国家教育部博士点基金(20090171110049)
- 作品数：13 被引量：17H指数：2
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- 机械牵张力和去甲肾上腺素协同激活小鼠血管平滑肌细胞α_1-肾上腺素能受体-ERK1/2信号促进细胞增殖被引量：2
- 2011年
- 目的为证实α1-肾上腺素能受体(α1-AR)是否介导了机械牵张力和/或去甲肾上腺素(NE)对小鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的协同激活并加速血管重构。方法静息培养的小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)经有或无Prazosin(α1-AR抑制剂)预处理后,给予机械牵张力和/或NE刺激,Western Blotting检测ERK1/2的磷酸化水平,免疫荧光检测ki-67的表达(细胞增殖),RT-PCR检测细胞α1-AR亚型(α1A-,α1B-和α1D-AR)mRNA的表达。分别用三种亚型的α1-AR-siRNA预处理细胞,观察α1-AR各亚型基因沉默对机械牵张力诱导的VSMC ERK1/2磷酸化的影响。结果机械牵张力可分别上调α1B-和α1D-AR mRNA表达,但α1A-AR mRNA未检测到。机械牵张力和/或NE均可激活ERK1/2,引起ERK1/2磷酸化增加,而两种因素共同存在时ERK1/2激活更加明显;ki-67的表达呈现类似效应;这种由机械牵张力和/或NE激活的作用均可被Prazosin部分抑制。α1B-和α1D-AR-siRNA预处理可分别减少α1B-和α1D-AR mRNA的表达,进而相应地导致机械牵张力诱导的ERK1/2磷酸化的抑制。RT-PCR未能检测到经α1A-AR-siRNA预处理后的VSMC表达α1A-AR mRNA,但仍可见机械牵张力诱导的ERK1/2磷酸化被抑制。结论高血压机械牵张力和NE可协同促进VSMC ERK1/2激活及细胞增殖,导致血管重构加速;α1-AR部分介导了这一过程,α1-AR各亚型起着相似作用。本研究可望为深入探讨高血压异常机械力合并交感神经活性亢进协同促进血管重构的致病机制及防治新策略提供实验依据。
- 刘树迎李宇煌张征宇张敏汪照静李晨宁粉黄锦桃李朝红
- 关键词：机械牵张力氧化型低密度脂蛋白
- 糖基化终产物受体介导高血压机械牵张力协同促进糖基化终产物激活小鼠血管平滑肌细胞ERK1/2加速血管重构
- 2011年
- 目的为证实糖基化终产物受体(RAGE)是否介导了机械牵张力和/或糖基化终产物(AGE)对小鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的协同激活并加速血管重构。方法①正常血糖小鼠下腔静脉分别连接到正常血糖小鼠和STZ诱导的糖尿病小鼠右颈总动脉形成"静脉桥",术后不同时间点(0、4、8周)收获移植静脉作常规切片HE染色,观察移植静脉在动脉压力作用下的血管构筑情况。②体外静息培养的血管平滑肌细胞分别给予机械牵张力和/或糖基化终产物刺激,用Western Blotting法检测细胞内ERK1/2磷酸化水平。③糖基化终产物受体基因沉默(siRNA-RAGE)或过表达(overexpression-RAGE)预处理VSMC后给予机械牵张力和/或糖基化终产物刺激,观察ERK1/2活性的变化。结果高血压(动脉压)可明显改变移植静脉的血管构筑,但移植到高血糖组的比正常血糖组的血管构筑改变更加明显(术后4周和术后8周高血糖组与正常血糖组移植血管厚度分别为73.99±4.45μm比49.67±11.62μm和117.06±17.62μm比88.97±15.78μm,P均<0.05)。机械牵张力和糖基化终产物单独或共存时均可引起细胞内ERK1/2磷酸化增加,但两者共存时激活效应最明显;而ERK1/2的激活信号可通过糖基化终产物受体基因沉默或过表达被抑制或增强。结论高血压机械牵张力和糖基化终产物可协同促进VSMC ERK1/2激活,导致血管重构加速,糖基化终产物受体部分介导了这一过程。本研究可为深入探讨高血压机械力协同糖尿病AGE促进血管重构的分子机制及防治新策略提供实验依据。
