广东省自然科学基金(07001607)
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
- 相关作者：刘娟钟英强朱兆华傅玉如邵静更多>>
- 相关机构：中山大学附属第二医院中山大学孙逸仙纪念医院绵阳市第三人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- hTERT在人胰腺癌组织中的表达及其与COX-2、P-gp、Bcl-2蛋白表达和临床病理特征的关系被引量：14
- 2008年
- 目的研究端粒酶逆转录酶(hTERT)、环氧合酶-2(COX-2)、P-糖蛋白(P-gp)和Bcl-2蛋白在胰腺癌组织中的表达及其相互关系,以及hTERT与胰腺癌的病理特征的关系。方法选择胰腺癌38例,慢性胰腺炎25例,正常胰腺组织20例。以SABC法检测hTERT、COX-2、P-gp和Bcl-2的表达。按手术记录描述肿瘤的病理特征。结果在38例胰腺癌组织中hTERT、P-gp、COX-2、Bcl-2阳性表达率分别为81.58%、52.63%、76.32%、57.90%,评分分别为(6.04±1.08)分、(4.50±1.75)分、(5.96±1.60)分、(5.61±1.08)分,而正常胰腺组织和慢性胰腺炎组织的hTERT与Bcl-2阳性表达率和评分均为0,在慢性胰腺炎P-gp、COX-2阳性率分别为20.00%、24.00%,评分分别为(1.21±0.86)分、(3.59±1.42)分,在正常胰腺组织阳性率分别为15.00%、0,评分分别为(0.90±0.58)分、0分。胰腺癌组与其他组各项阳性表达率和评分比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在胰腺癌组织中,hTERT表达与P-gp(rp=0.365,P<0.05)、COX-2(rp=0.534,P<0.001)、Bcl-2(rp=0.557,P<0.001)表达和临床分期(rp=0.333,P<0.05)呈显著正相关。结论hTERT、P-gp、COX-2和Bcl-2蛋白在胰腺癌组织中均有较高表达,hTERT表达与P-gp、COX-2、Bcl-2表达和胰腺癌的临床分期均有显著的正相关性。
- 钟英强沈溪明李海刚曾志勇刘娟朱兆华
- 关键词：P糖蛋白环氧化酶2
- siRNA靶向沉默hTERT基因对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、凋亡和周期的影响被引量：2
- 2008年
- 目的研究hTERT-siRNA对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响。方法利用RNAi技术靶向沉默Capan-2的hTERT基因表达,应用细胞直接计数法和流式细胞术(FCM)检测Capan-2细胞的增殖、凋亡和细胞周期的变化。结果在hTERT-siRNA的使用浓度为50nm、Lipo转染浓度为3μl/2ml转染体积和hTERT沉默效率为100%的条件下,转染hTERT-siRNA24h后,细胞生长已明显减慢,抑制细胞增殖率为26.39%(P<0.05),第2、3、5、7天抑制细胞增殖率分别为46.77%、70.61%、84.71%和85.99%(P<0.001)。随着转染细胞按常规培养时间的延长,早期凋亡细胞明显增多(P<0.001),以24h后更明显;活性细胞明显减少(P<0.001),而损伤细胞明显增多(P<0.001),以6h后明显;死亡细胞明显增多(P<0.001),以24h后更明显。siRNA组与阴性对照组和Lipo对照组均有明显差异(P<0.001)。G0～G1期细胞明显增多(P<0.01),S期细胞明显减少(P<0.01),以24h后明显;G2～M期细胞明显减少(P<0.01),以48h后明显;晚期凋亡细胞增多(P<0.05),以48h后明显。结论hTERT-siRNA可抑制人胰腺癌Capan-2细胞生长,使较多的细胞停留在G0～G1期,而进入G～M期和S期的细胞减少,可促进细胞凋亡。
- 钟英强魏菁罗招凡傅玉如邵静刘娟朱兆华
- 关键词：胰腺肿瘤细胞周期
