国家自然科学基金(81270568)
- 作品数：24 被引量：90H指数：6
- 相关作者：刘革修朱锦灿陈小宇祝爱珍刘成成更多>>
- 相关机构：暨南大学清华大学第一附属医院南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胎鼠间充质干细胞对老年小鼠肺功能的影响被引量：1
- 2014年
- 目的研究胎鼠间充质干细胞(MSCs)移植对老年小鼠肺功能的影响。方法将12月龄雌性BALB/c雌性老年小鼠随机分为对照组、移植组。将从孕13.5 d胎鼠分离培养MSCs,经尾静脉注射到移植组小鼠。观察移植后3个月小鼠的一般情况,经超声心动图检查评价肺动脉血流速度、左心功能的变化,进行负重游泳试验,测量游泳前后全血乳酸变化及肺组织的病理学变化。结果与对照组相比,移植组小鼠肺组织病理学观察发现老年肺气肿样改变明显减轻;肺动脉血流速度较慢,每搏输出量、心输出量、左室舒张期容积均增加;负重游泳时间明显延长,游泳前后全血乳酸水平降低。结论移植胎鼠MSCs能够延缓老年小鼠肺脏的退行性变化,改善老年小鼠肺功能。
- 朱锦灿陈小宇祝爱珍刘成成李军刘革修
- 关键词：肺功能
- 促红细胞生成素通过激活ERK和p38 MAPK抑制小鼠骨髓间充质干细胞成脂分化被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨促红细胞生成素(EPO)是否抑制小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为脂肪细胞及其机制。方法:分离提取小鼠骨髓MSCs,用3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素和地塞米松联合诱导成脂分化,实验组加入不同浓度EPO干预,诱导分化第20天油红O染色观察并进行定量分析细胞分化程度;MTT法观察不同浓度EPO对MSCs增殖能力的影响。实时荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)和脂联素mRNA表达水平;Western blotting检测PPARγ及细胞外信号调节激酶(ERK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)磷酸化水平。结果:诱导分化20 d,EPO能显著抑制MSCs的成脂分化,降低油红O染色后的吸光度值,诱导分化过程中各浓度的EPO不影响MSCs增殖活性。EPO能够下调成脂过程中PPARγ、C/EBPα、FABP4和脂联素mRNA表达,增加分化过程中ERK、p38 MAPK及PPARγ蛋白磷酸化。结论:EPO可能通过增加p38 MAPK和ERK蛋白磷酸化,下调PPARγ、C/EBPα、FABP4和脂联素mRNA表达,从而抑制MSCs成脂分化。
- 刘革修朱锦灿陈小宇祝爱珍刘成成赖菁
- 关键词：促红细胞生成素间充质干细胞
- 丹参多酚酸盐对过氧化氢诱导人内皮细胞EA.hy926氧化应激损伤的保护作用及机制被引量：16
- 2019年
- 目的:探讨丹参多酚酸盐(salvianolate)对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926氧化损伤的保护作用及机制。方法:体外培养EA.hy926细胞,随机分为:正常对照组、损伤组和抗损伤(丹参多酚酸盐+过氧化氢)组。采用CCK-8法检测细胞活性,Transwell实验检测内皮细胞迁移能力;一氧化氮(nitric oxide,NO)试剂盒和ELISA法分别检测细胞培养液中NO和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的水平;流式细胞术检测细胞内超氧化物阴离子水平、线粒体跨膜电位和细胞凋亡情况;采用Western blot法检测caspase-3、cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax、NF-κB和p53蛋白表达水平。结果:与损伤组比较,不同剂量的丹参多酚酸盐预处理可提高EA.hy926细胞的活性、降低内皮细胞的凋亡,并促进细胞的迁移(P<0.05);细胞上清液中VEGF和NO含量及细胞内线粒体膜电位水平显著升高(P<0.05);细胞内ROS水平显著下降;NF-κB、p53、Bax和cleaved caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05);Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论:丹参多酚酸盐能减轻过氧化氢对EA.hy926细胞氧化应激的损伤作用,其机制可能与NF-κB通路的阻滞相关。
- 吕林林安姿旖梁家健刘革修
- 关键词：丹参多酚酸盐NF-ΚB信号通路
- 达沙替尼对人脐静脉内皮细胞的损伤与PI3K/Akt途径抑制有关被引量：2
- 2017年
