国家自然科学基金(31272692) 作品数:27 被引量:119 H指数:7 相关作者: 吕爱军 胡秀彩 孙敬锋 李莉 宋亚娇 更多>> 相关机构: 天津农学院 河南师范大学 江苏师范大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 天津市自然科学基金 河南省高校科技创新团队支持计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 环境科学与工程 更多>>
蛹虫草菌种退化的探讨 被引量:15 2015年 蛹虫草具有与冬虫夏草极相似的药理药效,可以作为冬虫夏草的代用品,但其菌株在继代培养过程中极易退化导致产量急剧下降,是影响行业发展的核心技术问题。对蛹虫草退化菌种形态学、遗传学及子实体变化,并对当前研究中存在问题及解决菌种退化的方法进行探讨。 胡秀彩 吕爱军关键词:蛹虫草 金鱼腐皮病病原菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:8 2017年 从患腐皮病金鱼肝脏中分离获得1株细菌,编号为KL-1,通过细菌形态观察、生理生化特性、16S rDNA克隆测序及构建发育树分析等系统鉴定,并进行动物感染试验、药敏特性研究。结果表明,KL-1菌株为革兰氏阴性短杆菌,可发酵葡萄糖产气,氧化酶、接触酶、赖氨酸脱羧酶等为阳性;进一步采用PCR方法扩增16S rDNA序列,将其亚克隆至p MD18-T载体中,测序获得长度为1 507 bp,与Aeromonas veronii模式菌株ATCC 35624(X74684)序列相似性为99.66%,构建系统进化树分析与其聚为一支,鉴定KL-1菌株为维氏气单胞菌(Aeromones veronii)。动物感染试验表明,对斑马鱼半数致死量LD50为1.4×107 cfu/m L。药敏试验结果显示,该病原菌对头孢克肟、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢氨苄、萘啶酸、恩诺沙星、左氟沙星、诺氟沙星、氟苯尼考和氯霉素等药物敏感。 康雪微 胡秀彩 孙金辉 孙敬锋 吕爱军 宋亚娇 YEONG Yiksung 石洪玥 郭立关键词:金鱼 维氏气单胞菌 药敏试验 鲫皮肤蛋白质组双向电泳与部分蛋白点的质谱鉴定 2016年 为了建立鱼类皮肤蛋白质组双向电泳图谱及质谱鉴定,以鲫为实验动物,采用蛋白双向电泳(2-DE)结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)技术,进行鲫皮肤的蛋白质组学研究。结果表明,当上样量为800μg,采用18 cm、p H3-10 IPG胶条,等电聚焦80 000 Vh,2-DE图谱检测为214个皮肤蛋白点,匹配率达88%;对其中31个蛋白点进行MS/MS鉴定为22种蛋白,包括肌球蛋白、肌动蛋白、角蛋白、锌指蛋白585B、效应蛋白Rab15、卷曲螺旋结构域蛋白168、NCK1相关蛋白,肌酸激酶、烯醇化酶、丙酮酸脱氢酶、腺苷酸激酶同工酶等;进行蛋白功能聚类(GO)分析发现12种生物学过程,主要参与代谢、细胞、有机体、免疫应答、生物调节和信号等过程。本研究首次初步揭示鲫皮肤蛋白质组及分子机制,以期为鱼类病害的预防和治疗提供科学参考。 