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国家自然科学基金(81071325)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：李娜梁吴宇王斌曾明陈沁更多>>
相关机构：中国食品药品检定研究院南昌大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇伤寒
  • 1篇伤寒沙门氏菌
  • 1篇基因
  • 1篇基因功能
  • 1篇基因敲除
  • 1篇甲型
  • 1篇甲型副伤寒
  • 1篇甲型副伤寒沙...
  • 1篇副伤寒
  • 1篇副伤寒沙门氏...

机构

  • 1篇南昌大学
  • 1篇中国食品药品...

作者

  • 1篇魏华
  • 1篇陈沁
  • 1篇曾明
  • 1篇王斌
  • 1篇梁吴宇
  • 1篇李娜

传媒

  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
甲型副伤寒沙门氏菌ompW基因功能的初步研究
2012年
目的利用λRed重组系统敲除甲型副伤寒沙门氏菌ompW基因构建突变株，并且制备相应的回复株，进而初步研究该基因的功能。方法PCR扩增得到上、下游同源臂，与卡那霉素抗性基因片段共同构建打靶片段，将其浓缩后转化含bRed重组系统的甲型副伤寒沙门氏菌（50973株），经PCR鉴定后得到突变株；将重组酶表达质粒pACUl84与ompW基因的调控区和编码区序列连接后电转入突变株中，双酶切鉴定得到相应的回复株；SDS．PAGE及Western blot鉴定野生株、突变株与回复株中OmpW蛋白的表达情况；生化鉴定野生株、突变株与回复株，并观察野生株与突变株生长曲线的差异；测定野生株、突变株与回复株活菌半数致死量（LD50），以此来观察ompW基因与细菌毒力的相关性。结果在甲型副伤寒沙门氏菌50973株中成功敲除了ompW基因，并构建了相应回复株；野生株与回复株均可表达出OmpW蛋白，突变株没有出现该蛋白的表达；野生株、突变株与回复株生化鉴定结果均为甲型副伤寒沙门氏菌，且野生株和突变株生长无明显差异；三者LD50均不存在显著差异。结论甲型副伤寒沙门氏菌的ompW基因与该菌致病毒力无相关性，但突变株的构建为后续研究该基因具体功能提供了基础。
陈沁李娜梁吴宇王斌魏华曾明
关键词：甲型副伤寒沙门氏菌基因敲除
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