中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2007hzs1J011)
- 作品数:21 被引量:242H指数:10
- 相关作者:郑服丛余贤美贺春萍陈旭玉周亚奎更多>>
- 相关机构:中国热带农业科学院海南大学海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划中国热带农业科学研究院科技基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 毒死蜱降解细菌WJl-063的鉴定及酶促降解特性被引量:5
- 2009年
- 从海南某农药厂地土壤中分离到1株能很好降解毒死蜱的菌株WJl-063,经形态特征、生理生化及16SrDNA序列分析,将该菌株初步鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。降解酶降解性能研究表明,该菌株能以毒死蜱作为唯一碳源生长,并且对毒死蜱起主要降解作用的是胞内酶,其传代降解代谢活性稳定。以牛血清白蛋白为标准蛋白,测得粗提酶中可溶性蛋白含量为0.044mg/mL;在pH5.0~8.0范围内,酶活力表现稳定,通过双曲线法认为该酶降解毒死蜱的最适pH值为8.0;毒死蜱降解酶热稳定性差,最适温度为25℃;该酶与毒死蜱底物结合力强,对毒死蜱具有较好的降解效果,米氏常数Km为201.92nmol/L,最大降解速率为399.36nmol/mg·min。
- 王利余贤美贺春萍郑服丛
- 关键词:毒死蜱酶促降解蜡状芽孢杆菌
- 土壤解磷细菌分离和筛选方法的建立被引量:25
- 2008年
- 以有机磷细菌培养基和无机磷细菌培养基为基本培养基,利用液体培养基进行生物富集,然后通过平板稀释法进行分离筛选,共获得107个菌株。结果表明,以有机磷细菌液体培养基为富集培养基,以无机磷细菌固体培养基为筛选培养基,可以有效地从土壤中分离筛选到解磷菌,初步建立起快速有效筛选解磷菌的体系;固体及液体培养条件下解磷能力的测定结果表明,筛选出的解磷菌有较强的解磷能力,进一步验证了此体系的可行性。
- 余贤美沈奇宾李炳龙郑服丛
- 关键词:解磷菌生物富集
- 土壤宏基因组文库的构建及拮抗稻瘟菌克隆子的筛选被引量:5
- 2009年
- 从橡胶林土壤中提取微生物总DNA,用PstI酶切后,酶切液与pBluescriptKS+载体连接转入大肠杆菌,构建了包含7 680个克隆子的宏基因组文库,76.2%的质粒含有外源DNA,插入片段的平均大小为4.3kb,DNA文库的容量为32.25MB。首先用序列筛选方法对土壤宏基因组文库进行筛选,共得到11个克隆子,通过对11个克隆子进行功能筛选(复筛),发现克隆子JKDL-1和JKDL-2对稻瘟菌有明显抑制作用,其余的9个克隆子对稻瘟菌没有明显活性。具有拮抗作用的克隆子通过NCBI的Blastx分析,发现JKDL-1和JKDL-2分别与柄杆菌属(Caulobactersp.K31)和布克氏菌属(Burkholderia ambifariaMC40-6)有75%和77%的同源性,初步预测其功能为组氨酸激酶(GAF sensor hybrid histidine kinase)和乙酰辅酶A乙酰转移酶(acetyl-CoA acetyltransferases)。
- 陈旭玉周亚奎余贤美林春花郑服丛
- 关键词:宏基因组文库拮抗稻瘟菌
- 香蕉内在拮抗细菌研究Ⅰ——菌株B215的分离及分子鉴定被引量:10
- 2008年
- 在香蕉枯萎病(Fusarium oxysporum f.sp. cubense,FOC)重病园区,从生长正常的香蕉假茎内分离获得1株细菌,编号为B215。经对峙培养和孢子萌发抑制测定,B215对FOC和香蕉其他几种主要病原菌的菌丝生长和孢子萌发具有良好抑制效果。对峙培养明显抑制香蕉枯萎病菌菌丝生长,抑菌带宽度0.5~0.6cm。菌株B215培养液滤液使香蕉枯萎病菌孢子和菌丝生长点膨大成球状畸形,原生质外泄,细胞崩溃干瘪,其EC50为4.12%。形态学、生理生化试验显示B215为芽孢杆菌(Bacillus);进一步对该菌株做16SrDNA序列测定与分析,表明其与已报道的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis strain KL-073)具有100%的同源性,二者所构建的系统发育树上处于同一个分支。将B215鉴定为枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。