- 目的探索达沙替尼对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移和凋亡等生物学特性的影响,为完善其临床应用提供资料。方法实验分组:达沙替尼组(达沙替尼处理浓度为50 nmol/L)、LY294002组(PI3K抑制剂,处理浓度为20μmol/L)、联合处理组(达沙替尼处理浓度为50 nmol/L、LY294002处理浓度为20μmol/L)及溶媒对照组(DMSO浓度为0.1%)。CCK8法检测细胞活性,划痕法检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测Akt和p-Akt蛋白水平。结果达沙替尼(1~400 nmol/L)不仅抑制HUVEC增殖,而且诱导其凋亡、抑制其迁移、阻滞细胞周期G1-S期转化。随浓度的升高与处理时间的延长(50 nmol/L,24 h^96 h)达沙替尼对细胞增殖抑制作用和诱导凋亡作用明显,同时HUVEC的迁移能力随达沙替尼浓度(50~100 nmol/L)的升高而降低。达沙替尼和PI3K抑制剂LY294002两者单独处理时均具有细胞增殖抑制作用,两者均明显抑制Akt蛋白磷酸化水平;两者联合处理时虽然细胞增殖抑制作用增强,但对Akt蛋白磷酸化水平的影响与单独处理相比差异不明显。结论达沙替尼可通过PI3K/Akt通路促进HUVEC损伤,抑制HUVEC增殖和迁移,改变细胞形态,阻滞HUVEC G1-S期转化,诱导细胞凋亡。
- 王茜周兆张雷吕林林刘革修
- 关键词：达沙替尼细胞增殖细胞迁移细胞周期PI3K/AKT途径
- 1,25-（OH）2D3对辐射损伤小鼠骨髓微环境的保护作用
- 2013年
- 目的 探讨1,25-（OH）2D3对辐射损伤小鼠骨髓微环境的保护作用,并研究其可能的分子机制.方法 60只雄性7周龄健康BALB/c小鼠按随机区组法分为健康对照组、单纯照射组和照射＋给药组,每组20只.单纯照射组和照射＋给药组给予6.0 Gy60Coγ射线照射,照射＋给药组于照射前48 h开始给予1,25-（OH）2D32.5μg/kg（用DMSO稀释）灌胃至辐射后第8天,单纯照射组给予相同剂量DMSO对照.干预后观察小鼠的一般情况、体重变化、外周血象,并取股骨制作骨髓切片观察骨髓病理改变,测定脂肪细胞面积,免疫组织化学染色比较照射后第8天不同组间过氧化物酶体增殖活化受体γ（PPARγ）的表达.结果 接受照射后小鼠均出现体重减轻,外周血白细胞降低,骨髓脂肪化等骨髓造血抑制改变.与单纯照射组比较,1,25-（OH）2D3能改善小鼠一般情况,减轻体重下降（t照射后3 d、6 d=-2.23、-2.34,P＜0.05）；另外,照射后第4天和第8天,照射＋给药组小鼠外周血白细胞计数高于单纯照射组（t=-4.99、-4.46,P＜0.05）；脂肪空泡面积减少（t=-3.75、-2.10,P＜0.05）；采用免疫组织化学染色发现1,25-（OH）2D3通过抑制PPARγ表达,减少骨髓脂肪化的形成.结论 1,25-（OH）2D3可抑制辐射后骨髓脂肪化,保护辐射后小鼠骨髓微环境.
- 陈小宇祝爱珍刘成成朱锦灿刘革修
- 关键词：骨髓微环境1,25-(OH)2D3
- 红景天苷对内皮祖细胞功能及其 PI3 K／Akt 通路的影响被引量：11
- 2014年
- 目的:研究红景天苷对人内皮祖细胞(EPCs)功能及其对磷酸肌醇3羟基激酶(PI3K)/Akt通路的影响。方法:体外培养正常人外周血EPCs,观察红景天苷或PI3K抑制剂的干预对EPCs增殖、黏附、迁移及一氧化氮(NO)分泌量的影响。MTT法检测细胞增殖、Westem blotting检测Ah蛋白表达。结果:与对照组比较,红景天苷能促进EPCs的增殖、黏附及迁移功能(P<0.05),促进EPCs分泌NO,增加细胞内磷酸化Akt蛋白的水平。但这些作用均被PI3K抑制剂LY294002抑制(P<0.05)。结论:红景天苷通过PI3K/Akt通路调节EPCs的功能。
- 周芝兰王林静刘革修朱锦灿陈小宇刘善淘
- 关键词：红景天苷PI3KAKT信号通路
- 枸杞多糖通过抑制NF-κB信号通路保护脂多糖损伤的人脐静脉血管内皮细胞增殖活性与分泌功能被引量：10
- 2017年
- 目的:观察枸杞多糖(LBP)对脂多糖(LPS)致人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,分为空白对照组、LBP组、LPS模型组、LBP+LPS实验组,采用CCK-8法检测细胞活力,Western-blot法检测诱导型一氧化氮活酶(iNOS)、Caspase-3及NF-κB p65蛋白水平,ELISA法检测上清液TNF-α、IL-1β水平,Gries法测上清一氧化氮(NO)含量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA).结果:与对照组相比,LPS模型组HUVEC增殖活力显著下降,NF-κB p65蛋白、iNOS、NO、TNF-α、IL-1β、MDA及Caspase-3水平显著升高,LBP处理则可部分增加受损内皮细胞的增殖活性,NF-κB p65蛋白、iNOS、NO、TNF-α、IL-1β、MDA及Caspase-3水平显著下降.结论:枸杞多糖对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤具有保护作用,与抑制NF-k B信号通路、抑制促炎因子TNF-α和IL-1β释放,抑制NO合成、减轻氧化应激,抑制凋亡蛋白Caspase-3表达有关.
