国家自然科学基金(39870737)
- 作品数：14 被引量：58H指数：6
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- 腺病毒介导的双自杀基因对直肠癌细胞的杀伤作用被引量：7
- 2001年
- 目的 探讨直肠癌的基因治疗方法。方法 用重组腺病毒介导外源胞嘧啶脱氨酶(CD)基因、单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV tk)基因转移到人直肠癌细胞系HR 834 8,通过细胞集落形成实验、细胞存活率测定 (MTT法 ) ,检测、分析CD和HSV tk双自杀基因系统对肿瘤细胞的作用。结果重组腺病毒介导的CD和HSV tk自杀基因可在HR 834 8细胞高效表达。用腺病毒穿梭质粒pAdCMV Link1(CD +tk)、pAdCMV Link1(- )、pAdCMV Link1(CD)、pAdCMV Link1(tk)重组腺病毒感染HR 834 8细胞 ,不加 5 氟胞嘧啶 (5 FC)、环氧鸟苷 (GCV) ,各组肿瘤细胞的集落形成和存活率的差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。应用 5 FC、GCV后 ,pAdCMV Link1(CD +tk)转染组细胞集落形成和存活率显著低于对照组和pAdCMV Link1(- )转染组 (P <0 0 1) ,也低于pAdCMV Link1(CD)、pAdCMV Link1(tk)转染组(P <0 0 5 )。CD和 5 FC、HSV tk和GCV系统联合作用较单一自杀基因系统对HR 834 8直肠癌细胞的集落形成、细胞生长有更显著的抑制作用 ,对肿瘤细胞有更强的杀伤能力和“旁观者效应”。 结论CD和HSV tk双自杀基因联合作为肿瘤基因治疗的一种手段和方法 。
- 李世拥于波安萍陈钢蔡惠云郭文华
- 关键词：胞嘧啶脱氨酶胸苷激酶腺病毒双自杀基因
- 顺铂联合胞嘧啶脱氨酶自杀基因对直肠癌细胞杀伤作用的研究被引量：3
- 2002年
- 目的探讨顺铂联合胞嘧啶脱氨酶(CD)自杀基因对直肠腺癌细胞8348的杀伤作用。方法以绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因,观察在顺铂作用下GFP基因对8348细胞的转染效率;用克隆形成试验观察顺铂对CD基因转染效率的影响;同时用四甲基偶氮唑盐(MTT)试验检测顺铂联合CD/5-氟胞嘧啶(5-FC)对8348细胞的杀伤作用。结果顺铂提高质粒对8348细胞的转染效率26倍。对腺癌细胞的杀伤效率:单纯转染CD基因组为14.9%;IC50的氟尿嘧啶(5-FU)联合CD基因组为54.9%;IC50的顺铂联合CD基因组为88.5%,与其他两组相比,对癌细胞杀伤效率明显增强(P<0.01)。结论顺铂联合CD自杀基因能更有效地杀伤直肠腺癌细胞,可成为治疗直肠癌术后复发及转移的一种有效的方法。
- 陈纲李世拥于波安萍蔡慧芸郭文华
- 关键词：顺铂自杀基因直肠癌细胞杀伤
- CD/5-FU联合亚叶酸钙对直肠癌细胞杀伤作用的研究被引量：1
- 2001年
- 目的 :探讨亚叶酸钙 (CF)联合 5 氟胞嘧啶 (5 FU)对转染胞嘧啶脱氨酶 (CD)基因的直肠癌细胞的杀伤作用。方法 :构建含CD基因的真核表达载体pCDA。应用四唑盐 (MTT)比色试验检测瘤细胞的存活率 ,观察CF联合 5 氟尿嘧啶 (5 FU)对CD阴性细胞及CF联合 5 FU对CD阳性细胞的杀伤作用 ,同时观察CF对CD/ 5 FU旁观者效应的影响。结果 :CF增强 5 FU对 834 8细胞的杀伤作用。单独CD/ 5 FU和CD/ 5 FU联合CF对 834 8细胞的IC5 0分别为 0 .8mmol/L、0 .3mmol/L ,CF明显降低5 FU的IC5 0 (P <0 .0 1)。CF对CD/ 5 FU系统的旁观者效应也有增强作用。结论 :CF明显增强CD/5 FU系统对直肠癌细胞的杀伤效能 。