- 殷晓敏陈弟吴红萍余贤美郑服丛
- 关键词:枯草芽孢杆菌香蕉枯萎病拮抗作用
- 一株西瓜尖孢镰刀菌的致死温度和最适碳氮营养源被引量:17
- 2008年
- 对采集分离的西瓜尖孢镰刀菌菌株的致死温度和最适碳氮营养源进行研究。结果表明,该病原菌分生孢子萌发的致死温度为60℃,菌丝生长的致死温度为80℃。测试的10种碳源和10种氮源中,对病原菌菌丝生长最适的碳源是葡萄糖,其次是麦芽糖和蔗糖,L-山梨糖最差;最适的氮源是DL-天门冬酰胺,其次是L-赖氨酸和甘氨酸,氯化铵、硫酸铵和L-胱氨酸最差。产孢量最适的碳源是L-山梨糖,氮源是L-胱氨酸。
- 贺春萍黄志强吴伟怀郑肖兰郑服丛
- 关键词:西瓜尖孢镰刀菌致死温度碳氮源
- 水稻CO39几丁质酶基因的克隆被引量:2
- 2008年
- 以CO39四叶期水稻苗的叶片为材料,提取水稻基因组DNA,通过PCR扩增获得水稻几丁质酶基因OsRCchi1,经序列测定得知该基因大小为1065bp,序列比对结果显示,OsRCchi1与已知的水稻几丁质酶基因Oryza sativa(japonica cultivar-group)classⅢchitinase RCB4(Rcb4)mRNA(AF350426)、Oryza sativa chitinase mRNA(AF330230)及Oryza sativa subsp.japonicaclassⅢchitinase(chib1)gene(AF296279)的相似性分别为85.9%、76.2%和75.0%。因此,可以认为OsRCchi1基因是classⅢ几丁质酶基因家族的一个成员。
- 余贤美艾呈祥郑服丛
- 关键词:水稻几丁质酶基因基因克隆
- 一株对香蕉枯萎病菌具有良好拮抗作用的菊欧氏杆菌被引量:7
- 2009年
- 在香蕉枯萎病重病园区,从生长正常香蕉假茎内分离获得一株细菌E353菌株。经对峙培养、孢子萌发抑制测定,E353对香蕉枯萎病菌菌丝生长、孢子萌发具有良好抑制效果。盆栽试验表明,E353活菌培养液(750ml/株)浸根处理,对香蕉枯萎病的防效为60.67%。经形态学、生理生化和16S rDNA序列比对,将E353鉴定为菊欧氏杆菌Erwinia chrysanthemi。
- 殷晓敏陈弟吴红萍郑服丛
- 关键词:香蕉枯萎病拮抗作用
- 宏基因组技术构建土壤宏基因组文库研究进展被引量:5
- 2008年
- 土壤中大部分的微生物不能被培养,从而限制了对土壤微生物的开发利用,宏基因组技术可以解决这一难题,成为开发微生物资源的一种工具。阐述了宏基因组文库的构建、土壤宏基因组文库的特点及筛选文库获得的一些成果,并分析了构建土壤宏基因组文库存在的问题。
- 陈旭玉周亚奎郑服丛
- 关键词:土壤宏基因组技术
- 内生枯草芽孢杆菌B215对香蕉弯孢霉叶斑病抑制作用初探被引量:4
- 2008年
- 采用对峙培养法和孢子悬滴法研究内生枯草芽孢杆菌菌株B215对香蕉弯孢霉叶斑病菌的控制作用,试验结果显示,菌株B215明显抑制香蕉弯孢霉叶斑病菌菌丝向四周均匀扩展,抑菌带宽度0.4cm,菌株滤液的EC50值为5.10%,表明内生枯草芽孢杆菌B215对香蕉弯孢霉叶斑病病原真菌具有很强的拮抗作用;而对菌株B215的抑菌谱测定结果显示,B215有广泛的抑菌谱,可产生广谱抗菌物质,生产中有望利用该菌株研制成生防制剂用于香蕉重要病害的防治。
- 殷晓敏陈弟郑服丛
- 关键词:枯草芽孢杆菌
- 一种直接用于PCR的土壤微生物DNA提取方法被引量:23
- 2008年
- 以橡胶林土壤为材料,直接提取土壤微生物DNA。本实验介绍的方法不仅可以获得大片段,并且不需要纯化即可直接用于PCR扩增和DNA酶切等后续操作,每克土壤DNA提取量约为2.1~4.6μg。此方法操作简单、快捷、为土壤宏基因组文库的构建和土壤微生物群落结构的多样性分析提供基础。
- 陈旭玉周亚奎余贤美郑服丛
- 关键词:土壤微生物DNA提取PCR