合HCPT治疗组移植瘤组织中H22细胞坏死明显，Bcl-2mRNA表达下调，s期细胞比例减少，凋亡率升高。结论与单一治疗组比较，Bcl-2siRNA与HCPT联合对小鼠H22肝癌移植瘤的生长有明显的抑制作用，并可延长小鼠的生存时间。
- 胡洪华宋海星
- 关键词：BCL-2基因10-羟基喜树碱小鼠
