重庆市自然科学基金(CSTC12006BB5063)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 超声介导TFO脂质超声微泡对TFO的细胞吸收率及组织因子表达的影响
- 2009年
- 目的探讨超声作用下脂质超声微泡对反向硫代磷酸酯寡核苷酸(TFO)的细胞吸收率及内皮细胞组织因子(TF)表达的影响。方法合成针对切应力反应元件基因序列的GT21-apsTFO,并构建携带TFO的脂质超声微泡。将ECV304细胞分为4组:空白对照(SSRE)组,仅接受切应力作用6h;TFO+超声辐照(TFO+U)组,取60μlTFO(终浓度0.2μmol/L)加入细胞,同时给予超声辐照30s;TFO-脂质微泡(TFO-M)组,取60μl携带TFO脂质超声微泡(终浓度0.2μmol/L)加入细胞;TFO-脂质微泡+超声辐照(TFO-M+U)组,取60μl携带TFO脂质超声微泡(终浓度0.2μmol/L)加入细胞,同时给予超声辐照30s。后三组进行TFO转染后24h接受切应力(压强1.2Pa)作用6h。荧光显微镜观察TFO的细胞吸收率,免疫荧光法和RT-PCR分别检测TF蛋白和mRNA的表达。结果TFO-M+U组的TFO转染效率(38.83%±6.52%)高于TFO-M组(9.50%±2.88%)和TFO+U组(12.66%±3.01%,P<0.01),后两组间无显著差异。与SSRE组比较,TFO+U组、TFO-M组和TFO-M+U组中TF蛋白和mRNA的表达降低(P<0.01);TFO-M+U组明显低于TFO+U组和TFO-M组(P<0.01),后两组间无显著差异。结论在超声介导下,TFO脂质超声微泡可明显增加细胞对TFO的吸收率,从而增强TFO对TF的抑制作用。
- 梁伟华赵士福李黔宁赵洋
- 关键词：反义微气泡凝血致活酶