- siRNA沉默COX-2基因对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、细胞周期、凋亡和成瘤能力的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:研究siRNA沉默环氧合酶-2(COX-2)基因对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、细胞周期、凋亡和成瘤能力的影响。方法:以Lipofectamine 2000(Lipo)为载体转染siRNA-COX-2至Capan-2细胞。应用RT-PCR、realtime PCR检测COX-2-mRNA表达,Western blotting检测COX-2蛋白的表达。应用细胞直接计数法检测细胞的增殖,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡与周期。应用裸鼠模型评估COX-2-siRNA转染的Capan-2细胞成瘤能力的影响。结果:在siRNA-COX-2浓度为50 nmol/L、Lipo为5μL∶2 mL转染容积条件下,在Capan-2细胞的转染效率可达96.47%。siRNA-COX-2沉默Capan-2细胞中COX-2基因表达的最佳序列为siR-NA006,转染24 h以后沉默效率达73%,COX-2蛋白表达水平在转染后48 h和72 h分别被下调了67%和61%。转染48 h后,Capan-2细胞生长明显减慢(P<0.05),48 h和72 h抑制细胞增殖率分别为35.48%和56.32%。细胞凋亡率较对照组高(P<0.05),48 h和72 h细胞凋亡率为2.03%和3.27%。转染24 h、48 h和72 h G0/G1期的比例分别是58.03%、63.31%和65.66%,S期的比例分别是30.27%、24.87%和22.2%。siRNA-COX-2转染Capan-2细胞在裸鼠的皮下形成的肿瘤体积和重量明显减少(P<0.05)。结论:siRNA006-COX-2可有效沉默COX-2基因的表达,可明显抑制Capan-2细胞的生长并降低其成瘤能力。
- 钟英强黄花荣刘娟林莹夏忠胜昝慧
- 关键词：环氧合酶-2细胞增殖细胞周期
- 阳离子脂质体Lipofectamine2000对人胰腺癌Capan-2细胞的毒性作用被引量：5
- 2008年
- 目的探讨阳离子脂质体Lipofectamine2000(Lipo)在一定浓度下对细胞毒性的作用机制。方法应用一定毒性浓度的Lipo作用于胰腺癌Capan-2细胞,利用细胞直接记数法和流式细胞术检测其对Capan-2细胞生长、细胞凋亡和周期的影响。结果Lipo与siRNA的浓度均影响转染率的高低。在2ml转染体积中,Lipo在5μl的浓度下,使Capan-2细胞生长明显减慢,以第3天后更加明显(P<0.001)。随着转染细胞按常规培养的时间延长,早期凋亡细胞明显增多(P<0.05),活性细胞明显减少(P<0.01),而损伤细胞和死亡细胞明显增多(P<0.001),以48h后更明显;G0～G1期细胞明显增多(P<0.05),G2-M期细胞明显减少(P<0.01),S期细胞明显减少(P<0.01),晚期凋亡细胞减少(P<0.05)。结论在一定浓度下,Lipo可影响细胞的生长、早期凋亡和细胞周期分布,因此,利用Lipo在不同的细胞系进行基因转染过程中Lipo应进行浓度梯度筛选。
- 钟英强魏菁傅玉如邵静梁倚文林燕华刘娟朱兆华
- 关键词：脂质体LIPOFECTAMINE胰腺肿瘤细胞生长流式细胞术
- 环氧合酶-2在胰腺癌治疗中的作用被引量：2
- 2009年
- 在众多实体瘤中,胰腺癌的预后最差,炎症是其发展过程中的重要影响因素。环氧合酶-2(COX-2)在大多数胰腺癌中高表达并调控其发生发展过程。COX-2在肿瘤细胞生成、凋亡、血管生成方面有着重要作用,因此它是治疗胰腺癌极好的分子靶点。大量的实验证明阻滞COX-2的表达对治疗胰腺癌有良好的效果,治疗方法主要包括COX-2抑制剂、基因治疗、抗氧化剂、生长因子受体抑制剂、生物碱等。本综述主要讨论各种治疗方法的应用和不足,总结COX-2在胰腺癌治疗中的作用。
- 刘娟钟英强
- 关键词：环氧合酶-2胰腺癌
