国际科技合作与交流专项项目(20072072)
- 作品数：9 被引量：26H指数：4
- 相关作者：向本春郑银英崔百明程朝玲乔亚红更多>>
- 相关机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 加工番茄马铃薯Y病毒一步法RT-PCR检测及CP基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2013年
- 本文通过一步法RT-PCR技术,检测新疆加工番茄马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)感染率。结果表明,新疆加工番茄马铃薯Y病毒感染率为25%。选取10个样品利用RT-PCR技术,克隆CP基因,获得807 bp全长CP基因,编码268个氨基酸。CP基因序列比对分析与系统进化树分析表明,侵染新疆加工番茄的马铃薯Y病毒属于PVYN:O株系。
- 梁学超向本春程朝玲苏海娣郑银英
- 关键词：马铃薯Y病毒加工番茄CP基因
- 抗ToMV转基因加工番茄的培育
- 新疆是加工番茄种植和加工的主要基地之一,其光热资源丰富,昼夜温差大,气候干燥,非常适宜加工番茄的生长和发育,为加工番茄的种植提供了得天独厚的自然条件。近年来,病毒病对加工番茄产业的持续发展造成了严重的为害,给农业生产和农...
- 乔亚红张丽丽郑银英向本春
- 关键词：番茄花叶病毒RNAI转基因抗病毒
- 抗CMV和ToMV RNAi载体的构建及加工番茄遗传转化被引量：3
- 2014年
- 【目的】利用农杆菌介导法将抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12转入红番3号加工番茄,获得抗CMV和ToMV的加工番茄植株,为加工番茄病毒病的防治奠定基础。【方法】采用RT-PCR扩增,选取新疆加工番茄CMV分离物NS0-4 1a复制酶第1 051-1 350bp序列和ToMV分离物SCS-2 130/180ku复制酶第1 920-2 200bp序列,作为干扰片段CR12和To12。通过T克隆载体将CR12和To12连接成拼接片段TC12,构建成含反向重复结构拼接片段的RNAi表达载体pBi35STC12。通过农杆菌介导法,用其转化红番3号加工番茄,经过筛选、PCR检测得到转基因植株。【结果】成功构建了抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12,并用其转化番茄植株,从转化的1 500个愈伤组织中获得33株再生植株,利用PCR对再生植株进行检测,显示从33株再生植株中获得了19株转基因植株,转化率为1.26%。【结论】构建了抗CMV和ToMV的RNAi表达载体pBi35STC12,用其转化红番3号加工番茄,获得了转基因植株。
- 乔亚红田桂英郑银英崔百明李诗林向本春
- 关键词：CMVTOMVRNAI载体加工番茄
- 利用酵母双杂交系统筛选与ToMV CP、MP和CMV2b相互作用的寄主因子
- 为了研究番茄病毒与寄主植物加工番茄的相互作用和ToMV和CMV的致病机制和寄主的抗病作用机理及开发具抗病种质资源加工番茄新材料.利用酵母双杂交系统从加工番茄cDNA文库中筛选出了可能与ToMV CP、MP和CMV 2b具...
- 王子华梁学超林涛苏海娣崔百明郑银英向本春
- 关键词：酵母双杂交TOMVCMV
- 新疆石河子南瓜和加工番茄CMV卫星RNA与RNA3序列分析被引量：4
- 2013年
- 为探究石河子地区侵染南瓜和加工番茄的CMV卫星RNA及基因组RNA3的分子变异及株系分化,从石河子蔬菜研究所采集南瓜和加工番茄样品并提取dsRNA,利用RT-PCR方法克隆5个CMV卫星RNA序列和2个CMV RNA3序列,南瓜样品卫星RNA及RNA3分别命名为N-sate和N-R322,片段大小分别为335nt和2 214nt;加工番茄样品卫星RNA及RNA3分别命名为To-9-sate、S18-1、S9、S18-2和To-9-R322,片段大小分别为381nt、396nt、334nt、334nt和2 216nt。卫星RNA序列分析结果显示,卫星RNA的序列差异与地域有一定的相关性,与寄主类别无关。同时这5个卫星RNA序列都不含有CMVYSAT所具有的黄化区域。N-R322和To-9-R322序列分析结果显示,二者均属于CMV亚组ⅠB,且CMV分离物有一定的地域相关性,没有明显寄主相关性。
- 程朝玲梁学超向本春郑银英
- 关键词：黄瓜花叶病毒卫星RNA株系分化
- 新疆石河子、伊宁地区黄瓜花叶病毒株系分化被引量：9
