重庆市卫生局中医药科技项目(2010-1-16)
- 作品数：1 被引量：25H指数：1
- 相关作者：刘杰罗敏刘燕琴任风鸣焦雁翔更多>>
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- 传统中药金钱草ISSR-PCR反应体系的正交优化研究被引量：25
- 2014年
- 建立稳定、可靠的金钱草ISSR-PCR反应体系,为金钱草遗传多样性分析、优良品种选育、药材分子鉴定奠定基础。该研究在7水平单因素实验的基础上,采用L16(45)正交试验设计,应用SPSS 19.0进行方差分析,对影响反应体系的5个主要因素在4个水平上进行优化。利用优化的反应体系,筛选引物最适退火温度,以23份不同产地金钱草材料检测体系稳定性。结果显示模板DNA,引物,dNTP,Mg2+,Taq酶5个因素对金钱草ISSR-PCR反应结果均有极显著影响,影响大小依次为引物>Taq酶>模板DNA>Mg2+>dNTP,确定最优反应体系为总体积25μL,模板DNA 60 ng,引物0.3μmol·L-1,dNTP 0.2mmol·L-1,Mg2+1.8 mmol·L-1,Taq酶1.25 U。经不同产地样品检测,该优化体系稳定、可靠。该研究为其他物种ISSRPCR体系的优化提供参考。
- 任风鸣胡开治刘燕琴焦雁翔刘杰罗敏全健
- 关键词：金钱草正交设计
