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改造的人乳头瘤病毒16型E6/E7融合蛋白疫苗抗肺癌作用的实验研究: 2004年; 目的　研究经改造的HPV16E6/E7蛋白质疫苗 (HPV 16mE6Δ/mE7)对表达HPV16E6和E7的小鼠肺癌细胞的体内生长抑制作用 ,为肺癌免疫治疗提供新线索。方法　预防性实验 :对C5 7BL/6小鼠先进行免疫 ,然后接种表达HPV 16E6和E7癌蛋白的TC 1肿瘤细胞 ;第 3 3天 ,对未出瘤小鼠进行第二次大剂量肿瘤细胞攻击。治疗性实验 :C5 7BL/6小鼠先接种TC 1细胞 ,然后进行两次免疫治疗 ,再对未出瘤小鼠进行第二次大剂量TC 1细胞攻击实验。计算各组肿瘤发生率、肿瘤体积。采用MTT方法检测淋巴细胞增殖反应。结果　预防性实验 :在 10 0天的观察时间内 ,免疫组小鼠可以有效抵抗第一、二次肿瘤细胞攻击 ,所有小鼠均未见肿瘤发生 ;而PBS组及单纯佐剂组小鼠在第一次肿瘤细胞接种后 6～ 12天内均有肿瘤形成 ,3 0天内因肿瘤负荷出现衰竭。在治疗性实验中 ,免疫组、PBS组、单纯佐剂组小鼠成瘤率分别为 2 0 %、90 %、60 % ;第二次攻击实验中 ,免疫组仍有 87.5 %的小鼠无肿瘤生长 ,而其他两组动物在 4～ 6天内均有肿瘤形成。MTT实验表明经mE6Δ/mE7免疫的小鼠脾淋巴细胞增殖反应明显强于对照组。结论　经改造的HPV16型mE6Δ/mE7蛋白质疫苗对于实验动物肺癌有较好的抑制作用。; 周小山赵清正千新来许春雷陆元志; 关键词：HPV16

表达HPV16 L1、L2和E7蛋白的非复制重组痘苗病毒的构建: 2008年; 目的构建防治宫颈癌的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1,L2E7蛋白的非复制重组痘苗病毒疫苗株。方法以痘苗病毒为载体,利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1,L2E7蛋白的重组痘苗病毒,用PCR和Western blot技术进行鉴定。结果该病毒在鸡胚成纤维细胞(CEF)中连续传代15代,经PCR检测证实病毒基因组中有HPV16L1,L2E7目的基因插入,Western blot检测证实病毒可以稳定表达L1和L2E7蛋白。结论构建的病毒NTVJL1L2E7可以在真核细胞中表达HPV16L1和L2E7蛋白,可以作为治疗和预防HPV16相关疾病的候选疫苗。; 范江涛陈心秋黄薇田厚文; 关键词：人乳头瘤病毒痘苗病毒

Construction of non-replicating recombinant vaccinia virus expressing HPV16 L1,L2E7 proteins: 2009年; Objective： To construct a non-replicating vaccinia virus expressing human papillomavirus 16 （HPV16） L1, L2E7 proteins as a candidate vaccine for cervical cancer. Methods： Using vaccinia virus vector, we generated a strain of non-replicating recombinant vaccinia virus vaccine expressing HPV16 L1, L2E7 proteins by homologous recombination and identified by PCR and Westernloting. Results： We demonstrated that the L1, L2E7 gene of HPV16 were integrated into vaccinia genosome and could express L1, L2E7 protein stably when infected the CEF using PCR and Western-blot assay. Conclusion： NTVJL1/L2E7 can express L1, L2E7 protein of HPV16 and can be taken as a candidate vaccine for HPV16-associated diseases.; Jiangtao FanXinqiu ChenWei HuangHouwen Tian; 关键词：VACCINE

共表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重组非复制型痘苗病毒构建及鉴定被引量：2: 2005年; 目的构建共表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1、L2、E6、E7蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。方法以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白的重组痘苗病毒并对其进行鉴定。结果该病毒在CEF细胞上连续传至第15代,经斑点杂交结果表明重组病毒基因组中有L1、L2、E6、E7基因插入;经WesternBlot检测,重组病毒能稳定表达HPV16L1、L2、E6、E7蛋白。结论非复制型重组痘苗病毒NTVJE6E7CKL1L2可作为预防和治疗HPV16相关肿瘤及其癌前病变候选疫苗。; 黄薇田厚文任皎范江涛赵莉边涛陆振华阮力; 关键词：痘苗病毒非复制型重组痘苗病毒 HPV16L1 E7蛋白共表达 E6

