安徽省自然科学基金(000-44322)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李旭熊自忠胡勇姚彬翟志敏更多>>
- 相关机构：安徽医科大学第一附属医院安徽医科大学安徽医科大学附属省立医院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 重组pAd/CMV/V5-DEST-p16载体的构建及其对人肝癌细胞的抑制作用
- 2006年
- 目的构建pAd/CMV/V5-DEST-p16重组腺病毒载体,并观察野生型p16基因对人肝癌细胞SMMC7721株的抑制作用。方法合成人p16-INK4表达基因。构建pENTR 1A-p16质粒。通过LR反应,入口克隆pENTR 1A-p16质粒的外源性合成的修饰后的p16 cDNA,取代目的载体pAd/CMV/V5-DEST中的ccdB基因,形成表达克隆pAd/CMV/V5-DEST-p16。测序证实质粒含有目的基因。PacI酶切后的重组腺病毒载体,通过脂质体2000介导,转染293A细胞,产生缺陷性的重组腺病毒。W estern blot分析显示在由重组腺病毒介导的野生型p16基因在肝癌细胞SMMC7721中能够表达蛋白。被感染的细胞的生长受抑制。结果构建了重组p16腺病毒载体,产生缺陷性的重组腺病毒,野生型p16基因对人肝癌细胞SMMC7721株有抑制作用。结论用通路克隆系统构建重组p16腺病毒载体稳定、可靠、方便,腺病毒能够介导野生型p16基因在肝癌细胞中表达,并抑制细胞的生长。
- 姚彬胡勇熊自忠李旭
- 关键词：重组腺病毒P16基因
- 重组pAd/CMV/V5-DEST-p16质粒的构建
- 2006年
- 目的构建并鉴定pAd/CMV/V5-DEST-p16重组腺病毒质粒。方法合成人p16-INK4表达基因,构建pENTR1A-p16质粒。通过LR反应,入口克隆pENTR1A-p16质粒的外源性合成的修饰后的p16cDNA,取代目的质粒pAd/CMV/V5-DEST中的ccdB基因,形成表达克隆pAd/CMV/V5-DEST-p16,测序证实质粒含有目的基因。结果构建了p16重组腺病毒质粒,为研究p16-INK4的作用创造了条件。结论用通路克隆系统构建重组p16腺病毒质粒稳定、可靠、方便。
- 姚彬胡勇熊自忠李旭
- 原发性肝细胞癌中p16、p15基因启动子区甲基化状态检测被引量：4
- 2006年
- 目的研究原发性肝细胞癌中p16、p15基因启动子区甲基化状态及其与原发性肝细胞癌发生发展的关系。方法用特异性甲基化PCR(MSP)法检测30例原发性肝细胞癌肿瘤组织和5例正常肝脏组织中p16、p15基因启动子区甲基化状态,并进行统计分析。结果30例原发性肝细胞癌肿瘤组织中p16和p15基因启动子区分别有53.3%(16/30,P<0.05)和46.7%(14/30,P>0.05)甲基化,5例正常组织中未发现甲基化。两基因甲基化与原发性肝细胞癌临床病理及HBsAg之间无明显相关性(P>0.05),两者在原发性肝细胞癌发生中有协同性(相关性和一致性)。结论p16、p15基因启动子区异常甲基化在原发性肝细胞癌中发生频率很高,可能对肝细胞癌发生发展起重要作用。
- 徐静李旭高人焘徐修才翟志敏马金良叶书来
