国家自然科学基金(39870746)
- 作品数：16 被引量：30H指数：4
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- 脂质体介导nm23-h1质粒体内转染腺样囊性癌可行性
- 2005年
- 目的 :研究阳离子脂质体介导nm2 3-h1质粒体内转染腺样囊性癌 (ACC)的可行性。方法 :将腺样囊性癌细胞株体外培养后移植入 2 4只裸鼠体内。ACC瘤体长至直径 1cm左右时 ,用脂质体包裹nm2 3-h1质粒进行瘤体内注射 ,每次注入质粒及脂质体复合物 0 1ml (其中含质粒约 2 0 μg/ml) ,其中 6只裸鼠共注射 2次 ,6只裸鼠注射一次 ,6只作空白对照。 6只裸鼠一次注射 0 2ml质粒及脂质体复合物。注射后 2、 3、 7天处死动物 ,获取肿瘤标本作常规组织学及免疫组化研究。结果 :瘤体内注射 3天后肿瘤细胞内即有nm2 3-h1表达 ,7天后表达增加 ,肿瘤细胞外间质增加 ,2次注射较一次注射、多针道注射较单一针道注射有更多的细胞呈阳性表达 ,但阳性表达范围小 ,效率低 ,不具备临床实施的可能性。
- 李文王力红温玉明彭文珍杨凯
- 关键词：基因治疗NM23阳离子脂质体腺样囊性癌
- nm23-h1基因导入对腺样囊性癌分化的影响被引量：6
- 2001年
- 目的 探讨ｎｍ２３－ｈ１ 基因对腺样囊性癌细胞分化的影响。方法 体外用阳离子脂质体介导ｎｍ２３－ｈ１质粒转染人口腔涎腺腺样囊性癌（ＡＣＣ）细胞株，筛选出转染阳性细胞克隆，并植入４只棵鼠颌面部，３ｗ后获取标本，石蜡包埋后进行常规组织学及免疫组织化学检查，实验以未转染的阴性细胞克隆植入４只裸鼠作对照。结果ｎｍ２３－ｈ１阳性ＡＣＣ植入棵鼠体内后肿瘤细胞有向原代细胞回归的倾向，即由实体型向筛状型或管状型转变，肿瘤细胞周围的肿瘤间质增多，巢状的肿瘤细胞外围有基底膜样结构形成；肿瘤细胞在体内增殖的过程中，表达ｎｍ２３－ｈ１的细胞数量有逐渐减少、表达强度减弱的趋势。结论 以ｎｍ２３－ｈ１为靶基因的基因治疗因同时具有抑制转移和促进分化的作用，具有较大的研究价值和临床应用前景。
- 温玉明李文王昌美李龙江杨湛陈亚多
- 关键词：腺样囊性癌分化口腔肿瘤肿瘤转移
- nm23-H1转染Tca8113细胞后稳定表达细胞株的建立被引量：1
- 2005年
- 目的:建立稳定高表达nm23-H1的细胞株。方法:将nm23-H1真核表达质粒转化大肠杆菌,制备感受态细菌。提取质粒,酶切琼脂糖电泳对质粒进行鉴定。脂质体介导将质粒转染人舌鳞癌细胞株Tca8113,G418持续筛选5周,对获得的细胞株进行免疫组化、Western-blott和流式细胞仪鉴定。结果:酶切琼脂糖电泳证实插入nm23-H1片段长度为986bp,质粒片段长度为6550bp,nm23-H1的cDNA被插入在pCMV-Bam-Neo中的BamH1区域。免疫组化、Western-blott和流式细胞仪鉴定表明nm23-H1高表达。结论:成功建立稳定高表达nm23-H1的细胞株。
- 郅克谦陈伟辉温玉明
- 关键词：NM23-H1质粒转染细胞株
- 脂质体介导nm23-h1质粒体内转染腺样囊性癌可行性被引量：1
- 2005年
- 目的研究阳离子脂质体介导nm23_h1质粒体内转染腺样囊性癌的可行性。方法将腺样囊性癌细胞株体外培养后移植入40只裸鼠体内。ACC瘤体长至直径1 cm左右时,用脂质体包裹nm23_h1质粒进行瘤体内注射,每次注入质粒-脂质体复合物0.1 ml,其中10只裸鼠每只注射2次,10只裸鼠注射1次,10只作空白对照,10只裸鼠多针道注射0.2 ml质粒及脂质体复合物。注射后2、3、7 d处死动物,获取肿瘤标本作常规组织学及免疫组化研究。结果瘤体内注射质粒-脂质体复合物3 d后肿瘤细胞内均有nm23_h1表达,7 d后表达增加,肿瘤细胞外间质增加,2次注射较1次注射、多针道注射较单一针道注射有更多的细胞呈阳性表达。结论脂质体介导nm23_h1质粒体内转染腺样囊性癌可获得小范围阳性表达,但还不具备临床实施的可能性。