- 李宇煌张征宇刘树迎王晶晶陈大堤黄锦桃胡黎平李朝红
- 关键词：糖基化终产物受体高血压血管重构机械牵张力
- 颈总动脉压诱导的小鼠移植静脉血管重构
- 2011年
- 【目的】研究血压升高引起血管重构的机制。【方法】手术取出麻醉后的11～12周供体C57BL/6J小鼠的下腔静脉,连接到同窝出生的受体小鼠颈总动脉,构建"静脉桥"。继而,收获受颈总动脉压作用不同时间(0,2,4,8周)后的移植静脉,经石蜡包埋HE染色、丽春红-维多利亚蓝染色以及平滑肌特异性抗体免疫组化染色后观察其血管构筑。【结果】术后各时间点均可见移植静脉血管壁增厚及新生内膜的形成,呈时间依赖性。与正常静脉[(11.10±0.9)μm)]相比,术后8周血管壁[(88.97±16)μm)]增厚了8倍(P<0.01)。术后2周移植静脉新生内膜中即可见血管平滑肌细胞大量增生,4周最多,8周后数量减少,但细胞外基质明显增多。移植静脉在动脉压作用下,其弹性膜历经了断裂、合成和重建过程。【结论】血压升高产生的机械力可直接导诱导移植的小鼠静脉粥样硬化以及弹力膜的重构。本研究可望为深一步探索高血压引起血管重构的机制及防治新策略提供有用的动物模型及实验依据。
- 李宇煌张征宇汪照静刘树迎陈大堤黄锦桃胡黎平李朝红
- 关键词：血管重构血管平滑肌细胞
- 硝苯地平和氢氯噻嗪对机械牵拉力诱导的小鼠血管平滑肌细胞ERK1/2磷酸化和Ki67表达的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨钙离子阻滞剂硝苯地平和利尿剂氢氯噻嗪对机械牵拉力刺激诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)ERK1/2磷酸化和Ki67表达的影响。方法体外培养静息状态下的VSMC,在分别给予硝苯地平和氢氯噻嗪预处理后给予机械牵拉力刺激。用免疫印迹法检测细胞内ERK1/2磷酸化水平;对细胞进行免疫荧光染色,检测Ki67表达水平。结果与阴性对照组相比,硝苯地平或氢氯噻嗪对静息培养的VSMC中ERK1/2磷酸化和Ki67的表达无影响;单纯机械力牵拉刺激,可引起静息培养的VSMC中ERK1/2磷酸化和Ki67的表达明显增加;硝苯地平可呈浓度依赖性抑制机械力牵拉引起的ERK1/2磷酸化和Ki67表达的增加;而氢氯噻嗪与硝苯地平作用相反,可进一步协同增加机械力牵拉引起的上述作用。结论硝苯地平和氢氯噻嗪对机械牵拉力引起的VSMC中ERK1/2磷酸化和Ki67表达增加的作用完全相反,前者可抑制机械牵拉力引起的VSMC中ERK1/2磷酸化和Ki67的表达增加,后者相反,呈协同增加。
- 汪泓王晶晶郭映纯刘树迎平苏宁刘科峰周玉环裴婷李朝红
- 关键词：硝苯地平氢氯噻嗪ERK1/2KI67
- 静脉移植体病变的病理过程及其影响机制被引量：1
- 2010年
- 冠状动脉旁路移植术广泛用于临床治疗冠心病,自体静脉是移植血管的主要来源,但移植术后再狭窄大大降低了手术成功率。临床跟踪研究发现大约半数的病人术后10到15年后静脉移植体会有不同程度的增生再狭窄甚至阻塞,引发严重的后果。因此,深入了解静脉体进入动脉循环环境后的病变过程及其机制具有重要意义。文章介绍了正常血管的发育与调控,比较动、静脉血管生理差异,讲述静脉移植后动脉化及再狭窄的病理过程,分析各种病变的影响因素及作用机制并展望未来各种治疗前景。
- 赵小红许云云石毅李朝红
- 关键词：冠心病血管重构高血压
- α1肾上腺素能受体介导去甲肾上腺素和高血压机械力联合信号促进血管重构的机制
- 2013年