- 刘倩韦建瑞张雷周兆吕林林
- 关键词：枸杞多糖脂多糖人脐静脉血管内皮细胞NF-ΚB
- 尼克酰胺对人脐带间充质干细胞的保护效应被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨尼克酰胺(nicotinic acid amide,NAA)减轻人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)输注损伤的效应。方法:空白对照组为0.3 m L生理盐水、MSC组为0.3 m L 1×106CFSE标记的h UC-MSCs,MSC+NAA组为0.3 m L 10 mmol/L NAA处理24 h的1×106CFSE标记的h UC-MSCs,分别与2.7 m L正常人全血混匀,注入改良Chandler Loop内,在37℃下,20 m L/min循环1 h,检测循环前后血小板、白细胞、h UC-MSCs和C3a的变化。结果:血小板消耗率空白对照组为(29.96±10.88)%、MSC组为(77.76±19.29)%、MSC+NAA组为(50.13±18.10)%;白细胞消耗率空白对照组为(37.82±13.81)%、MSC组为(64.57±17.08)%、MSC+NAA组为(41.52±17.26)%,MSC组和MSC+NAA组与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。MSC+NAA组的h UC-MSCs存活率较MSC组高(P<0.05)。空白对照、MSC和MSC+NAA组的C3a含量分别为(206.27±58.10)μg/L、(230.47±39.61)μg/L和(208.37±40.66)μg/L。结论:h UC-MSCs与正常人全血在改良Chandler Loop内共循环1 h可模拟血液介导即刻炎症反应(instant blood-mediated inflammatory reaction,IBMIR),大量损耗MSCs和血液成分,导致C3a上升。NAA可抑制IBMIR、降低血液成分的损耗、提高h UC-MSCs的存活率,提示NAA能减轻MSCs的输注损伤。
- 杨晓蕾陈智聪廖继东谷景义于波刘革修
- 关键词：人脐带间充质干细胞LOOP尼克酰胺
- 达沙替尼通过上调p53表达和下调AKT磷酸化抑制肾癌细胞系786-O及769-P体外活力与迁移被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨达沙替尼(dasatinib)体外对人肾癌细胞系786-O及769-P增殖、凋亡及迁移的影响及其分子机制。方法:不同浓度(0~2μmol/L)达沙替尼处理786-O细胞及769-P细胞(0μmol/L为空白对照组),采用MTT法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测细胞周期和细胞凋亡相关蛋白的表达水平。结果:达沙替尼对786-O及769-P两种细胞均有活力抑制和迁移阻滞的作用,随着浓度增大抑制效果越显著(P<0.05)。达沙替尼对786-O细胞和769-P细胞的IC50分别为(0.9587±0.0288)μmol/L和(0.7843±0.0660)μmol/L。达沙替尼处理24 h后,促凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达显著增加(P<0.01),细胞周期蛋白D1的表达下降(P<0.05),细胞周期相关通路蛋白p53和p21表达量均显著增加(P<0.05),p-AKT蛋白水平显著下降(P<0.05)。结论:达沙替尼通过上调p53表达并下调AKT磷酸化水平抑制人肾癌细胞系786-O及769-P的活力和迁移能力。
- 谢开红梁家健蔡大霞安姿旖刘革修胡小毛
- 关键词：达沙替尼肾癌细胞活力细胞迁移
- 川续断皂苷Ⅵ对3T3-L1细胞的增殖和分化影响被引量：4
- 2013年
- 目的研究川续断皂苷Ⅵ(asperosaponinⅥ,ASAⅥ)对3T3-L1前脂肪细胞的增殖及成脂分化影响,以进一步了解其药理作用。方法以3T3-L1前脂肪细胞为靶细胞,通过噻唑蓝(MTT)法观察不同浓度川续断皂苷Ⅵ对3T3-L1细胞增殖能力的影响;不同浓度(0、10、25、50μmol·L-1)川续断皂苷Ⅵ干预3T3-L1细胞的成脂诱导分化,油红O染色检测3T3-L1细胞分化程度;试剂盒测定各组培养液中葡萄糖及游离脂肪酸含量;荧光定量PCR(Q-PCR)检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activatedreceptorγ,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白(CCAAT/enhan-cer-binding proteinα,C/EBPα)mRNA表达水平。结果 MTT法测定表明不同浓度川续断皂苷Ⅵ对3T3-L1细胞增殖能力的影响不同,其中10μmol·L-1浓度组作用24 h后促增殖作用最明显,随着川续断皂苷Ⅵ浓度增加,促增殖效应降低;川续断皂苷Ⅵ能够剂量依赖性的抑制3T3-L1细胞成脂,减少细胞内脂滴聚集,抑制细胞对葡萄糖的吸收利用,减少游离脂肪酸形成,下调成脂过程中PPARγ和C/EBPαmRNA表达。结论川续断皂苷Ⅵ具有促进3T3-L1细胞增殖作用,并通过下调PPARγ和C/EBPα基因抑制3T3-L1细胞成脂分化。
- 陈小宇祝爱珍刘成成朱锦灿刘革修
- 关键词：3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过氧化物酶体增殖物激活受体Γ
