国家自然科学基金(81071306)
- 作品数：16 被引量：59H指数：4
- 相关作者：韩宏岩许维岸贡成良张孝林赵磊更多>>
- 相关机构：苏州大学安徽科技学院广西复鑫益生物科技有限公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校优势学科建设工程资助项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 虎杖叶浸提物对亚硝酸盐清除和亚硝胺生成阻断的最佳浸提工艺被引量：2
- 2013年
- 目的:研究虎杖叶浸提物清除亚硝酸钠及阻断亚硝胺生成的最佳浸提条件,为虎杖叶开发为防癌保健茶提供理论依据。方法:在模拟人体胃液(pH为3.0,温度为37℃)条件下,采用盐酸萘乙二胺和α-奈胺法,探究虎杖叶浸提液对亚硝酸盐的清除及亚硝胺合成阻断的能力。结果:虎杖叶在100℃、浸泡15 min、料液比1∶50条件下的浸提液对亚硝酸钠的清除效果最好,最大清除率可达86.12%。虎杖叶在100℃、浸泡5 min、料液比1∶50条件下的浸提液对亚硝胺合成阻断最好,最大阻断率可达90.02%。结论:虎杖叶浸提物具有较强清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成的能力且受浸提工艺的影响。
- 余锡荣焦娜李宏亚张玉洁李慧芳高音张孝林
- 关键词：浸提物亚硝酸盐亚硝胺清除率
- 纳米纤维家蚕丝蛋白软支架制备及性能被引量：1
- 2015年
- 【目的】通过调控蚕丝蛋白溶液的状态,可实现对蚕丝蛋白支架的力学及结构性能的调控,获得适宜于内皮细胞生长的支架材料,解决复杂组织修复中由于不利于组织长入和血管生长而导致组织功能无法修复的问题。【方法】向新鲜蚕丝蛋白溶液中添加蚕丝蛋白纳米纤维增加冻干支架的成孔性,基于丝蛋白自组装原理对丝素蛋白溶液进行浓缩处理增加分子间亲水作用力,获得不同状态的丝蛋白溶液,最后冷冻干燥,制备支架,观察蚕丝蛋白状态变化对支架性能的影响。【结果】实验结果表明,蚕丝蛋白溶液经浓缩处理可以降低支架Silk II的形成,获得较柔软支架。【结论】添加蚕丝蛋白纳米纤维并浓缩处理可以获得模量适宜内皮细胞生长的支架材料,为不同软组织的修复提供了良好的基质材料。
- 宁洪艳韩宏岩吕强许维岸
- 关键词：软组织力学性能冷冻干燥
- 高效液相色谱测法测定家蚕酪氨酸羟化酶活性被引量：3
- 2012年
- 建立了HPLC-紫外检测法快速测定家蚕酪氨酸羟化酶活性的方法。采用的色谱柱为Venusil XBP C18(4.6 mm×100 mm,5μm),流动相pH为3.5,流速0.5 mL/min,紫外检测波长280nm,柱温30℃。L-多巴在0.1～100μg/mL范围内线性良好,r=0.9991(n=6),L-多巴最低检测限是0.02μg/mL(S/N≥3),日内、日间相对标准偏差(RSD)在3.1%～12%之间,样品回收率在89%～104.6%之间。该方法可用于昆虫酪氨酸羟化酶(TH)活性测定。
- 桂江贡成良许维岸韩宏岩
- 关键词：酪氨酸羟化酶高效液相色谱体外表达活性测定
- 生物类本科生综合实验设计与实践的探索被引量：22
- 2014年
