国家教育部博士点基金(20093515110010)
- 作品数：10 被引量：16H指数：3
- 相关作者：关雄张灵玲胡方平范晓静邱思鑫更多>>
- 相关机构：福建农林大学福建省农业科学院福建国际旅行卫生保健中心更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 高效杀蚊苏云金芽孢杆菌BRC-LLP29的发酵优化被引量：3
- 2012年
- 苏云金芽孢杆菌BRC-LLP29为新型高效杀蚊菌株,应用快速有效的数学统计方法对其杀蚊毒力的发酵培养进行优化.通过单因素筛选确定最佳碳源为葡萄糖、麦芽糖、可溶性淀粉,氮源为typetone、大豆蛋白胨、干酪素;最佳金属离子为Mg^(2+)、Al^(3+).采用二水平Placlkett-Burman设计对影响毒力的8因素进行显著性筛选,获得培养基成分中3个重要影响因子:葡萄糖、干酪素和Al_2(SO_4)_3;运用爬坡路径法对这3种因子进行试验,获得3种重要因子的最适浓度范围;通过响应面分析法得到3个重要因子的交互作用和最佳条件,确定BRC-LLP29菌株最佳毒力水平的发酵培养基为:葡萄糖19.8g/L、干酪素28.4g/L、Al_2(SO_4)_31.2g/L、MgSO_4 2g/L、K_2HPO_4 3g/L、CaCO_3 0.5g/L,优化后毒力水平达到致死率61.11%,与响应面数学模型的预测值只有5.91%的误差.发酵条件优化结果表明:发酵温度为31°,发酵初始pH为7.0,摇瓶装量为40mL/250mL三角瓶,每瓶的接种量为3.5%,发酵72h,对致倦库蚊最终致死率达到最高为83.33%.
- 陈宇熹叶舒婷蔡美凤张灵玲关雄
- 关键词：苏云金芽孢杆菌发酵优化致倦库蚊校正死亡率
- 松材线虫分离及不同真菌对松材线虫繁殖的影响被引量：2
- 2011年
- 主要对松材线虫的取样分离进行探索,并初步研究了以真菌作为食料培养松材线虫。结果表明:取样部位对分离效果有影响,蛀孔及蛹室周围分离到的线虫量明显比枝条及树干其他部位多;不同真菌培养松材线虫效果有差异,主要采用了灰葡萄孢、黄瓜镰刀菌和香蕉镰刀菌3种真菌,通过设计不同影响因素比较培养效果,发现灰葡萄孢培养效果较为稳定且最佳,其次是黄瓜镰刀菌。因此,灰葡萄孢和黄瓜镰刀菌可选用于培养松材线虫。
- 黄响珠林秋秋吴远杰张灵玲关雄
- 关键词：松材线虫真菌
- 苏云金芽胞杆菌营养期杀虫蛋白基因vip3A在枯草芽胞杆菌中的表达被引量：2
- 2010年
- 枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis常被用于表达杀虫和抗菌蛋白。为了探讨苏云金芽胞杆菌B.thuringiensis营养期杀虫蛋白基因(vip3A)在枯草芽胞杆菌中的表达情况,促进杀虫防病工程菌构建,将枯草芽胞杆菌168菌株核糖体小亚基S4蛋白基因的启动子与苏云金芽胞杆菌WB7菌株vip3A基因的编码序列连接,插入大肠杆菌Escherichia coli与枯草芽胞杆菌穿梭载体pAD123,得到重组原核表达质粒pADpvip,将重组质粒转化枯草芽胞杆菌标准菌株168和分离自辣椒体内的生防内生枯草芽胞杆菌BS-2菌株中,获得工程菌株。SDS-PAGE分析表明在枯草芽胞杆菌168菌株的部分工程菌株中有约88kDa大小的VIP条带,而BS-2的工程菌株中未见相应的条带,表明Vip3A蛋白仅在168菌株中表达。生物测定表明有5株168的工程菌株(168vip1-4,6)表现较高的杀虫活性,工程菌株发酵稀释液(约107CFU/mL)处理的小白菜叶片饲喂斜纹夜蛾2龄幼虫72h的杀虫效果可达87.64%～92.13%,但vip3A基因转入内生枯草芽胞杆菌BS-2中不表现杀虫作用。毒力测定表明168vip2菌株对斜纹夜蛾2龄幼虫72h的LC50为0.0194mL/mL。这些结果为进一步研究基因在枯草芽胞杆菌中的表达构建杀虫防病工程菌打下了基础。
- 邱思鑫范晓静洪鹏翔关雄胡方平
- 关键词：苏云金芽胞杆菌枯草芽胞杆菌营养期杀虫蛋白异源表达杀虫活性
- 白纹伊蚊溴氰菊酯抗性品系生物学特性及可溶性蛋白的研究
- 2011年