- 陈纲李世拥于波安萍蔡慧芸郭文华
- 关键词：叶醛酸胞苷脱氨酶
- 胞嘧啶脱氨酶基因联合放射治疗恶性肿瘤的研究进展(文献综述)被引量：2
- 2001年
- 以胞嘧啶脱氨酶基因为主的自杀基因治疗已日渐引起肿瘤研究者的兴趣 ,近几年出现的基因联合放疗对恶性肿瘤的治疗 ,使两者之间的优势得以互补 ,大大增强了对肿瘤治疗的效果。本文就胞嘧啶脱氨酶基因联合放疗对恶性肿瘤治疗的作用机制、基因转导方法、靶向性表达、基因显像、治疗效果等方面予以综述。
- 吕文平李世拥
- 关键词：胞嘧啶脱氨酶基因恶性肿瘤放射疗法
- 胸苷酸合成酶基因表达与结肠直肠癌复发的关系及其临床意义被引量：12
- 2000年
- 目的 探讨胸苷酸合成酶 (TS)基因表达与结、直肠癌复发的关系及其对临床治疗的影响。 方法 对 6 8例结、直肠癌患者采用RT PCR方法检测大肠癌原发灶、癌旁肠粘膜、局部复发灶、腹腔盆腔内播散和肝转移灶中TS基因的表达 ;用WesternBlot方法检测TS蛋白表达。 结果 6 8例结肠直肠癌原发灶、局部复发灶、腹腔及盆腔内播散和肝转移灶中TS基因表达阳性率分别为 2 2 1%( 15 / 6 8)、88 5 % ( 2 3/ 2 6 )、85 0 % ( 17/ 2 0 )、40 9% ( 9/ 2 2 ) ;TS蛋白表达阳性率分别为 2 2 1% ( 15 / 6 8,)、84 6 % ( 2 2 / 2 6 )、80 0 % ( 16 / 2 0 )、36 4% ( 8/ 2 2 ) ,2种检测方法结果基本一致。结肠直肠癌复发灶、肝转移灶中TS基因及TS蛋白表达阳性率均高于癌原发灶 ,差异有显著性意义 (P <0 0 1) ;局部复发和腹腔盆腔内播散灶中TS基因和TS蛋白表达阳性率高于肝转移灶 ,差异有显著性意义 (P <0 0 5 ) ;癌旁正常肠粘膜中未检出TS基因表达。 结论 TS基因增强表达在结肠直肠癌局部复发和腹腔盆腔内播散的发生。
- 李世拥于波安萍梁振家苑树俊
- 关键词：结肠直肠肿瘤胸苷酸合成酶复发基因表达
- 腺病毒介导HSV-tk自杀基因联合野生型p53基因对直肠癌细胞的杀伤作用被引量：9
- 2001年
- 目的 观察重组腺病毒介导单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV tk)基因联合人野生型p5 3基因共转染 ,对直肠癌细胞的杀伤作用。方法 构建重组腺病毒质粒 pAdCMV Link1(tk/ p5 3)、pAdCMV Link1(tk)、pAdCMV Link1(p5 3) ,分别感染p5 3突变的人直肠癌细胞SW 837。进行细胞集落形成实验、细胞存活率的测定和裸鼠移植瘤治疗实验 ,观察HSV tk/GCV系统与野生型p5 3基因联合对肿瘤细胞的杀伤作用。 结果 应用 pAdCMV Link1(tk/ p5 3)、pAdCMV Link1(-)、pAdCMV Link1(tk)、pAd CMV Link1(p5 3)重组腺病毒感染SW 837细胞 ,加入GCV ,各组细胞集落数分别为 8、95、40、70。pAdCMV Link1(CD / p5 3)组肿瘤细胞集落形成减少、细胞存活率显著下降 (P <0 .0 1)。裸鼠移植肿瘤生长抑制率分别为 76 .5 %、0 .8%、5 5 .8%、2 3 .2 % ,pAd CMV Link1(tk/ p5 3)重组腺病毒对肿瘤的抑制作用最强。 结论 HSV tk自杀基因与野生型 p5 3基因共转染 。
- 于波李世拥安萍陈钢蔡惠云
- 关键词：单纯疱疹病毒胸苷激酶基因