胡秀彩 沈晓静 吕爱军 孙敬锋 YEONG Yiksung 宋亚娇 李莉 孔祥会关键词:皮肤 蛋白质组 双向电泳 质谱 养殖半滑舌鳎肝胰、中肾、鳃、头肾、脾和心中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和过氧化物酶的组织化学定位 被引量:8 2017年 目的研究半滑舌鳎肝胰、中肾、鳃、头肾、脾和心中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)和过氧化物酶(POX)的分布及组织定位。方法取健康半滑舌鳎肝胰、中肾、鳃、头肾、脾和心组织进行固定,冰冻切片后进行酶组织化学染色和光密度定量统计分析。结果 ACP活性部位为棕色,主要分布于肝胰小叶间胆管和静脉,中肾肾小体中的肾小球和肾间质的肾小管,头肾和脾中的巨噬细胞以及心肌层中,在鳃中未见有分布;ALP活性部位被染为蓝紫色,主要分布于肝胰的胰腺腺泡内,中肾肾间质的肾小管,鳃的鳃丝血管和上皮细胞,脾静脉的管壁处和椭圆体,心外膜和肌膜上以及头肾的血窦腔内皮;POX活性部位被染为茶褐色,主要分布于肝胰小静脉和肝血窦内的血细胞,中肾肾间质的血细胞,鳃的鳃丝血管、鳃小片血窦和上皮细胞,头肾、脾内的血细胞以及心的心肌层和血细胞中。ACP活性由大到小依次为心、肝胰、脾、中肾、头肾;ALP活性由大到小依次为中肾、鳃、头肾、脾、心、肝胰;POX活性由大到小依次为脾、头肾、肝胰、中肾、鳃、心。结论 ACP、ALP和POX在半滑舌鳎6种组织中分布特点不同,其活性大小在不同组织中有显著差异。 王一泽 孙敬锋 刘军锋 郭永军 邢克智 吕爱军 Yeong Yiksung关键词:半滑舌鳎 酶组织化学 碱性磷酸酶 过氧化物酶 草鱼肠道不动杆菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:5 2016年 从草鱼肠道中分离获得1株细菌,编号为CAX1,进行细菌形态学观察、理化特征、16S r DNA序列分析及药敏试验等研究。结果表明CAX1菌株为革兰氏阴性短杆菌,进一步采用PCR方法扩增其16S r DNA,测序显示其大小为1 531 bp,序列比对表明CAX1分离株与厦门不动杆菌新种(Acinetobacter xiamenensis)16S r DNA同源性达97.1%,系统进化树分析显示CAX1菌株与不动杆菌亲缘关系最近,自然聚类为1支;药敏试验结果显示CAX1菌株对庆大霉素、阿莫西林、氨苄西林、头孢哌酮等药物敏感。 胡秀彩 李旭 吕爱军 石洪玥 孙敬锋 陈成勋 冯照军关键词:草鱼 肠道细菌 系统进化树 毛蚶外套膜和鳃组织中神经型一氧化氮合酶免疫组织化学定位研究 被引量:1 2017年 应用免疫组织化学方法研究神经型一氧化氮合酶在毛蚶(Scapharca kagoshimensis)外套膜和鳃组织中的分布及定位,应用蛋白免疫印迹技术对外套膜和鳃组织中的神经型一氧化氮合酶进行鉴定,并对其分子量进行测定。免疫组织化学研究结果表明,神经型一氧化氮合酶的阳性结果显示为棕褐色,主要分布于细胞质中。在外套膜组织边缘膜和边缘膜突起的上皮细胞、疏松结缔组织黏液细胞和血细胞有阳性反应;在鳃组织的鳃丝黏液细胞、血细胞和上皮细胞中有阳性反应。蛋白免疫印迹研究结果表明,外套膜和鳃组织的SDS-PAGE电泳图谱中有两条阳性反应条带,分子量分别为120kD和80kD。实验结果为深入研究一氧化氮及神经型一氧化氮合酶在毛蚶外套膜和鳃组织中的生理功能提供了组织形态学资料。 