河北省自然科学基金(C2005000118)
- 作品数：8 被引量：56H指数：4
- 相关作者：武金霞赵晓瑜韩丽梅吴娅平杜学敏更多>>
- 相关机构：河北大学石家庄幼儿师范高等专科学校石家庄医学高等专科学校更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金河北省生物工程重点学科资助博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 蚯蚓纤溶酶底物特异性被引量：3
- 2005年
- 蚯蚓纤溶酶是具有较强溶栓作用的丝氨酸蛋白酶,为研究蚯蚓纤溶酶在溶栓的同时是否对其他血液蛋白有破坏作用,本实验以一些血液功能蛋白为底物,用蚯蚓纤溶酶在体外对其进行水解,采用SDS-PAGE检测水解前后底物成分的变化。结果显示,蚯蚓纤溶酶短时间内能完全水解纤维蛋白和纤维蛋白原,长时间作用下能部分水解牛血清白蛋白和人免疫球蛋白重链,不水解牛血红蛋白、牛血超氧化物歧化酶和牛凝血酶原。表明蚯蚓纤溶酶对血栓成分具有较强的识别和水解能力,而对其他血液蛋白作用微弱,说明蚯蚓纤溶酶作为药物使用时具有较强的溶栓和预防血栓形成的作用,且副作用较小。
- 武金霞赵晓瑜
- 关键词：蚯蚓纤溶酶溶栓作用底物特异性水解功能蛋白
- 壳聚糖固定化蚯蚓纤溶酶及其性质被引量：5
- 2008年
- 以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,用吸附交联法固定蚯蚓纤溶酶,对蚯蚓纤溶酶的固定化条件及固定化酶的各种性质进行了研究,确定了酶固定的最适条件:1 g用pH为6.5的磷酸盐缓冲液浸泡的壳聚糖载体与5 mL体积分数为1%戊二醛在25℃交联8 h,充分洗去戊二醛之后,加入蚯蚓纤溶酶13 U,4℃吸附6 h,充分洗去未交联的游离酶,酶活力回收最高大约为63%,固定化酶的比活为0.082 U/mg.固定化酶,游离酶的最适温度均为50℃,游离酶的最适pH值为8.5,而固定化酶的最适pH值为8.0,固定化酶的热稳定性,pH稳定性均比游离酶有所提高,游离酶、固定化酶都能水解纤维蛋白原和纤维蛋白,固定化酶不再水解BSA.
- 武金霞韩丽梅吴娅平田晶
- 关键词：壳聚糖戊二醛固定化蚯蚓纤溶酶
- 纤维蛋白酶谱检测蚯蚓纤溶酶组分被引量：4
- 2005年
- 目的建立鉴定蚯蚓纤溶酶粗酶液中活性组分的方法。方法根据蚯蚓纤溶酶能水解纤维蛋白的性质,建立了纤维蛋白-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Fibrin-SDS-PAGE),优化了电泳条件,电泳后酶所在部位为透明区带。结果分离胶中纤维蛋白终质量浓度为0.4×10^(-3)mg·L^(-1),电泳后胶板用2.5%TritonX-100复性30min,PBS缓冲液(pH7.2)保温30min,考马斯亮蓝R-250染色,7%醋酸脱色,可以得到清晰的酶谱。结论该方法灵敏度高,用2μg样品,就能准确检测出粗酶液中所有纤溶酶组分。
- 武金霞赵晓瑜
- 关键词：酶谱蚯蚓纤溶酶纤维蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 糖链对蚯蚓纤溶酶纤溶活性的影响被引量：1
- 2009年
- 应用以大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTI)为配基的亲和色谱从赤子爱胜蚓中分离了蚯蚓纤溶酶,亲和介质Sepharose-4B对蚯蚓纤溶酶的吸附量为0.04mg/g;以糖苷酶A去除固定在SBTI上的蚯蚓纤溶酶的糖链。辣根过氧化物酶标记的刀豆凝集素(ConA-HRP)亲和印迹和Schiff's染色结果表明,蚯蚓纤溶酶的糖链已基本去除,去除糖链后蚯蚓纤溶酶的活性降低约30%。
- 武金霞殷鹏张贺迎
- 关键词：蚯蚓纤溶酶大豆胰蛋白酶抑制剂糖链
- 蚯蚓纤溶酶新组分的分离纯化及部分性质被引量：3
- 2008年
- 采用以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基的亲和色谱分离蚯蚓纤溶酶,以DEAE-纤维素-52离子交换柱色谱和制备电泳纯化各单组分。结果表明新组分8、9、10都是能水解纤维蛋白的糖蛋白。组分8是一种纤溶酶原激活剂,有2个亚基,Mr为25.5k和17.8k;组分9仅一条肽链,Mr为33.6k;组分10含有Mr为18.7k和10.9k的2个亚基。组分9、10均兼有纤溶酶原激活活性和直接纤溶活性。
- 武金霞张贺迎赵晓瑜杜学敏
- 关键词：蚯蚓纤溶酶纤溶酶原激活剂糖蛋白分离纯化
- 地龙的药理作用研究进展被引量：33
- 2009年
- 天然药物是指一种药物制剂所含化合物分子都是天然存在的化合物,而非人工制备的化合物,是由动物、植物、微生物体合成的,以及地球乃至宇宙所固有的化合物。
- 单彪武金霞张瑞英潘书娟
- 关键词：药理作用地龙药物制剂天然药物生物体
- 大豆胰蛋白酶抑制剂的分离纯化被引量：5
- 2008年
- 采用盐析、等电点沉淀、DEAE-Cellulose-32离子交换柱层析纯化大豆胰蛋白酶抑制剂,电泳测定其相对分子量为20.1ku,BAEE(苯甲酰-L-精氨酸乙酯)法测定抑制比为0.9∶1。纯化后的SBT(I大豆胰蛋白酶抑制剂)可以作亲和层析纯化丝氨酸蛋白酶的配基。
- 武金霞吴娅平杜学敏韩丽梅
- 关键词：大豆胰蛋白酶抑制剂抑制比
- 蚯蚓纤溶酶去糖基化和免疫反应性分析被引量：2
- 2008年
- 目的对去糖基化的蚯蚓纤溶酶进行免疫反应性分析。方法①将变性的蚯蚓纤溶酶全组分与免疫佐剂混合,免疫家兔制得抗血清,酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和Western-blotting检测抗血清的效价。②三氟甲基磺酸去除蚯蚓纤溶酶全组分及6.5#,7#单组分的糖链,SDS-PAGE和ConA-HRP亲和印迹检测糖链的去除情况。③ELISA和Western-blotting检测糖链去除前后蚯蚓纤溶酶免疫反应性是否有变化。结果去除糖链后蚯蚓纤溶酶全组分及6.5#,7#单组分的免疫反应性基本没有变化。结论糖链的存在与否对蚯蚓纤溶酶组分免疫反应性的影响不大,提示蚯蚓纤溶酶分子上的寡糖链可能不构成其抗原决定簇。
- 武金霞吴娅平赵晓瑜韩丽梅
- 关键词：蚯蚓纤溶酶免疫反应性