- 2013年
- 为了研究新疆黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)分子变异及株系分化,对从石河子和伊宁地区采集的205个加工番茄、23个辣椒、4个番茄、2个南瓜样品进行酶联免疫检测和RT-PCR检测。在4种寄主上均检出了亚组Ⅰ型CMV,其中加工番茄的感染率高达74.15%。进一步对来自辣椒的YN-6、LJ-4、L-10,加工番茄的S1-1、S1-14,番茄的YN-2,以及南瓜的YN-9等7个样品CP、RNA3、MP核苷酸序列进行相似性和进化树分析。7个样品与CMV亚组ⅠB株系分离物的相似性较高、亲缘关系最近,均可归为CMV亚组ⅠB。而来自辣椒的LJ-4、L-10与其余5个样品的序列相似性较低,亲缘关系较远,在进化树上形成独立分支。说明在新疆加工番茄及其它蔬菜上广泛流行的CMV存在分子变异。
- 程朝玲向本春崔百明郑银英
- 关键词：黄瓜花叶病毒血清学RT-PCR株系分化
- 新疆加工番茄上南方番茄病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达被引量：6
- 2015年
- 【目的】克隆南方番茄病毒(STV)的外壳蛋白(CP)基因,构建其原核表达载体并进行诱导表达,为制备检测该病毒的高效价血清提供参考。【方法】利用一步法RT-PCR从新疆加工番茄上克隆STVCP基因,将其连接到原核表达载体pET-28a(+)上,获得重组质粒pET-28a-STV CP。将重组质粒转化大肠杆菌BL21后用IPTG进行诱导表达。【结果】成功克隆了STVCP基因,其长度为1 134bp。构建了原核重组表达质粒pET-28a-STV CP,其在1mmol/L IPTG诱导下,成功表达出分子质量约47ku的蛋白。【结论】成功克隆了STV CP基因,并诱导了pET-28a-STV CP重组蛋白的原核表达。
- 张强崔百明郑银英向本春
- 关键词：外壳蛋白基因原核表达
- 小西葫芦黄花叶病毒石河子分离物的分子变异被引量：2
- 2015年
- 为了研究小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)石河子分离物的分子变异情况,本研究采用ELISA及一步法RT-PCR对2010-2014年采自石河子地区的30个葫芦科植物样品进行ZYMV检测,从阳性样品中通过一步法RT-PCR克隆其ZYMV分离物的CP基因,经PCR-SSCP分析,将带型一致的ZYMV分离物进行归类,每种类型中选取1个代表性的分离物进行CP基因测序,分析其核苷酸及推导的氨基酸序列的差异。结果显示:2种检测方法的检出率分别为63.33%和83.33%;根据ZYMV CP基因SSCP带型,将21个分离物分为5种不同的类型;其5个代表性分离物的CP核苷酸序列相似性为93.0%-99.8%,在系统进化树中位于2个不同的亚组;氨基酸序列的相似性为96.1%-99.6%,变异主要集中在N端的前41个氨基酸。这表明ZYMV石河子分离物间存在一定程度的分子变异。
- 王志江杨海燕向本春郑银英
- 关键词：小西葫芦黄花叶病毒分子变异
- 辣椒上CMV亚组ⅠB CP基因克隆与原核表达被引量：1
- 2014年
- 【目的】克隆辣椒上黄瓜花叶病毒外壳蛋白(CMV CP)基因,诱导CP蛋白表达,为下一步制备高效、特异的抗血清奠定基础。【方法】根据已知的新疆石河子辣椒上的CP基因序列设计引物,克隆CMV CP基因,经测序、NocⅠ/Bam HⅠ酶切鉴定,成功构建了原核表达载体p ET-CMV CP,转化大肠杆菌BL21 DE3,用终浓度为1 mmol/L IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE检测目的蛋白表达。【结果】成功构建了新疆辣椒上CMV CP原核表达载体p ET-CMV CP,获得了与预期大小一致的30 k Da蛋白。【结论】新疆石河子辣椒上CMV CP在原核中获得了正确表达。
- 张强陈英杰向本春郑银英
- 关键词：辣椒黄瓜花叶病毒外壳蛋白原核表达
- 利用RNAi技术培育双抗CMV、ToMV的新疆加工番茄遗传转化研究
- 加工番茄是新疆的支柱产业之一,2008年,新疆加工番茄种植面积达到7.556万公顷,产量619.56万吨,约占全国总产量的90％.新疆加工番茄产品的出口量占世界贸易总量的1/4,占新疆出口创汇总额的13％.然而病毒病是导...
- 乔亚红田桂英苏建辉王子华赵峰玉张瑜郑银英向本春
- 关键词：RNAI黄瓜花叶病毒番茄花叶病毒农杆菌介导法
