深圳市科技计划项目(201102184)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
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- 相关机构：中南大学深圳华侨城医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 乙肝病毒HBx-d382与HBx-d431突变体特异性抗体检测方法的建立及临床应用被引量：1
- 2014年
- 目的建立检测乙肝病毒X基因突变体HBx-d382和HBx-d431特异性抗体的方法,探讨其在诊断HBV相关性肝细胞癌中的应用价值。方法通过生物信息和多肽合成的方法,制备HBx-d382和HBx-d431特异性多肽抗原。采用间接ELISA法对正常人和慢性乙肝病毒感染者和肝细胞癌病人血清中抗HBx-d382和抗HBxd431特异性抗体进行检测。结果肝细胞癌病人血清中抗HBx-d382和抗HBx-d431抗体的阳性率均高于正常人、慢性乙肝病毒感染者(P<0.05),慢性乙肝病毒感染者抗HBx-d382和抗HBx-d431抗体的阳性率高于正常人(P<0.05)。慢性乙肝病毒感染者HBsAg(+)/HBeAb(+)/HBcAb(+)模式抗HBx-d382阳性率明显低于HBsAg(+)/HBeAg(+)/HBcAb(+)模式和HBsAg(+)/HBcAb(+)模式(P<0.05),而抗HBx-d431和抗HBxP阳性率在这些血清学模式之间无显著性差异(P>0.05)。结论抗HBx-d382和抗HBx-d431是乙肝病毒感染的一种特异性抗体,可以用于HBV携带者及慢性乙肝病人的监测,对预测肝细胞癌的发生有一定的意义。
- 祝玲玲朱平安蔡兰兰金娴施培瑶吴翔
- 关键词：乙肝病毒X基因突变体特异性抗体ELISA
- HBx-d431突变体多肽抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的利用人工合成多肽制备针对乙肝病毒x基因突变体HBx-d431的特异性多克隆抗体．为进一步研制}玎Bx．d431免疫检测试剂盒打基础。方法采用生物信息学和多肽合成法制备HBx—d431特异性多肽（HBx．d431P）、高效液相色谱法（HPLC）和电喷雾离子化质谱（ESI-MS）鉴定合成多肽的纯度和分子量。用化学方法将多肽与匙孔血蓝蛋白（KLH）偶联成多肽抗原HBx—d431P-KLH，并经完全弗氏佐剂（CFA）和不完全弗氏佐剂（IFA）乳化，免疫新西兰雄性大白兔。用ELISA鉴定抗血清效价、亲和层析法纯化抗体、Dotblot评价抗体特异性。结果经HPLC和ESI-MS分析，合成的多肽满足HBx-d431特异性抗体制备的要求。ELISA和Dotblot试验结果显示，兔抗血清的效价达6．4×10^4，纯化后的HBx-d431抗体特异性高。结论本研究制备了抗HBx-d431特异性抗体，为进一步研制HBx-d431免疫检测试剂盒奠定了基础。
- 祝玲玲朱平安金娴钟小婷吴翔
- 关键词：乙肝病毒多肽抗体
- 肝细胞癌组织中乙肝病毒HBx-d382突变体S区基因分析被引量：1
- 2014年
- 目的分析肝细胞癌组织中乙肝病毒HBx-d382突变体S基因和前S基因,了解其变异情况。方法采用巢式PCR和琼脂糖凝胶电泳的方法对16份肝细胞癌组织中乙肝病毒S基因和前S基因进行扩增和分析。选择HBxd382突变体S基因和前S基因目的片段进行回收、纯化、克隆和测序,并与HBV参考序列进行比对。结果16份肝癌组织中有9份存在HBx-d382突变体,HBx-d382突变体肝癌组织S基因和前S基因检出率分别为11.11%(1/9)、44.44%(4/9),且50.00%的肝癌组织前S基因PCR扩增产物出现了多条带。HBx-d382突变体S基因和前S基因目的片段与HBV参考序列(AF282917)比对,一致性介于98.08%至98.97%。结论 HBx-d382突变体肝癌组织中部分检出了S基因和前S基因,前S基因比S基因更容易发生突变。
- 祝玲玲朱平安金娴熊玮平吴翔
- 关键词：肝细胞癌乙肝病毒S基因
- 深圳地区HBsAg和HBsAb同时阳性者HBVS基因检测与分析
- 2013年
- 目的 了解乙肝病毒（HBV）表面抗原（HBsAg）和乙肝病毒表面抗体（HBsAb）同时阳性者HBV-DNA水平及其S区是否变异的情况.方法 采用ELISA方法,从2011年7月～2012年10月间测定乙肝血清学标志物的1 690例门诊和住院患者中,筛选出HBsAg和HBsAb同时阳性者10例.采用荧光定量PCR法检测HBV-DNA水平,采用聚合酶链反应（PCR）、基因克隆和测序的方法,对HBsAg和HBsAb同时阳性者的HBV S基因进行分析,并与HBV参考序列S基因进行比较,分析其变异情况.结果 10份HBsAg和HBsAb同时阳性者血清,经HBV-DNA荧光定量PCR检测和S基因PCR扩增,2份为HBV-DNA阳性,均为B基因型.其S基因序列与参考序列（JX429908.1）相比,同源性分别为99.64%和99.46%,一份在第161位由酪氨酸变为苯丙氨酸（Y→F）,另一份在第21位由亮氨酸变为丝氨酸（L→S）,第184位缬氨酸变为谷氨酸（V→E）.结论 HBsAg和HBsAb同时阳性者在＂α＂决定簇以外存在点突变,改变了HBsAg的结构和抗原性,影响了HBsAg与抗-HBs的结合能力.
- 赵毅祝玲玲金娴樊春卉朱平安
- 关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒表面抗原乙型肝炎病毒表面抗体S基因
- 免疫干预后母婴传播乙肝病毒标记物分析被引量：1
- 2012年
- 目的:分析免疫干预后乙肝阳性产妇与新生儿脐带血标本乙肝标志物,评价其临床价值。方法:对我院228例经免疫预防乙肝阳性产妇所生新生儿脐带血资料进行回顾性分析,比较产妇与其新生儿乙肝标志物模式。结果:新生儿脐带血HBsAg和(或)HBeAg阳性23例,宫内感染率10.1%;其中双阳组产妇61例,所娩新生儿脐带血HBsAg和(或)HBeAg阳性21例,宫内感染率34.4%;单阳组167例,所娩新生儿脐带血HBsAg阳性2例,宫内感染率1.2%,两组宫内感染发生率有显著性差异(P<0.05)。结论:产妇和新生儿HBeAg阳性是宫内感染和HBV感染慢性化的危险因素;对产前孕妇、出身后新生儿进行免疫干预是阻断HBV母婴传播的有效手段。
- 熊玮平祝玲玲刘冰代小英
- 关键词：免疫干预乙肝标志物母婴传播