- 结合近年来苏州大学基础医学和生物科学学院对生物类本科生综合性实验教学模式进行了一系列改革与探索。从内容包括教学计划安排与实验分组、实验内容确定、实验方案设计与具体实施、实验结果汇报与讲评以及综合性成绩考核等方面创新了一整套教学模式。教学实践表明,这种综合性实验充分体现了以学生为主,教师为辅。这种综合性实验教学模式可以极大地激发学生的求知欲,并有助于学生创新意识的培养以及独立实验技能的提高。
- 韩宏岩许维岸
- 关键词：实验教学模式
- 人GlnRSN端多肽的原核表达、纯化及其多抗的制备
- 2016年
- 制备谷氨酰胺-t RNA合成酶(Gln RS)多克隆抗体,为下一步深入研究其结构与功能做准备。以Gln RS全长基因为模板,PCR获取编码Gln RS N端236个氨基酸的基因片段,将PCR产物插入p ET28a以构建N(1-236)-Gln RS的重组表达载体(p ET28a-N-Gln RS),转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达N-Gln RS重组蛋白,用镍柱对表达的蛋白进行纯化,将纯化的蛋白对BALB/c小鼠采取皮下注射制备多克隆抗体,离心取血清,最后对制备的抗体进行特异性检测。PCR获得了目的片段,成功构建表达载体,获得表达的Gln RS N端236个氨基酸重组蛋白,制备抗体具有很好的特异性,可用于Gln RS检测。以N-Gln RS重组蛋白为抗原制备的抗体对Gln RS具有很好的免疫特异性,为下一步在蛋白水平深入研究Gln RS的结构与功能提供了抗体准备。
- 解帅帅韩宏岩许维岸
- 关键词：原核表达多克隆抗体制备
- 基于综合实验设计与实践的生物类本科生创新技能提升研究被引量：4
- 2013年
- 综合性实验训练是培养生物类本科生创新技能的一个重要环节,以加强生物科学专业本科生自主创新能力为宗旨。采用以学生为主、教师为辅的一整套实验教学模式,对综合实验教学计划安排与实验分组、实验内容确定、实验方案设计与具体实施、实验结果汇报与讲评以及综合性成绩考核等,对苏州大学基础医学和生物科学学院对生物类本科生综合性实验教学模式进行一系列改革与探索。实践证明:这种综合性实验教学模式可以极大地激发学生的求知欲,并有助于学生自主创新学习的培养以及实验技能的提高。
- 韩宏岩许维岸
- 关键词：实验教学
- 菲牛蛭抗凝提取物活性成分的研究被引量：6
- 2021年
- 目的:全面了解菲牛蛭抗凝活性提取物蛋白质生物活性成分和功能。方法:比较了30%~80%饱和度硫酸铵沉淀法、20%~60%乙醇沉淀法和60%丙酮联合等电点沉淀法分离纯化菲牛蛭抗凝活性物质的方法;采用Nano LC-MS/MS结合生物信息学分析鉴定提取物的蛋白质成分;对提取物进行了体外抗凝溶栓和细胞毒性的功能研究。结果:3种方法抗凝回收率分别为83%、66%和64%。三种方法提取物冻干粉颜色均较浅,无强烈腥臭味。硫酸铵沉淀法得到的冻干粉完全水溶,乙醇和丙酮法有少量不溶。从提取物冻干粉中共鉴定出397种蛋白质,其中生物活性物质除了含有水蛭素,还含有多种生物活性蛋白;冻干粉能延长血浆复钙时间PRT、凝血酶时间TT和凝血酶原时间PT;有体外溶栓效果;不影响正常的星形胶质细胞增殖,可呈浓度依赖性抑制胶质瘤细胞的生长增殖。结论:该研究建立了充分提取活体菲牛蛭抗凝活性物质的方法,抗凝提取物中含有多种具有潜在药用价值的蛋白质成分。该研究对菲牛蛭的应用奠定了基础。
- 李阳顾福根郭桃桃卢天才许维岸韩宏岩
- 关键词：水蛭活性成分蛋白质组
- 白藜芦醇下调肌球蛋白轻链激酶过表达抑制大鼠肝肿瘤增生被引量：9
- 2013年