- 目的交感神经系统活性亢进引起的去甲肾上腺素分泌增多与血压升高产生的异常机械力联合作用可加速血管重构，但机制不明。本研究旨在探讨Ot。肾上腺素能受体（α1-AR）是否介导了机械牵张力和去甲肾上腺素（NE）的联合信号加速血管重构。方法将小鼠的下腔静脉移植到颈总动脉构建静脉搭桥模型，术后给予α1-AR抑制剂哌唑嗪（Prazosin），1mg／（kg·d），腹腔注射，或同等量的生理盐水处理2周或4周，观察静脉移植物新生内膜的厚度。
- 刘树迎李宇煌张征宇黄曦黄锦桃李朝红
- 关键词：Α1肾上腺素能受体机械牵张力细胞外信号调节激酶
- Hoechst33342与DAPI标记细胞核对胞内活性氧检测效果的比较被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Hoechst 33342与DAPI两种荧光染料标记细胞核后对细胞内活性氧水平的影响。方法静息培养的血管平滑肌细胞加入晚期糖基化终末产物作用10 min,加入标记活性氧的荧光探针H2DCFDA,再分别加入Hoechst 33342和DAPI不同荧光染料进行核标记。荧光显微镜下观察细胞核被标记的数目与细胞内活性氧的荧光水平。结果 Hoechst 33342染料标记5 min后即可见细胞核被标记上,随着时间的延长被标记的核数目并不发生改变;而与之明显不同的是,DAPI染料标记5 min时,只有几个细胞核被标记上,但随着时间的延长被标记的核数目越来越多。Hoechst 33342标记后细胞内活性氧的荧光强度并不随时间的延长发生变化,而DAPI标记后细胞内活性氧绿色荧光的细胞数就越少,DAPI标记的细胞核数与显示活性氧绿色荧光的细胞数呈反比。这些结果提示,DAPI染料在标记细胞核时破坏了活性氧在细胞内的储存,干扰了实验结果。结论检测细胞内活性氧时,应使用Hoechst 33342核标记染料而不能用DAPI。
- 周玉环刘树迎平苏宁王晶晶陈大堤黄锦桃李朝红
- 关键词：活性氧血管平滑肌细胞DAPI
- 高血压血管重构研究进展——多因素协同作用机制被引量：6
- 2011年
- 高血压及其重要并发症是目前临床死亡的主要原因,但致病机制不清。交感兴奋亢进-儿茶酚胺增加、肾素-血管紧张素-醛固酮系统活性增加、糖尿病-高血糖晚期糖基化终产物（AGE）增多以及肥胖-高血脂等均可引起血管结构和功能的变化,即血管重构,并可成为引起高血压的独立危险因素。
- 李朝红
- 关键词：高血压糖尿病高血脂血管重构信号转导
- 生物机械力对血管重构的影响及机制被引量：4
- 2012年
- 生物机械力的作用到处存在,在人的生命过程中对发育、生长、疾病等都起到重要作用。生物机械力是如何作用于机体并引发一系列生理病理的变化一直是人们关注的焦点。相关研究在许多领域已经取得较好的进展,在心血管研究方面尤其如此。例如,人们初步认识到血压升高或血管构筑改变导致血流动力学改变既可为引起血管疾病的始动因素,又可为维持或加速疾病变化的终极成分,并成为比任何生长因子或致病多肽对血管结构和功能影响更加明显的独立危险因子。本文将结合我们自己的部分工作,就机械力对血管结构、功能影响及相关信号转导机制做一个简要介绍。
- 李朝红
- 关键词：信号转导血管疾病
- 机械牵张力上调小鼠血管平滑肌细胞蛋白二硫键异构酶和NADPH氧化酶1表达的观察
- 2013年
- 目的观察机械牵张力诱导小鼠血管平滑肌细胞（VSMC）蛋白二硫键异构酶（PDI）表达，并初步探讨其与NADPH氧化酶1（NOXl）表达的关系。方法体外静息培养状态的VSMC给予不同时间和强度的机械牵张力刺激，用免疫印迹法检测细胞内PDI和NOXl的表达水平。结果机械牵张力可诱导VSMC内PDI表达增加，呈时间和强度依赖性；NOXl的表达水平也呈同样方式升高。结论机械牵张力刺激通过同时上调PDI和NOXl表达，参与氧化应激的过程。本研究为临床上与生物机械力增加相关的疾病（如高血压、静脉移植性粥样硬化）致病机制的研究提供了有用资料。
- 平苏宁刘树迎李字煌王晶晶黄锦桃陈大堤汪泓李朝红
- 关键词：血管平滑肌细胞机械牵张力
