国家重点基础研究发展计划(2001CB510101)
- 作品数：32 被引量：137H指数：7
- 相关作者：蔡继业王小燕陈勇赵涛梁志红更多>>
- 相关机构：暨南大学华中科技大学中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学一般工业技术更多>>
- 溴化乙啶致染色体畸变作用的AFM分析被引量：2
- 2007年
- 目的:研究杂环类有机化合物溴化乙啶(EB)的生物致突性,为研究由EB及其它杂环类有机化合物诱导的生物体的癌变机制提供新的视角和数据。方法:利用原子力显微镜(AFM)的高空间分辨率从可视化的角度在3个层次即DNA、染色体及胚胎干细胞(ESCs)分析了EB对它们形态结构的影响。结果:经EB作用前后DNA的平均高度降低了0.5nm,染色体臂由着丝点处断裂,细胞膜表面的分子聚集形成团状及环状结构,与大剂量EB作用后的细胞团已死亡并崩塌成网状形态。结论:EB具有强烈的生物毒性,能明显破坏DNA及染色体的表面结构,且能破坏ESCs的形态结构并导致其死亡。EB可同时从基因水平和细胞水平对细胞或生物体产生损伤及形态结构畸变。
- 吴扬哲蔡继业
- 关键词：溴化乙啶DNA染色体畸变胚胎干细胞
- 人红细胞老化过程中膜表面唾液酸变化的免疫AFM研究被引量：6
- 2007年
- 分离人外周血的轻龄和老龄红细胞,采用麦胚凝集素和胶体金对红细胞表面的唾液酸残基进行细胞化学标记,然后在AFM下成像并进行数据分析。结果显示,老龄红细胞膜表面胶体金标记的颗粒数量明显低于轻龄红细胞表面,两者之间有显著差异。推测红细胞老化过程中细胞膜表面唾液酸含量的变化可能与老化细胞的处理机制有关。免疫胶体金标记结合原子力显微镜可在纳米尺度对膜受体蛋白进行定位和定量研究,拓展了原子力显微镜在生命科学领域的应用。
- 王云起李国有蔡继业潘运龙
- 关键词：红细胞免疫细胞化学胶体金
- 天花粉蛋白对红细胞损伤作用的AFM研究被引量：9
- 2003年
- 目的 :利用原子力显微镜 (atomicforcemicroscopy ,简称AFM)观察红细胞 (redbloodcells,简称RBC)与天花粉蛋白 (tricho santhin ,简称TCS)作用后形态上的变化以及细胞膜的损伤情况。方法 :将 1 2mg ml的TCS溶液与红细胞的PBS缓冲溶液 (pH 7 4 )按 1∶4的比例混合 ,在 35℃温度下作用 2h后 ,用原子力显微镜观察受损的红细胞 ,与正常红细胞进行对比。结果 :(1)与正常红细胞相比 ,与TCS作用后的红细胞的高度明显降低 ,凹陷部分更加明显。 (2 )对红细胞上小范围扫描成像的结果显示 ,受损后的红细胞膜表面结构发生了变化 ,膜表面颗粒排列的特征依然存在 ,但颗粒之间开始产生连接。结论 :TCS能损伤红细胞膜 ,改变细胞膜的微结构 。
- 赵涛蔡继业王小燕
- 关键词：天花粉蛋白红细胞原子力显微镜细胞膜溶血作用AFM
- 原子力显微技术在细胞生物学中的应用被引量：4
- 2004年
- 对近年来原子力显微技术(AFM)在细胞生物学中的应用大致归纳为几个方面进行了简单介绍,还指出了细胞表面结构难于识别、细胞内部结构难以原位观察等AFM应用于细胞生物学中的难题,并提出了“形状探针”的概念以及超薄切片的思路以解决这些难题。AFM在细胞生物学中的应用研究还远远不足,需要更多的科学工作者加入其中。
- 陈勇蔡继业吴扬哲
- 关键词：原子力显微技术细胞生物学
- CD34阳性细胞内部结构观察被引量：1
- 2006年
- 目的利用电子显微镜以及原子力显微镜观察比较健康人和初发急性髓细胞白血病患者来源的CD34阳性细胞内部结构。方法将健康人和初发急性髓细胞白血病(M2b)患者各1例骨髓中提纯出来的CD34阳性细胞制成树脂包埋块,利用超薄切片机切成厚度为60nm的薄片,分别进行透射电子显微镜和原子力显微镜观察。结果研究对象纯化前CD34阳性细胞平均比例为(1．63±0．25)％,纯化后的平均比例为(95±2．4)％。电子显微镜和原子力显微镜均可观察健康人和初发急性髓细胞白血病患者的CD34阳性细胞内部结构,不能发现两种来源细胞有特异性差别。当原子力显微镜成像范围在10μm×10μm时,可分辨出核仁和部分细胞质内线粒体等细胞器;当原子力显微镜成像范围在2μm×2μm时,细胞内部结构变模糊,被细小的树脂颗粒所掩盖,不能分辨细胞结构。结论电子显微镜和原子力显微镜均可观察细胞的内部结构,不能发现健康人和初发急性髓细胞白血病患者两组来源的CD34阳性细胞内部有特异性差别,原子力显微镜观测细胞内部结构效果并不优于电子显微镜。