- 李文温玉明彭文珍
- 关键词：基因治疗NM23阳离子脂质体腺样囊性癌
- nm23-H1质粒和顺铂白蛋白联合治疗裸鼠移植瘤被引量：2
- 2006年
- 目的研究nm23-H1质粒和顺铂白蛋白联合应用对裸鼠移植瘤的影响。方法将15只BALB/C雌性裸鼠随机等量分为3组,即对照组、顺铂白蛋白组和顺铂白蛋白+nm23-H1质粒组。每只裸鼠均皮下注射浓度为每毫升 3．1×106个的舌鳞癌Tca8113细胞,2周后顺铂白蛋白+nm23-H1质粒组移植瘤瘤体内注射质粒-脂质体复合物,3d后顺铂白蛋白+nm23-H1质粒组和顺铂白蛋白组瘤体内注射顺铂白蛋白。观察裸鼠的重量、移植瘤体积和瘤体重量的变化。结果对照组裸鼠重量最轻。nm23-H1质粒和顺铂白蛋白联合治疗组肿瘤体积最小,瘤体重量最轻。结论 nm23-H1基因治疗和顺铂白蛋白联合可以明显抑制裸鼠移植瘤的生长。
- 郅克谦陈伟辉温玉明
- 关键词：NM23-H1顺铂移植瘤
- nm23-H1对顺铂化疗效果影响的体外研究被引量：2
- 2006年
- 目的nm23-H1对顺铂化疗效果的影响及其可能机制。方法通过脂质体转染法,将nm23-H1转染入舌癌细胞株Tca8113,经免疫组化和Western-bloting鉴定,建立稳定表达细胞株。检测转染组和未转染组顺铂杀伤率、细胞凋亡和线粒体膜电位的变化。结果nm23-H1过表达可以明显提高顺铂对舌癌细胞的杀伤率,使细胞凋亡增强,线粒体膜电位降低。这种作用可以被哇巴因抑制。结论nm23-H1可提高顺铂对舌癌细胞化疗的敏感性,其可能机制是nm23-H1降低线粒体膜电位,顺铂进入细胞内增加,导致细胞凋亡和坏死。
- 郅克谦陈伟辉温玉明杨壮群
- 关键词：NM23-H1顺铂化疗舌癌
- nm23-H1基因对口腔癌Acc-M细胞株的转移能力及化疗敏感性影响的体外研究被引量：9
- 2003年
- 目的 通过 nm2 3- H1的转化及导入 Acc- M细胞株 ,建立稳定、高效、低毒的转染方法 ,观察 nm2 3- H1对 Acc- M细胞株侵袭转移能力及化疗敏感性的影响。方法 采用基因转化技术 ,制备高纯度的 nm2 3- H1真核表达质粒。用阳离子脂质体介导的转染技术 ,将 nm2 3- H1基因转染到口腔腺样囊性癌 Acc- M细胞株。用免疫组化技术检测转染前后的 nm2 3- H1的表达。并用 transwell小室和冲刷实验 ,观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化。采用 MTT法观察 nm 2 3- H1对 Acc- M化疗敏感性影响。结果 1使用重组的 p CMV - Neo- Bam的真核表达载体 ,将 nm 2 3- H 1转染口腔癌细胞 ,并获得稳定表达。 2 Acc- M细胞株 nm2 3- H 1基因的转染前后表达水平有明显差异。 3转染后的 Acc- M细胞侵袭、粘附、趋化运动能力均显著降低。 4转染前后使用 C- DDP的 L D50 分别为2 .6 4± 0 .4 7,1.85± 0 .4 1(P<0 .0 1)。结论 nm2 3- H1对 Acc- M细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用 。
- 陈绍维廖湘凌潘剑杨凯华成舸温玉明
- 关键词：NM23-H1ACC-M化疗敏感性口腔癌
- nm23-H1基因对BcaCD885细胞侵袭、粘附和运动力影响的研究被引量：5
- 2003年