- 目的研究白藜芦醇(Res)通过影响肌球蛋白轻链激酶(MLCK)在肝脏中表达水平抑制原发性肝癌的增生。方法采用口服饮水中含0.9 mmol.L-1二乙基亚硝胺10周诱发原发性肝肿瘤;20周后,治疗组大鼠每天给予肌肉注射Res 50 mg.kg-16周;26周后,处死大鼠,计数肝表面癌结节数,称量和计算体重、肝重,肝/体重比,测定血清中甲胎蛋白的变化,观察大鼠肝脏的病理改变;用免疫组化和Westernblot法检测Res对MLCK的表达影响,用细胞凋亡试剂盒检测Res诱导肿瘤细胞的凋亡。结果 Res治疗组大鼠和模型组大鼠相比,体重增加,肝肿瘤结节数和肝/体重比和血清甲胎蛋白值减少或降低(P<0.05)。模型组大鼠肝组织MLCK的表达水平明显增加,而Res治疗可逆转MLCK的过表达水平,并诱导肿瘤细胞凋亡。结论 Res通过下调肝组织MLCK的表达水平诱导凋亡,抑制大鼠肝肿瘤细胞的增生。
- 张孝林俞浩熊友谊刘汉珍赵磊马世堂周国梁秦梅颂周丽丽
- 关键词：白藜芦醇肌球蛋白轻链激酶增生
- 家蚕酪氨酸羟化酶His^(394)突变对酶结构和活性的影响
- 2013年
- 酪氨酸羟化酶作为儿茶酚胺类合成的限速酶,是人类、哺乳动物和昆虫新陈代谢不可或缺的酶类。以家蚕(Bombyxmori)酪氨酸羟化酶(BmTH)为研究对象,分析其氨基酸位点突变对酶结构与活性的改变,为研究酪氨酸羟化酶的功能位点以及表达调控提供依据。利用重叠延伸PCR技术将BmTH蛋白质序列的第394位氨基酸残基组氨酸(His394)突变为谷氨酰胺(Gln),成功获得家蚕酪氨酸羟化酶突变型BmTH-H394Q。BmTH-H394Q的活性仅为野生型BmTH活性的38%,且其热稳定性降低,易于聚沉;荧光光谱分析His394突变为Gln使酪氨酸羟化酶的色氨酸和疏水基团暴露增多;圆二色光谱分析显示BmTH-H394Q的α-螺旋结构含量减少了9.6个百分点,而β-折叠结构含量上升了8.0个百分点。据此可以推测,BmTH的氨基酸位点His394对酶的活性和结构稳定性起着重要作用,是维持其结构和功能所必需的基团。
- 张振旺贡成良许维岸韩宏岩
- 关键词：家蚕酪氨酸羟化酶定点突变活性
- 纳米氧化锌对HEK293细胞的毒性作用研究被引量：1
- 2016年
- 探讨纳米氧化锌浓度和尺寸效应对HEK293细胞的毒性作用以及其产生毒性的原因。分别用不同浓度的纳米氧化锌(15 nm)和不同尺寸的纳米氧化锌:常规氧化锌(颗粒直径≤1μm)、15 nm氧化锌、30 nm氧化锌及90nm氧化锌处理HEK293细胞,48 h后,MTT检测纳米氧化锌对HEK293细胞活性的影响,流式细胞仪检测纳米氧化锌对HEK293细胞凋亡的影响,ROS检测试剂盒检测纳米氧化锌对HEK293细胞中ROS含量的影响。结果显示当15 nm氧化锌浓度小于2.0μg/m L时,HEK293细胞活性、凋亡率和ROS水平与对照组相比没有明显差别;但当纳米氧化锌的浓度大于4.0μg/m L时,HEK293细胞活性呈明显下降趋势,细胞凋亡率和ROS含量呈明显的上升趋势,且在同一浓度下,纳米氧化锌尺寸越小,HEK293细胞活性越低,细胞凋亡率和ROS含量越高。该结果表明纳米氧化锌对HEK293细胞的毒性作用呈明显的剂量效应和尺寸效应,纳米氧化锌诱导HEK293细胞产生的大量活性氧(ROS)可能是导致其产生细胞毒性的主要原因之一。
- 陈玉莹韩宏岩
- 关键词：纳米氧化锌HEK293细胞细胞毒性细胞凋亡ROS