- 杨龙江孟凡义
- 关键词：免疫磁珠法CD34阳性细胞电子显微镜原子力显微镜
- 原子力显微镜对透明质酸分形结构的研究被引量：2
- 2007年
- 利用原子力显微镜研究了浓度分别为0.01 mg/mL、0.1 mg/mL、1 mg/mL的透明质酸(HA)在云母上的自组装形貌,从中得出透明质酸在云母表面生长聚集形成树枝状分形结构是有浓度限制的结论,并对其生长聚集形成树枝状分形结构的作用机理和生长过程进行了研究。透明质酸的树枝状分形结构具有统计意义上的自相似性,属不规则分形结构,与计算机模拟的DLA模型相一致。研究透明质酸的分形结构为研究透明质酸各种存在状态与其生物功能之间的关系提供了有益的帮助。
- 王书红马豫峰蔡继业
- 关键词：原子力显微镜透明质酸分形
- 天蚕素A-蜂毒素杂合肽用pBV220载体的表达、纯化和活性测定被引量：12
- 2005年
- 为提高抗菌肽的表达,在抗菌肽的N端融合了1段酸性小肽以中和表达产物对宿主的毒性;并将融合肽基因同向串连成多拷贝,在大肠杆菌中获得了较高的表达。用化学合成法分别合成了编码天蚕素A(1-8)-蜂毒素(1-10)杂合肽和酸性小肽的DNA片段,首先将其拼接成融合肽的完整基因,然后通过前后接头将融合肽基因连接成两侧具有EcoRI和SalI酶切位点的同向串连的多拷贝基因。将5份拷贝的基因克隆至pBV220表达载体,转化E.coliDH5α,温度诱导得到表达量为35%的融合蛋白。表达产物主要以包涵体形式存在,将包涵体溶解,经Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析获得纯化的融合蛋白。融合蛋白再经CNBr切割和阳离子交换层析,得到纯化的抗菌肽,经蛋白质N端测序确认序列正确。琼脂糖扩散法和液相测定法证明了纯化的抗菌肽具有抗菌活性。
- 王云起刘飞鹏李月琴张欣蔡继业
- 关键词：基因活性抗菌肽免疫系统
- 胚胎干细胞向胆管上皮细胞定向分化的体外实验研究被引量：4
- 2005年
- 目的探讨胚胎干细胞(ES细胞)体外定向分化为胆管上皮细胞(BE细胞)的诱导条件和分化规律。方法选用小鼠ES细胞,首先进行拟胚体分化,然后在培养系统中按不同时间段分别添加转化生长因子(TGF)、酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、肝细胞生长因子(HGF)和上皮生长因子(EGF)等,使ES细胞向BE细胞方向分化。用免疫细胞化学等方法检测BE细胞标记物细胞角蛋白7(CK7)、细胞角蛋白19(CK19),γ谷胺酰转肽酶(GGT)的表达,观察其表达时间和空间分布规律。结果ES细胞分化第10天,在拟胚体细胞分化群落中出现一种环状结构并有CK7和GGT表达,分化第13天时有CK19表达,三者的表达都随培养时间延长而增强;光镜下阳性细胞结构符合立方上皮细胞形态学特点。结论ES细胞在特定培养条件和细胞生长因子的作用下,可以定向分化为BE细胞并可以形成类胆管样结构。
- 胡安斌何晓顺蔡继业郑启昌
- 关键词：干细胞胆管上皮细胞细胞定向分化胆管上皮细胞胚胎干细胞体外实验研究酸性成纤维细胞生长因子
- 聚乳酸表面处理的AFM观察及对细胞粘附性的影响被引量：4
- 2005年
- 利用N aOH对溶液浇铸法制备的聚L-乳酸膜(PLLA)进行不同时间的表面处理,采用接触角仪和原子力显微镜(AFM)对处理前、后的材料表面进行亲水性和形貌表征,并初步研究了表面处理的材料对细胞粘附性的影响。结果表明,N aOH处理后的PLLA膜的亲水性明显改善,并且其表面平均粗糙度(Ra)由20 nm增加到40 nm^150 nm。成纤维细胞在改性后的材料表面的粘附和生长较改性前有了很大提高。
- 王云起焦延鹏蔡继业周长忍
- 关键词：聚L-乳酸表面处理原子力显微镜细胞
- 海藻酸钠自组装体系的AFM研究
- 2004年
- 运用原子力显微镜(AFM)对不同浓度海藻酸钠在云母表面上形成的自组装膜进行了研究,实验结果显示在0 001mg ml时,海藻酸钠出现单分子聚集体形态;0 01mg ml和0 05mg ml时,呈现致密、紧凑的网格状结构。随着浓度的改变,海藻酸钠自组装表面超微结构也发生变化。初步分析了影响其表面超微结构变化的一些因素并运用耗散理论探讨了这种变化过程可能的机理。
- 周世海蔡继业
- 关键词：海藻酸钠体形