- 在实验室条件下观察白纹伊蚊溴氰菊酯敏感品系与抗性品系的生物学特性，并对两品系的Ⅳ龄幼虫和成蚊的可溶性蛋白提取物进行SDS-PAGE分析。结果表明：与敏感品系比较，抗性品系的幼虫化蛹率明显提高，但羽化率无显著性差异。SDS．PAGE分析表明两品系的Ⅳ龄幼虫与成蚊蛋白条带均有明显区别：成蚊有分子量约为200kDa的特异性条带，而幼虫则无；但两品系的幼虫、成蚊间的蛋白条带均无明显差异。
- 王飞鹏黄恩炯肖武王光辉高博张灵玲关雄
- 关键词：白纹伊蚊溴氰菊酯抗性
- 褐飞虱中肠内膜结合短肽P2S的筛选
- 2013年
- 【目的】筛选与褐飞虱Nilaparvata lugens中肠内膜相结合的短肽,探索能阻断褐飞虱传播水稻病毒的新方法。【方法】通过改良的膜饲喂法和噬菌体短肽文库展示技术,模拟褐飞虱正常取食的行为,筛选能够与其中肠内膜结合的短肽。将筛选到的短肽与加强绿色荧光蛋白进行融合表达,经纯化后,将融合蛋白饲喂给褐飞虱若虫,通过荧光显微镜观察饲喂后若虫的中肠。【结果】使用改良的膜饲喂法,16h后褐飞虱若虫的取食率达到91%,24h后达到95%。经形态学验证,确定了一种短肽与褐飞虱中肠内膜具有结合活性,并将其命名为P2S。【结论】改良了针对褐飞虱的膜饲喂法,筛选并验证了能够与褐飞虱中肠内膜结合的活性短肽P2S。研究结果为阻断相关的水稻病毒与褐飞虱中肠内膜间的相互作用研究提供了科学依据,也为褐飞虱新型膜穿孔毒素蛋白的研究提供了理论基础。
- 邵恩斯林立金关雄
- 关键词：褐飞虱噬菌体展示技术中肠短肽
- 苏云金芽胞杆菌治理镍污染的方法的建立被引量：3
- 2011年
- 利用微生物治理重金属污染已经成为一个研究的热点,并被视为将最终替代传统的物理、化学等处理办式的一种方法。但由于一些微生物存在安全性、繁殖速度慢等问题而造成了处理效果不佳。因此,以安全性高、繁殖速度快的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)为研究载体,寻找最适Bt的镍污染处理方法对于提高治理效果具有重要意义。研究结果表明,与直接吸附法相比,利用菌体重悬法治理Ni(Ⅱ)污染的方法更具应用前景,其最大平衡富集量达到32.29mg/g。此外,研究还发现不同时期的(营养期、孢子囊期和晶体-孢子混合期)Bt富集Ni(Ⅱ)的能力不同,营养期Bt的Ni(Ⅱ)富集量显著高于其他两个时期。
- 苏新华潘洁茹蒋捷黄天培
- 关键词：苏云金芽胞杆菌镍污染
- 苏云金芽胞杆菌BRC-HZP7杀虫晶体蛋白多样性分析被引量：1
- 2011年
- 分离自武夷山土壤的苏云金芽胞杆菌BRC-HZP7菌株对小菜蛾和甜菜夜蛾幼虫有较好的毒杀作用.对该菌株进行了生理生化测定、cry基因的PCR-RFLP检测,以及通过SDS-PAGE检测晶体蛋白,并对蛋白点进行肽段指纹图谱鉴定.结果表明该菌株含有cry1Aa、cry1Ba、cry1Ia、cry2Ab、cry2Ac、cry2Ae等6种cry基因.从选取的8个蛋白条带肽段指纹图谱可以看出:标记3、6、7、8的4个蛋白点都是杀虫晶体蛋白,蛋白点6、7、8分别鉴定为Cry2Aa、Cry1Aa、Cry1Ba,蛋白点3可能是Cry1Ba的部分片段.表明该菌株有丰富的ICP资源,可作为杀虫应用的候选菌株.
- 沙莉章淘黄张敏黄志鹏关雄
- 关键词：苏云金芽胞杆菌PCR-RFLPCRY基因杀虫晶体蛋白
- 不同氮源对苏云金芽胞杆菌产几丁质酶的影响
- 2011年
- 研究了不同氮源对苏云金芽胞杆菌(Bt)BRC-HZP7菌株产几丁质酶活力的影响.结果表明:在不添加几丁质的LB培养基和牛肉膏培养基中,菌株都能合成几丁质酶,最高酶活力分别为1368.72、103.39 U;在含2%(质量分数)几丁质的产酶培养基中添加酪蛋白,能有效提高产酶活力,最高酶活力为563.57 U;在产酶培养基中分别添加质量分数为1%的谷氨酰胺、天门冬酰胺、脯氨酸、甲硫氨酸4种氨基酸,产酶活力与对照组相比都大大下降,最高酶活力较对照分别下降了32.5%、33.7%、80.6%、82.6%,故推断氨基酸可抑制Bt合成几丁质酶.
- 沙莉黄振吉关雄
- 关键词：苏云金芽胞杆菌几丁质酶氮源
