国家自然科学基金(81301149) 作品数:7 被引量:13 H指数:2 相关作者: 唐勇 修芸 张蕾 孔祥如 蒋林 更多>> 相关机构: 重庆医科大学 重庆医科大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 重庆市科委基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
抑郁症大鼠海马CA1区及齿状回毛细血管的体视学研究 被引量:5 2015年 目的:研究慢性不可预见性刺激(chronically unpredicted stress,CUS)所致抑郁症模型大鼠海马CA1区和齿状回(dentate gyrus,DG)体积及毛细血管的改变。方法:选取Sprague Dawley(SD)大鼠,经筛选后随机分为对照组10只和模型组10只。模型组采取慢性不可预见刺激建立抑郁症模型,共给予应激35 d,对照组不给予应激。利用糖水偏好实验和开场实验检测模型是否建立成功。建模成功后,分别从模型组和对照组中各随机选取5只SD大鼠,运用体视学和免疫组化染色相结合的方法对大鼠海马CA1区和DG毛细血管进行定量研究,剩余5只进行相关分子生物学研究。结果:模型组大鼠和对照组大鼠在体质量[(314.81±31.52)g,(349.18±28.23)g,t=2.569,P=0.019]、糖水偏好实验[(82.37±8.44)%,(89.33±3.97)%,t=2.359,P=0.03]、开场实验结果[(48.30±39.49)分,(87.70±38.32)分,u=-1.988,P=0.047]具有统计学差异,模型组较对照组大鼠海马总体积[(88.84±7.51)mm3,(99.89±12.55)mm3,t=2.388,P=0.028]、海马CA1区[(27.78±1.84)mm3,(32.38±3.69)mm3,t=3.522,P=0.004]和DG[(21.02±2.61)mm3,(24.20±3.33)mm3,t=2.377,P=0.029]体积明显减少,模型组较对照组大鼠海马CA1区毛细血管总长度[(8.454±1.010)m,(11.012±1.642)m,t=2.967,P=0.018]、总体积[(0.104±0.019)mm3,(0.151±0.021)mm3,t=3.720,P=0.006]、总表面积[(1.025±0.113)cm2,(1.589±0.313)cm2,t=3.794,P=0.013]、平均直径[(3.884±0.458)μm,(4.580±0.419)μm,t=2.509,P=0.036]下降以及DG毛细血管的总体积[(0.078±0.021)mm3,(0.117±0.024)mm3,t=2.716,P=0.026]、总表面积[(0.838±0.184)cm2,(1.133±0.074)cm2,t=3.32,P=0.011]、平均直径[(3.611±0.493)μm,(4.630±0.635)μm,t=2.834,P=0.022]下降,结果具有统计学意义。结论:抑郁症模型大鼠大脑海马萎缩,CA1区、DG毛细血管改变,海马结构与毛细血管的改变可能参与了抑郁症的发病机制。 谭川雪 王飞飞 陈林木 黄春霞 高原 蒋林 张毅 周春妮 晁凤蕾 张蕾 唐勇关键词:抑郁症 海马 齿状回 毛细血管 体视学 GluN3A基因缺失影响小鼠抑郁样行为及内侧前额叶皮质与海马mRNA转录组的实验研究 2023年 目的 探究GluN3A基因缺失参与抑郁样行为的潜在分子机制。方法 纳入成年雄性GluN3A基因敲除(knockout,KO)小鼠14只和同窝出生野生型(wild type,WT)小鼠15只,糖水偏好实验和强迫游泳实验后收集小鼠(每组5只)内侧前额叶皮质(medial prefrontal cortex,mPFC)和海马组织进行mRNA转录组测序,以DESeq2软件筛选差异表达基因并选取部分基因以qPCR进行验证,应用clusterProfiler软件对差异基因进行基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析,应用string在线数据库和Cytoscape软件进行蛋白互作网络分析。