国家自然科学基金(30900239)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 相关作者:尹世金兰珍李羽欣戴甲培郭向前更多>>
- 相关机构:中南民族大学中国科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省教育部产学研结合项目中南民族大学自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程更多>>
- 海南斑等蝎钾通道阻断剂Im58的克隆、表达、纯化和鉴定被引量:1
- 2013年
- 为表达钾离子通道阻断剂Im58,设计了4条搭桥PCR引物,通过overlap PCR的方法扩增出蝎毒肽Im58DNA全长片段,选用表达载体pGEX-4T-1,将测序正确的克隆转化至大肠杆菌E.coli/Rosetta(DE3)中.通过检测不同诱导时间和IPTG浓度下融合蛋白的表达量,筛选出最优表达条件.表达蛋白经IPTG诱导后,融合蛋白再经GSH亲和层析柱纯化,将洗脱液经超滤浓缩脱盐、纯化后得GST-Im58融合蛋白,蛋白用小肠激酶酶切后通过RP-HPLC C18柱分离获得色谱纯的蝎毒肽.蝎毒肽通过Tricine系统的SDS-PAGE蛋白质电泳鉴定重组多肽的分子量大小和纯度,并由MALDI-TOF-MS来精确测定重组多肽的分子量.结果表明:Im58阳性克隆子证明成功构建了Im58原核表达载体,Tricine系统的SDS-PAGE蛋白质电泳和MALDI-TOF-MS鉴定Im58多肽表达纯化成功.
- 尹世金兰珍李羽欣
- 关键词:原核表达蛋白纯化
- 端粒和端粒酶的发现及其与衰老和一些人类疾病的关系被引量:1
- 2009年
- 指出了端粒和端粒酶的发现解决了线性染色体"末端复制问题",澄清了细胞分裂期间染色体末端如何被复制,以及染色体如何得到保护不至退化.对端粒和端粒酶的研究还加深了人们对衰老和癌症等重大生物医学问题的理解,也为人们寻找和设计药物或手段来延缓衰老和治疗疾病提供了契机.
- 黄文涛郭向前尹世金戴甲培
- 关键词:端粒端粒酶衰老先天性角化不良