国家自然科学基金(81272871)
- 作品数：4 被引量：25H指数：3
- 相关作者：程文俊万一聪姜旖马晶晶吴姗更多>>
- 相关机构：江苏省人民医院江苏省中西医结合医院更多>>
- 发文基金：江苏省医学重点人才培养基金江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-135a对卵巢上皮性癌细胞中HOXA10基因表达及细胞增殖和凋亡的影响被引量：4
- 2013年
- 目的研究微小RNA-135a（miR-135a）对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞系SKOV3细胞中HOXAIO基因表达及细胞增殖和凋亡的影响。方法（1）应用生物信息学技术预测与miR-135a高度相关的靶基因（即HOXAIO基因）。（2）将miR-135a成熟体模拟物（mimics）、miR-135a成熟体抑制物（inhibitor）及阴性对照分别转染SKOV3细胞，采用逆转录（RT）-PCR技术和蛋白印迹法检测转染不同时间（分别为24、48和72h）后SKOV3细胞中HOXAIOmRNA和蛋白的表达水平。（3）报告基因实验验证miR-135a对HOXAIO基因表达的调节作用，采用含miR-135a的质粒和含HOXAIO基因的重组质粒共同转染SKOV3细胞，以转染微小RNA（mirRNA）慢病毒质粒者为对照。（4）采用四甲基偶氮唑蓝（MTI＇）比色法检测转染不同时间（分别为24、48和72h）后SKOV3细胞的增殖能力[以吸光度（A）值表示]，蛋白印迹法检测转染48h后SKOV3细胞中凋亡相关蛋白[包括bel-2、bax和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（（3aspase-3）]的表达。结果（1）生物信息学技术预测，得出与miR-135a高度相关的靶基因为HOXAIO基因。（2）RT—PCR技术检测显示，随着转染时问的延长（分别为24、48和72h），mill-135amimics转染后SKOV3细胞中HOXAIOmRNA的表达水平（分别为0．94±0．04、0．78±0．03、0．70±0．03）逐渐降低（P〈0．05）；miR-135ainhibitor转染后SKOV3细胞中HOXAIOmRNA的表达水平（分别为1．14±0．05、1．16±0．03、2．60±0．08）逐渐升高（P〈0．05）；且两者转染48及72h后，分别与阴性对照（为1．00）比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。蛋白印迹法检测显示，转染不同时间后SKOV3细胞中HOXAIO蛋白的表达水平与HOXAIOmRNA的变化一致。（3）报告基因实验显示，含miR一135a的质粒和含HOXAIO基因的重组质粒共同转染SKOV3细胞后，与对照比较，其荧光素酶活性下降了67．8％（P〈0．01）。（4）M
- 汤伟伟万贵平万一聪张林程文俊
- 关键词：微RNAS卵巢肿瘤细胞增殖
- miR-218在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义被引量：5
- 2014年
- 目的:研究miR-218在上皮性卵巢癌组织中的表达水平及其与临床病理特征之间的相关性,并进一步探讨miR-218在卵巢上皮性癌细胞株HEY中的表达和生物学功能。方法:采用实时定量PCR法分别检测25例卵巢良性肿瘤、54例上皮性卵巢癌以及卵巢上皮性癌细胞株中的miR-218表达水平,并结合临床病理特征进行分析。采用ROC曲线评价miR-218作为上皮性卵巢癌诊断截断点的可能性。转染miR-218 mimics、miR-218 inhibitor后,采用MTT法检测改变miR-218的表达对卵巢癌细胞增殖的作用。结果:上皮性卵巢癌组织中miR-218表达水平显著高于良性肿瘤组织(P<0.05)。miR-218表达与卵巢癌患者的FIGO分期有关,晚期(Ⅲ、Ⅳ期)高于早期(Ⅰ、Ⅱ期)(P<0.05);但与年龄、分化程度和淋巴结转移无关(P>0.05)。ROC曲线下面积为0.8054(95%CI为0.7140~0.8968),最佳截断点为0.0085。上调miR-218的表达水平可促进卵巢上皮性癌细胞株HEY的增殖能力。结论:miR-218表达的上调可能与上皮性卵巢癌的发生及进展有关。
- 马晶晶吴姗石莉姜旖程文俊
- 关键词：上皮性卵巢癌MIR-218细胞增殖
- 上皮性卵巢癌组织MEG3及其内含子miR-770-5p表达临床意义分析被引量：13
- 2015年
- 目的分析长链非编码RNA MEG3及其内含子miRNA-770-5p在上皮性卵巢癌中的表达及其意义,为探讨上皮性卵巢癌的发生机制提供新的思路和方向。方法收集2008-01-06-2013-08-29南京医科大学第一附属医院妇科收治并经病理确诊的卵巢良性肿瘤43例(对照组),上皮性卵巢癌62例(实验组)。应用实时定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测实验组和对照组中MEG3、miR-770-5p及其靶基因ARPC2的相对表达量,并利用Pearsonχ2相关分析法分别分析其相关性,采用χ2检验分析上皮性卵巢癌患者中MEG3的表达量与临床病理资料的关系。结果上皮性卵巢癌组织MEG3表达为0.091±0.012,低于卵巢良性肿瘤组的0.246±0.027,t=5.541,P<0.001;上皮性卵巢癌组织miR-770-5p表达为0.036±0.006,低于卵巢良性肿瘤组的0.251±0.042,t=6.077,P<0.001;上皮性卵巢癌组织靶基因ARPC2表达为0.299±0.034,高于对照组的0.060±0.012,t=5.639,P<0.001。MEG3与miR-770-5p之间的表达呈正相关,r=0.469,P=0.003;而miR-770-5p与靶基因ARPC2的表达呈负相关,r=-0.663,P<0.001。MEG3的表达与上皮性卵巢癌患者淋巴结转移有关,χ2=3.387,P=0.034;而与患者的年龄、临床病理分期、病理分级和组织学类型无关,P>0.05。结论 lncRNA MEG3与其内含子microRNA miR-770-5p在上皮性卵巢癌中表达下调而靶基因ARPC2上调,相互之间呈一定相关性,提示它们可能在上皮性卵巢癌的的发生与进展中起重要作用。
- 徐辉姿沈孝青陆佳万一聪杨一君周树林程文俊
- 关键词：卵巢肿瘤长链非编码RNA内含子微小RNA
- 卵巢上皮性癌中肌切蛋白的表达及其临床意义被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨肌切蛋白(Scinderin)在卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义。方法:运用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法和蛋白质印迹(Western blot)法分别检测34例卵巢上皮性癌、21例卵巢良性肿瘤和20例正常卵巢组织中肌切蛋白mRNA和蛋白的表达情况,并进行临床资料统计,分析肌切蛋白与卵巢上皮性癌临床病理参数间的关系。结果:卵巢上皮性癌组中肌切蛋白mRNA及蛋白表达量均显著高于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组(P<0.01),而在正常卵巢组与良性卵巢肿瘤组中,肌切蛋白mRNA及蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。肌切蛋白mRNA和蛋白表达与卵巢上皮性癌病理分级、淋巴结转移有关(P<0.01;P<0.05),而与患者年龄、肿瘤临床分期无相关性(P>0.05)。结论:肌切蛋白在卵巢上皮性癌中表达上调,且在低分化卵巢上皮性癌中表达高于中-高分化卵巢上皮性癌,有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者,提示肌切蛋白与卵巢上皮性癌患者的不良预后相关,可作为判断卵巢上皮性癌预后的生物学标志物。
- 吴姗马晶晶姜旖马小玲范文程文俊
- 关键词：卵巢上皮性癌蛋白质印迹
