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貉细小病毒LN10-1株分离鉴定及其免疫原性研究被引量：11: 2012年; 为研制貉细小病毒性肠炎疫苗,筛选出针对貉细小病毒性肠炎免疫原性好、安全高效的疫苗备选株,应用CRFK细胞从辽宁省发病貉的粪便中分离病毒,并通过形态学、血清学、分子生物学、动物回归及免疫接种等方法对分离株进行鉴定。鉴定结果表明成功分离出1株貉细小病毒,命名为LN10-1株。其VP2基因核苷酸序列与猕猴源猫泛白细胞综合征病毒株(BJ-22/2008/CHN株)相似性高达99.7%。VP2蛋白上决定宿主范围的2个氨基酸位点发生了突变。VP2基因种系发生分析显示,LN10-1株位于猫泛白细胞综合征病毒(Feline panleukopenia virus,FPLV)、蓝狐细小病毒(Blue fox parvovirus,BFPV)、水貂肠炎病毒(Mink enteritis virus,MEV)组成的食肉类动物细小病毒聚类分支与由犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)组成的聚类分支。由LN10-1株制备的灭活疫苗免疫结果显示,接种28d细小病毒中和抗体滴度可达到1∶256以上。推测LN10-1株可能正处于FPLV与CPV进化的中间状态,或是CPV适应新宿主(貉)而形成的一种新病毒,可以作为针对貉细小病毒性肠炎灭活疫苗的候选株。; 康洪涛赵建军柴秀丽张蕾胡博闫喜军吴威; 关键词：VP2基因免疫原性

噬菌体展示技术的研究与应用: 2016年; 噬菌体展示技术是通过将外源基因导入到噬菌体结构基因中,使其在外膜蛋白进行融合表达,表达的蛋白具有良好的生物学活性,可以用于多肽筛选、蛋白质相互作用、或新型药物开发等方面的研究。随着噬菌体载体系统的逐渐完善,这一技术已经被广泛应用于生物学领域,文章主要对噬菌体展示技术的原理、噬菌体载体系统及其应用作一简要综述。; 牛登云刘昊张蕾孙彦刚闫喜军; 关键词：噬菌体展示丝状噬菌体疾病诊断抗原表位

水貂细小病毒单克隆抗体的制备及纯化方法的优化: 2014年; 为了制备并筛选出效价及特异性都较高的水貂细小病毒单克隆抗体,建立一种高纯度、高回收率的水貂细小病毒单克隆抗体的纯化方法,试验将获得的3株稳定分泌水貂细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为G2a-C9、M-C1、M-A5,通过HI、ELISA、Western-blot、间接免疫荧光等方法对这3株单克隆抗体进行生物学特性鉴定,再分别采用辛酸-硫酸铵沉淀和Protein A亲和层析两种方法对其纯化,并对Protein A亲和层析法进行了优化。结果表明:经生物学特性鉴定后筛选到1株效价与生物学活性都较高的Ig G2a类单克隆抗体G2a-C9,经Protein A亲和层析方法纯化后抗体纯度为90%,回收率为58%;辛酸-硫酸铵沉淀后的抗体纯度仅为80%,回收率为45%。纯化方法优化后,抗体纯度为95%,回收率为65%。说明制备的G2a-C9水貂细胞病毒单克隆抗体可用于后续产品的研发;经试验验证低温无水乙醇沉淀-Protein A亲和层析可用于Ig G2a类抗体纯化。; 牛登云张蕾刘昊孙彦刚陈冠华闫喜军单虎; 关键词：单克隆抗体纯化

貉细小病毒HLJ11-1株的分离鉴定及VP2基因序列分析被引量：4: 2014年; 为了研究貉细小病毒,试验从来自黑龙江省的疑似貉细小病毒感染貉的病料分离出1株貉细小病毒(Raccoon dog parvovirus,RDPV),进行了形态学、血清学、生物学和病毒分子生物学鉴定,并对分离株VP2基因进行克隆和序列分析。结果表明:分离的病毒为CPV突变株;该株病毒与肉食动物细小病毒有很高的同源性,属于CPV-2a突变株,命名为RDPV HLJ11-1,接近于CPV-2型毒株。说明RDPV HLJ11-1株可能正处于猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)与犬细小病毒(CPV)进化的中间状态,或是为CPV适应新宿主(貉)而形成的一种新病毒,可以作为针对貉细小病毒性肠炎灭活疫苗的候选株。; 呼延良澔钱爱东张海玲胡博张蕾闫喜军; 关键词：病毒毒力间接免疫荧光 VP2基因 NS基因

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吉林省科技发展计划基金(20115023)