结果 与WT小鼠相比,GluN3A KO小鼠糖水偏好(P<0.05)和糖水消耗量(P<0.05)显著下降,强迫游泳不动时间显著增加(P<0.01);在GluN3A KO小鼠mPFC和海马组织中分别筛选出740个和666个差异基因;GO分析显示,mPFC中下调差异基因显著富集在血管生成、神经前体细胞的增殖等条目,海马中下调差异基因主要富集在突触组装、轴突发育、树突发育、轴突引导、突触膜等条目,mPFC和海马中上调差异基因均主要与胞质核糖体和核糖体亚基有关;蛋白互作网络分析显示mPFC和海马中核心基因大部分为核糖体蛋白基因。结论 GluN3A基因缺失可能通过调控血管生成、神经前体细胞增殖、突触形成及蛋白合成等途径参与抑郁样行为的发生。 张萌萌 刘文嵚 陈静 孔祥如 刘灿 曹佳宁 缪鹏 宋鸣睿 修芸关键词:抑郁 转录组学 海马 MK-801诱导的精神分裂症小鼠行为学和胼胝体髓鞘的改变 被引量:6 2013年 目的探讨白质/髓鞘损伤在N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D aspartate,NMDA)受体阻断致精神分裂症(schizophrenia,SZ)中的作用。方法雄性C57 BL/6J小鼠(8周龄)48只,随机分为地卓西平马来酸盐(dizocilpine,MK-801)慢性给药M1组(0.25mg/kg)、M2组(0.50mg/kg)和M3组(1.00mg/kg)及对照组(生理盐水)。以Morris水迷宫、探孔和转棒测试检验小鼠行为学改变,运用免疫组化、透射电镜及体视学方法观察其胼胝体内髓鞘的改变。结果各模型组小鼠与对照组比较,空间学习记忆能力无明显下降(均P>0.05),M1和M3组小鼠较对照组表现出对新环境探索减少的SZ阴性症状;大脑胼胝体区MBP染色M1组(179±10)%、M2组(235±7)%、M3组(152±9)%小鼠较对照组(288±18)%均降低(均P<0.01),其内有髓神经纤维髓鞘出现板层分离、节段性脱髓鞘等病变,M3组小鼠胼胝体内损伤有髓神经纤维比例高于对照组[(22.42±4.24)%vs.(3.84±1.35)%],差异有统计学意义(P<0.01)。结论胼胝体脱髓鞘改变可能是MK-801慢性给药诱导SZ的病因之一。 修芸 张蕾 仇玄 陈林 陈林 彭超 卢伟 晁凤蕾 彭超关键词:精神分裂症 MK-801 胼胝体 脱髓鞘 NMDA-R阻断对少突胶质细胞增殖的影响及其可能的机制 2020年 为探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA-R)在少突胶质细胞增殖中的作用及其可能的机制。本研究以C57BL/6J小鼠原代少突胶质细胞为研究对象,随机分为对照组和MK-801组,运用CCK-8、EdU方法检测细胞增殖情况,运用qRT-PCR及Western blot技术检测NMDA-R亚基NR1、NR2C、NR3A mRNA及蛋白表达情况。结果证实NMDA-R阻断剂MK-801呈浓度依赖性减少少突胶质细胞数量,即随着MK-801浓度增加,少突胶质细胞数量逐渐减少;MK-801组少突胶质细胞增殖数量(32.95±8.47)%较对照组(42.44±7.35)%明显减少(p=0.015);与对照组比较,MK-801组少突胶质细胞NMDA-R亚基NR1 mRNA(1.04±0.29 vs 0.53±0.27,p=0.01<0.05)及蛋白表达(1.00±0.10 vs 0.79±0.17,p=0.016<0.05)均降低,NR3A亚基mRNA表达也降低(1.08±0.15 vs 0.79±0.25,p=0.038<0.05),但NR2C亚基mRNA表达无变化(1.18±0.08 vs 1.02±0.17,p=0.519>0.05)。NMDA-R被阻断剂MK-801阻断后对少突胶质细胞的增殖具有抑制作用,这种作用可能通过下调NR1、NR3A亚基来介导。 姜晓迪 陈静 张蕾 窦霄云 唐勇 修芸关键词:少突胶质细胞 N-甲基-D-天冬氨酸受体 MK-801 细胞增殖 髓鞘形成相关NMDA-R亚基在精神分裂症小鼠模型中的变化 2021年 目的:探讨髓鞘形成相关N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA-R)亚基在MK-801诱导的精神分裂症小鼠模型大脑中的变化。方法:35只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为:对照组(control)和地卓西平马来酸盐处理组(MK-801),利用旷场实验、探孔实验及高架十字迷宫检测小鼠行为学改变,免疫荧光染色观察小鼠大脑NMDAR亚基NR1的表达,real time RT-PCR检测髓鞘形成相关NMDA-R亚基NR1、NR2C和NR3A mRNA的表达。