孙敬锋 王一泽 吕爱军 Yeong Yik Sung 董少杰 郭永军 邢克智关键词:毛蚶 外套膜 鳃组织 神经型一氧化氮合酶 免疫组织化学定位 鲫鱼肠道中枯草芽孢杆菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:4 2014年 从鲫鱼肠道中分离纯化获得1株革兰氏阳性菌,编号为CB-1,通过细菌形态学观察、理化特性等研究,初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),该菌株能利用葡萄糖产酸,β-半乳糖苷、明胶液化试验为阳性,葡萄糖酸盐、硫化氢、吲哚试验等为阴性;药敏试验结果表明,CB-1菌株对头孢噻吩、卡那霉素、阿奇霉素等抗生素敏感,对洁霉素、甲硝唑、制霉菌素等不敏感。为进一步研究枯草芽孢杆菌与鱼类健康养殖关系提供参考。 李旭 李雪 胡秀彩 蔡婷婷 许健 余红 朱爱华 吕爱军关键词:鲫鱼 肠道细菌 枯草芽孢杆菌 药敏试验 鱼类皮肤免疫应答及蛋白质组学 被引量:8 2016年 鱼类皮肤作为黏膜免疫系统的重要组成部分,也是阻止病原微生物进入体内的第一道防线。鱼类皮肤黏膜免疫系统不仅对宿主防御病原侵入是必要的,而且对水产养殖疫苗应用也十分重要。近年来,与系统免疫相比而言,鱼类皮肤黏膜免疫应答研究备受关注。笔者针对鱼类皮肤免疫应答的分子机制及蛋白质组学研究进行简要综述,以期为鱼类病害的预防和治疗提供科学参考。 吕爱军 胡秀彩 孙敬锋 石洪玥 陈成勋 李莉 孔祥会关键词:鱼类 皮肤 免疫应答 蛋白质组学 金鱼类志贺邻单胞菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:10 2015年 从患病金鱼肝脏中分离获得一株细菌,编号为ZP-1,通过细菌形态学观察、理化特征、16SrDNA克隆测序以及系统进化树分析等方法进行鉴定。试验结果表明,ZP-1菌株为革兰氏阴性短杆菌,可以发酵葡萄糖、乳糖产酸、还原硝酸盐、产生吲哚等。进一步采用PCR方法扩增ZP-1菌株16SrDNA,将其亚克隆至pMD18-T载体中测序,获得长度为1464bp(登录号:KM458852),与鱼源致病性类志贺邻单胞菌(KC825322)同源性为99.80%,最终确定ZP-1菌株为类志贺邻单胞菌。采用30种抗生素进行药敏试验,ZP-1菌株对头孢噻肟、头孢克肟、头孢孟多、庆大霉素、丁胺卡那霉素、萘啶酸、氯霉素、氧氟沙星等药物敏感。 张培 朱爱华 胡秀彩 兰云 李雪 沈晓静 吕爱军关键词:金鱼 类志贺邻单胞菌 药敏试验 鲇源异嗜糖气单胞菌的分离鉴定及药敏特性 被引量:2 2018年 从发病鲇鱼体内分离出1株革兰氏阴性细菌SJ-2,通过细菌形态学观察、理化特性、16S rDNA测序以及构建系统发育进化树分析,表明SJ-2菌株葡萄糖产气、氧化酶、硝酸盐还原为阳性,鸟氨酸脱羧酶、硫化氢为阴性等;进一步采用PCR方法扩增16S rDNA序列,测序获得片段大小为1 401 bp,与Aeromonas allosaccharophila模式菌株ATCC51208序列相似性达99.64%;构建系统发育树分析显示分离菌与Aeromonas allosaccharophila自然聚为一支,最终判定SJ-2菌株为异嗜糖气单胞菌(A.allosaccharophila)。人工腹腔注射斑马鱼死亡率达100%,病鱼呈现体色变白、腹水等症状。药敏试验结果显示对头孢克肟、头孢哌酮、头孢噻肟、诺氟沙星、左氟沙星、氟苯尼考等药物敏感,对阿莫西林、氨苄西林、磺胺异唑、复方新诺明等耐药。首次报道鲇源异嗜糖气单胞菌的分子鉴定与药敏特性,旨在为该病防治提供参考。 胡秀彩 陆梦莹 孙敬锋 吕爱军 陈成勋 王晓梅关键词:RDNA 系统发育树 药敏试验