- 全营养液促脂质体介导质粒DNA转染结肠直肠癌细胞的实验研究被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨全营养液 (TNA)促进脂质体介导质粒DNA转染结直肠癌细胞的作用。方法 采用细胞培养方法 ,利用绿色荧光蛋白基因做报告基因 ,配制不同转染液 :脂质体加pEGFP N1、TNA加脂质体加pEGFP N1、TNA加pEGFP N1、单纯脂质体、单纯TNA ,分别处理人结肠癌细胞LoVo、人直肠癌细胞HR 8348,检测癌细胞中绿色荧光蛋白的表达。 结果 未加pEGFP N1质粒DNA的单纯脂质体和单纯TNA处理的细胞不表达绿色荧光蛋白。TNA加脂质体加pEGFP N1对LoVo、HR 8348细胞的转染效率分别为 33%、38% ;脂质体加pEGFP N1组的转染效率为 2 2 %、2 4% ;TNA加pEGFP N1组的转染效率均为 1%。TNA加脂质体加pEGFP N1组转染效率高于其他转染组 (P <0 0 1)。质粒DNA对TNA溶液的稳定性无显著影响。 结论 TNA可促进脂质体介导质粒DNA转染结直肠癌细胞 ,将营养支持与基因治疗相结合 ,有望提高对肿瘤患者支持治疗效果。
- 安萍于波李世拥蔡惠云
- 关键词：结肠直肠癌脂肪乳剂脂质体转染
- 脂质体转染CD基因联合放射线对人直肠癌荷瘤裸鼠体内抗癌作用的研究
- 2002年
- 目的 探讨脂质体反复转染CD基因联合放射线对人直肠癌细胞荷瘤鼠体内的抗癌效果 ,为临床治疗直肠癌提供理论依据。方法 构建PXJ4 1/CD载体并进行测序证实 ,制备人直肠癌细胞荷瘤鼠 ,待瘤体长至长径达 0 5cm后 ,设实验组应用脂质体于治疗的当日及第 4、8、12天反复转染 ,于当日起 2Gy/day连续照射患肢 15d ,第 3天起 5 FC 80 0mg/kg/day腹腔注射共 12d ,另设单纯放射组、单纯CD/ 5 FC治疗组、空白对照组 ,观察荷瘤裸鼠的肿瘤生长曲线 ,瘤体积抑制率和瘤重抑制率。结果 荷瘤裸鼠肿瘤生长曲线显示 :实验组肿瘤生长曲线平缓 ,治疗效果显著 ,瘤体积抑制率平均为 81 5 % ,瘤重抑制率平均为 78 7% ,与其它 3组比较差异有显著性意义 (χ2 =2 87 86 ,P <0 0 1)。病理学检查示肿瘤细胞较对照组明显减少。结论 脂质体反复转染CD基因联合放射线治疗直肠癌荷瘤鼠 ,二者可产生协同作用 ,比单纯放疗或单纯CD/ 5
- 李世拥吕文平安萍于波蔡慧芸
- 关键词：抗癌作用直肠肿瘤CD基因胞嘧啶脱氨酶基因
- 放射线促进脂质体转染人直肠癌HR-8348细胞的实验研究
- 2002年
- 目的 观察放射线对于脂质体转染的影响 ,探索提高脂质体转染效率的方法。 方法选出 0、2、4、8Gy不同照射剂量 ,分别于转染pEGFP N1荧光表达质粒前 1h照射 ,36h倒置荧光显微镜下观察荧光表达细胞和计数本底细胞 ,计算转染效率。 结果 在HR 834 8细胞中 ,放射线可以促进脂质体对pEGFP N1质粒的转染效率 ,应用 0、2、4、8Gy照射剂量转染效率分别为 2 1 32 %、6 2 17%、6 8 0 0 %、77 78% ,放射组与未放射组之间差异存在非常显著性意义 (χ2 =131 7,P <0 0 1) ,照射后脂质体转染效率可与病毒载体转染效率接近。 结论 利用放射线可以明显促进脂质体的转染效率。
- 吕文平李世拥安萍于波
- 关键词：直肠癌脂质体转染基因治疗
- X线联合胞嘧啶脱氨酶基因对结肠直肠肿瘤细胞的杀伤作用被引量：15
- 2002年
- 目的 提高基因疗法对结肠直肠肿瘤的疗效。 方法 以绿色荧光蛋白 (GFP)基因作为报告基因 ,观察在X线作用下GFP基因对结肠直肠肿瘤细胞的转染效率及表达时间 ;用克隆形成试验观察X线对胞嘧啶脱氨酶 (CD)基因转染的影响 ;同时用细胞存活率测定试验检测X线联合CD和 5 氟胞嘧啶对结肠直肠肿瘤细胞的杀伤作用。 结果 X线提高超螺旋质粒对结肠直肠肿瘤细胞的转染效率 2～ 4倍 ,可提高线性质粒转染效率 3 0倍。肿瘤细胞的存活率 :转染CD基因组LoVo细胞为 85 % ,83 4 8细胞为 88% ;剂量X线联合空载体组为 10 % ;LD90 剂量X线联合CD基因组 ,LoVo细胞为 9% ,83 4 8细胞为 11% ,加上X线作用 ,细胞总体存活率仅为 1%。 结论 X线联合自杀基因可有效地杀伤结肠直肠肿瘤细胞 。
- 陈纲李世拥于波安萍蔡慧芸郭文华
- 关键词：结肠肿瘤直肠肿瘤氟胞嘧啶胞嘧啶脱氨酶基因