结果:与对照组小鼠相比,MK-801处理组在旷场内10 min总运动路程较对照组显著增加;3 min及5 min内探孔次数较对照组显著降低;模型组小鼠在开臂内停留总时间较对照组显著降低。NR1在小鼠神经细胞胞膜、轴突周围和髓鞘部位均有表达。大脑皮层、海马内的NMDA-R亚基NR1,NR2C及NR3A mRNA的表达在两组间均无显著差异;胼胝体区域NR1和NR2C mRNA表达在两组间同样无显著差异;但相较于对照组,MK-801慢性给药组小鼠胼胝体区域NMDA-R亚基NR3A mRNA表达显著上调。结论:NMDA-R在少突胶质细胞、髓鞘等部位确有表达;胼胝体部位NR3A亚基上调可能在MK-801诱导的精神分裂症中发挥作用。 陈静 孔祥如 刘文嵚 窦霄云 赵怡 唐勇 修芸关键词:精神分裂症 NR1 雌激素替代治疗对中老年卵巢切除大鼠白质及白质内有髓神经纤维髓鞘超微结构作用的研究 被引量:1 2014年 目的:研究雌激素替代治疗(estrogen replacement therapy,ERT)对中老年卵巢切除雌性SD大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维髓鞘超微结构的作用,为以后进一步运用ERT疗延缓大脑衰老进程和防治脱髓鞘疾病提供科学依据。方法:选用40只10。12月龄中老年雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术,术后1月将成功去势的19只卵巢切除大鼠按完全随机设计方式分为实验组(n=10)与对照组(n=9),前者给予17β-雌二醇颈背部皮下注射4周,后者给予安慰剂颈背部皮下注射4周。然后采用Morris水迷宫测试2组大鼠的空间参考记忆能力,运用电镜技术及相应的体视学方法对2组大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维髓鞘超微结构进行定量研究。结果:实验组大鼠与对照组相比,其空间参考记忆能力明显增强(F=9.645,P=0.006)。与对照组大鼠相比,实验组大鼠大脑白质内有髓神经纤维髓鞘总体积和髓鞘内外周长之差均明显增加[(32.94±5.97)mm^3,(25.93±2.83)mm^3,t=2.391,P=0.040;(1.16±0.10)μm、(1.03±0.09)μm,t=2.325,P=0.045]。统计学相关分析发现,白质内有髓神经纤维髓鞘总体积与Morris水迷宫第1天潜伏期呈负相关(r=-0.744,P=-0.009)。结论:ERT对中老年卵巢切除大鼠的空间参考记忆能力及白质内有髓神经纤维髓鞘均有积极的保护作用。 何琦 罗艳敏 吕福林 肖倩 晁凤蕾 张琪娟 肖晓秋 唐勇关键词:白质 髓鞘 雌激素替代治疗 体视学 NMDA受体3A亚基基因敲除对小鼠焦虑和抑郁样行为的影响 被引量:1 2022年 目的:观察N-甲基-D-天冬氨酸受体3A亚基(NR3A)编码基因GRIN3A敲除对小鼠焦虑和抑郁样行为的影响,以探讨NR3A亚基在抑郁症中的作用。方法:通过CRISPR/Cas9技术敲除C57BL/6N小鼠GRIN3A基因第2个外显子,繁殖获得足够数量的各组小鼠。使用糖水偏好实验,悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为;使用高架O迷宫实验和旷场实验检测小鼠焦虑样行为。结果:雄性小鼠行为学显示:悬尾实验中GRIN3A^(-/-)小鼠不动时间比野生型小鼠长(P<0.01);糖水偏好实验GRIN3A^(-/-)小鼠糖水偏好(P<0.05)、总饮水量(P<0.01)和糖水饮用量(P<0.01)低于野生型小鼠,GRIN3A^(+/-)小鼠糖水偏好低于野生型小鼠(P<0.01),纯水饮用量高于野生型小鼠(P<0.01);高架O迷宫实验GRIN3A^(-/-)小鼠在封闭象限停留时间比野生型小鼠长;旷场实验GRIN3A^(-/-)小鼠粪便数多于野生型小鼠。雌性小鼠行为学显示:强迫游泳实验中GRIN3A^(-/-)小鼠不动时间比野生型小鼠长(P<0.01);糖水偏好实验GRIN3A^(-/-)小鼠糖水饮用量(P<0.01)和总饮水量(P<0.01)低于野生型小鼠。结论:雄性GRIN3A^(-/-)小鼠表现出明显的抑郁样和焦虑样行为,雄性GRIN3A^(+/-)小鼠和雌性GRIN3A^(-/-)小鼠表现出抑郁样行为。 刘文嵚 陈静 张萌萌 孔祥如 蒋林 刘灿 修芸关键词:焦虑 抑郁 小鼠