- 目的 通过nm2 3 H1的转化及导入BcaCD885细胞株 ,建立稳定、高效、低毒的转染方法 ,观察nm2 3 H1对BcaCD885细胞株侵袭转移能力的影响。方法 ①利用基因转化技术 ,制备高纯度的nm2 3 H1真核表达质粒 ;②利用阳离子脂质体介导的转染技术 ,完成转染方法的建立 ;③利用免疫组化技术 ,检测转染前后的NDPKA的表达 ;④利用transwell小室和冲刷实验 ,观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化。结果 ①使用重组的pCMV Neo Bam的真核表达载体 ,将nm2 3 H1转染口腔癌细胞 ,并获得稳定表达 ;②发现BcaCD885细胞株nm2 3 H1基因的转染前后表达水平有明显差异 ;③转染后的BcaCD885细胞侵袭、粘附、趋化运动能力均显著降低。结论 nm2 3
- 陈绍维温玉明李龙江潘剑王昌美廖湘凌
- 关键词：NM23-H1基因BCACD885细胞肿瘤浸润口腔癌
- nm23-H1基因抑制口腔癌细胞的侵袭转移行为机制的实验研究
- 2003年
- [目的]将nm23-H1导入口腔癌BcaCD885细胞株,观察nm23-H1对BcaCD885细胞株侵袭转移能力的影响,并对相关机制进行分析。[方法]制备高纯度的nm23-H1真核表达质粒,并用阳离子脂质体介导的转染技术,完成转染方法的建立。检测转染前后的NDPKA的表达并观察转染前后细胞的侵袭转移行为能力的变化。[结果]将nm23-H1转染口腔癌细胞,获得了稳定表达,发现BcaCD885细胞株nm23-H1基因的转染前后表达水平有明显差异,实验组和对照组的侵袭细胞相对数目分别为41.1％±1.2％和64.5％±6.3％,趋化运动细胞相对数目为50.0％±6.3％和81.0％±3.9％,实验组的粘附能力也显著降低。[结论]nm23-H1对BcaCD885细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用。
- 陈绍维黄洪章
- 关键词：口腔癌NM23-H1基因基因转染肿瘤侵袭
- nm23-H1基因对Tca8113的转移能力及化疗敏感性影响的实验研究被引量：7
- 2003年
- 目的 通过nm2 3_H1的转化及导入Tca81 1 3细胞株 ,建立稳定、高效、低毒的转染方法 ,观察nm2 3_H1对Tca81 1 3细胞株侵袭转移能力的影响。方法 利用基因转化技术 ,制备高纯度的nm2 3_H1真核表达质粒。利用阳离子脂质体介导的转染技术 ,完成转染方法的建立。利用免疫组化技术 ,检测转染前后的nm2 3_H1的蛋白产物核苷二磷酸激酶A (NDPKA)的表达。利用transwell小室和冲刷实验 ,观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化。MTT法观察nm2 3_H1对Tca81 1 3化疗敏感性影响。结果 使用重组的pCMV_Neo_Bam真核表达载体 ,将nm2 3_H1转染口腔癌细胞 ,并获得稳定表达。Tca81 1 3细胞株nm2 3_H1基因转染前后表达水平有明显差异 ,转染后Tca81 1 3细胞侵袭、粘附、趋化运动能力均显著降低 ,转染前后Tca81 1 3细胞株对阿霉素 (ADM)、5_氟尿嘧啶 (5_FU)、甲氨喋呤 (MTX)的化疗敏感性无显著差异 ,转染后Tca81 1 3细胞株对顺铂 (CDDP)明显增敏。结论 nm2 3_H1对Tca81 1 3细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用 ,nm2
- 陈绍维黄洪章潘剑温玉明廖湘凌王昌美李芃杨凯
- 关键词：NM23-H1基因TCA8113化疗敏感性口腔癌癌细胞