HPV16型-E6、E7在食管鳞癌组织与非癌组织中的表达被引量：25: 2004年; 背景与目的:越来越多的证据表明高危型人乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV),特别是HPV16型与多种肿瘤发生、发展密切相关。本研究旨在分析人乳头状瘤病毒HPV16型E6、E7在食管正常组织、不典型增生组织和癌组织中的表达,以探讨HPV16型在食管鳞癌发生、发展中的生物学意义。方法:采用PicTureTM免疫组织化学方法对70例食管癌切除标本上、下切缘的正常粘膜上皮组织、43例不典型增生组织以及18例癌组织中的HPV16型E6、E7蛋白表达情况进行研究。结果:E6蛋白阳性率在正常食管粘膜上皮组织中为59.3%,在上皮不典型增生组织中为88.4%,在癌组织中为83.3%;E7蛋白在上述3种组织中的阳性率分别为62.1%、90.7%和88.9%。与正常食管粘膜上皮相比,上皮不典型增生组织和癌组织中E6、E7蛋白表达均有显著性差异(P<0.05)。HPV16型E6、E7蛋白在正常食管粘膜组织中同时表达即同步率为25.7%,而在上皮不典型增生组织和癌组织中二者同步率分别为88.3%和83.3%。结论:HPV16型E6、E7蛋白与食管鳞癌发生、发展密切相关,二者协同作用可能是食管鳞癌发生、发展的重要因素之一。; 许春雷千新来周小山赵清正李艳春; 关键词：食管鳞癌人乳头状瘤病毒16型 E6 E7

人乳头瘤病毒16型E6和E7癌蛋白在肺癌中的表达检测被引量：3: 2004年; 许春雷赵光明千新来陆元志赵清正; 关键词：人乳头瘤病毒 16型E6 16型E7 癌蛋白肺癌 HPV

表达HPV16 L1、L2E7蛋白的非复制重组痘苗病毒的构建和鉴定被引量：1: 2007年; 目的:构建防治宫颈癌的表达人乳头瘤病毒16型、HPV16)L1、L2E7蛋白的非复制重组痘苗病毒疫苗株。方法:以痘苗病毒为载体,利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1、L2E7蛋白的重组痘苗病毒,用PCR和Western-blot技术进行鉴定。结果:该病毒在鸡胚成纤维细胞(CEF)中连续传代15代,经PCR检测证实病毒基因组中有HPV16L1、L2E7目的基因插入,Western-blot检测证实病毒可以稳定表达L1、L2E7蛋白。结论:构建的病毒NTVJL1L2E7可以在真核细胞中表达HPV16L1、L2E7蛋白,可以作为治疗和预防HPV16相关疾病的候选疫苗。; 范江涛陈心秋黄薇田厚文; 关键词：人乳头瘤病毒痘苗病毒

HPV16E6/E7融合蛋白疫苗与放疗联合应用治疗宫颈癌的实验研究被引量：3: 2005年; 目的:观察人乳头瘤病毒16型(HPV)E6/E7融合蛋白疫苗与放疗(12Gy)联合应用对宫颈癌的治疗效果。方法:24只雌性C57BL/6小鼠右侧后肢接种肿瘤细胞后7d,随机分为4组:对照组(C,n=6);免疫组(IM,n=6);放疗组(RA,n=6);联合治疗组(IM+RA,n=6)。比较各组小鼠的肿瘤生长速度及存活时间。采用TUNEL法对小鼠肿瘤组织中细胞的凋亡情况进行检测。结果:IM+RA组小鼠肿瘤生长速度较慢,平均存活时间明显长于RA、IM及C组,IM组与C组动物的平均存活时间没有差异。TUNEL实验结果表明,IM+RA组小鼠肿瘤组织中凋亡细胞明显高于其他各组。结论:HPV16E6/E7融合蛋白疫苗与放疗联合应用,具有协同抗肿瘤作用。; 周小山千新来陆元志刘巧赵清正; 关键词：人乳头瘤病毒16型免疫治疗放疗宫颈癌

共表达HPV16L1、L2、E67蛋白的重组非复制型痘苗病毒的构建: 2005年; 目的:构建共表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1、L2、E67蛋白的非复制型重组痘苗病毒人用疫苗株。方法:以痘苗病毒为载体、利用同源重组技术筛选共表达HPV16L1、L2、E67蛋白的重组痘苗病毒并对其进行鉴定。结果:该病毒在CEF细胞上连续传至第15代,经斑点杂交结果表明重组病毒基因组中有L1、L2、E6、E7基因插入;经Westernblot检测,重组病毒能稳定表达HPV16L1、L2、E67蛋白。结论:非复制型重组痘苗病毒NTVJE67CKL1L2可作为预防和治疗HPV16相关肿瘤及其癌前病变的候选疫苗。; 黄薇田厚文任皎范江涛赵莉边涛陆振华阮力; 关键词：人乳头瘤病毒宫颈肿瘤痘苗病毒载体

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国家高技术研究发展计划(2002AA216041)

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