广东省自然科学基金(05300604)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 相关作者：郭振宇郑芹雷俊霞罗灿乔赵东长更多>>
- 相关机构：中山大学广东省妇幼保健院广州医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同品系小鼠骨髓间质干细胞扩增能力及细胞表型差异的比较被引量：6
- 2008年
- 背景:虽然近年来对小鼠骨髓间质干细胞分离培养的报道层出不穷,但就其方法而言,有的操作步骤过于繁琐,有的不适用于国内相关实验,如采用一系列抗体负选或利用自行研制的新抗体筛选。目的:拟建立简便稳定的小鼠骨髓间质干细胞体外分离和扩增的方法,并比较不同品系小鼠骨髓间质干细胞的生物学特点。设计、时间及地点:细胞学体外对比观察,于2007-04/09在中山大学中山医学院病理生理教研室完成。材料:清洁级6周龄雄性C57BL/6和BABL/C小鼠各5只,由中山大学中山医学院实验动物中心提供。方法:取两种品系小鼠双侧股骨,去除股骨上附带组织,用含10% FCS的DMEM培养基冲洗骨髓腔,过200目不锈钢网,收集骨髓细胞,用Tris-NH4Cl红细胞裂解液溶解2min,用含10% FCS的DMEM培养基调整细胞浓度,按500个细胞/孔低密度接种于24孔板,置于37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中。出现成纤维样细胞克隆后消化收集并移至6孔板,待细胞70%～80%融合时消化传代。主要观察指标:细胞形态和生长特点,流式细胞仪检测细胞表型,茜素红染色观察成骨诱导情况,油红O染色观察成脂诱导情况。结果:约培养2周可形成细胞克隆,经历一缓慢扩增阶段后,第6～7代细胞生长明显加快,可见形态均一的成纤维细胞群,呈典型的旋涡状生长,两种品系小鼠骨髓间质干细胞均可传至10代以上,但C57BL/6小鼠骨髓间质干细胞体外扩增能力更强。C57BL/6和BABL/C小鼠骨髓间质干细胞均呈CD45-CD11b-CD117-,CD44和Sca-1呈阳性表达,可连续表达MHC-I,少量表达CD80,此外前者可少量表达MHC-Ⅱ,而后者几乎不表达MHC-Ⅱ。两者体外均能够向成骨、成脂方向分化。结论:通过低密度培养技术可简单方便的体外分离并扩增C57BL/6和BALB/c小鼠骨髓间质干细胞。两品系小鼠骨髓间质干细胞均易向成骨成脂分化,但在扩增能力、细胞表型上略有不�
- 郭振宇郑芹雷俊霞
- 关键词：骨髓间质干细胞C57BL/6BALB/C
- 大鼠同种异体骨髓移植慢性移植物抗宿主疾病模型的建立被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨同种大鼠骨髓移植建立慢性移植物抗宿主疾病模型的可行性,旨在为骨髓间质干细胞对同种异体骨髓移植后移植物抗宿主疾病免疫调节作用的系列研究提供前提条件。方法:实验于2006-04/2006-09在中山大学基础医学院病理学与病理生理实验室完成。①选取清洁级6周龄雄性体Fischer344大鼠(RT1Al)作为供体,清洁级6周龄雌性Waster(RT1Au)大鼠作为受体。②受体大鼠移植前3d开始饮用含庆大霉素(320mg/L)和红霉素(250mg/L)的饮用水。移植当天采用60Coγ射线全身照射法进行预处理,照射剂量为8.0Gy,剂量率为0.7Gy/min。经预处理的受体鼠在照射后6h内,经尾静脉进行骨髓移植,并分组:骨髓移植组(n=10,每只大鼠移植0.8×108个骨髓细胞)、单纯照射组(n=10,预处理后通过尾静脉注射等量的磷酸缓冲液)。观察移植后大鼠的活动、饮食、二便、皮毛、体质量变化情况及靶器官皮肤、肝脏、肠的组织学病理改变。结果:①单纯照射组10只大鼠在预处理后的17d内全部死亡,死亡高峰集中在移植后11和12d左右。骨髓移植组有较高的存活率,除第12,16,18天死亡3只,其余均在60d的观察期内存活。②骨髓移植组大鼠未出现急剧消瘦和严重腹泻等急性移植物抗宿主疾病表现,移植受体体质量增加缓慢,移植后1月受体头背部可见明显脱毛现象,随着时间延长,范围逐渐扩大至腹部和肢体内侧。移植后2个月皮肤可见毛囊缺失和轻度单核细胞浸润,小肠固有层可有中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞等炎症细胞浸润,肝脏的表现最为典型,80%以上的汇管区淋巴细胞浸润,胆管细胞坏死并伴有胆管壁纤维化。结论:①通过大鼠F344→Wistar的同种骨髓移植,可建立稳定的慢性移植物抗宿主疾病模型。②模型的病理变化可表现在皮肤、肠道和肝脏,其中肝脏的表现尤其典型,80%以上的汇管区和胆管淋巴细胞浸润,�
- 郭振宇雷俊霞郑芹罗灿乔
- 关键词：骨髓移植移植物抗宿主病
- 骨髓间质干细胞对大鼠移植物抗宿主效应和脾脏结构的影响被引量：2
- 2008年
- 【目的】探讨骨髓间质干细胞(MSC)对同种大鼠骨髓移植后移植物抗宿主反应(GVHD)的影响,尤其是MSC对脾脏结构重建的作用。【方法】建立Fischer344(RT-1Al)大鼠至Wistar(RT-1Au)大鼠的同种异体骨髓移植模型,观察移植后大鼠的基本生活情况,病理学分析靶器官皮肤、肝脏、肠道和脾脏的组织学改变,尤其注意MSC对同种骨髓移植后脾脏结构重建的影响。【结果】①在移植后30d的观察期内,共移植组显示较高的生存率。②组织学分析显示:在共移植组,靶器官皮肤、肝脏、肠道的损伤相对较轻。③脾脏组织学分析显示:在骨髓与MSC共移植组,受体脾脏结构接近正常;在单纯骨髓移植组,受体脾脏白髓萎缩,动脉周围淋巴鞘只有少量T细胞,无典型脾小结形成。【结论】MSC与骨髓共移植对GVHD有抑制作用,并显著促进脾脏结构重建。
- 雷俊霞郭振宇赵东长温冠媚张秀明郑芹李树浓项鹏
- 关键词：间质干细胞骨髓移植移植物抗宿主脾脏
