黑龙江省留学归国人员基金(LC07C15)
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
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- 小鼠基质金属蛋白酶-9 RNA干扰慢病毒载体在体外的沉默效应
- 2010年
- 目的探讨构建的小鼠基质金属蛋白酶(MMP)-9 RNA干扰(RNAi)慢病毒载体在体外工具细胞中的沉默效应。方法针对小鼠MMP-9基因序列构建的MMP-9过表达克隆质粒和RNAi慢病毒载体共转染培养良好的工具细胞(293T和NIH3T3细胞),采用实时荧光定量PCR和Western印迹观察RNAi对工具细胞中MMP-9 mRNA和蛋白表达的下调作用。结果构建的MMP-9 RNAi慢病毒载体能显著降低工具细胞中MMP-9表达量。结论成功构建了能够抑制小鼠MMP-9表达的RNAi慢病毒载体,为在体研究奠定了基础。
- 金哲秀王育珊李南
- 关键词：基质金属蛋白酶-9RNA干扰慢病毒载体
- MMP-9基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
- 2010年
- 目的构建小鼠基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体。方法针对小鼠MMP-9基因序列,利用公用网站按照RNAi序列设计原则,设计RNAi靶点序列,并合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经HpaⅠ和XhoⅠ酶切后的pGCL-GFP载体连接产生短发卡RNA慢病毒载体,用插入鉴定引物进行PCR鉴定阳性克隆并测序,应用Western blot在293T细胞中鉴定MMP-9表达的下调作用。结果PCR鉴定和DNA测序结果显示合成的含MMP-9 shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确;构建的MMP-9RNAi慢病毒载体能够抑制MMP-9的表达。结论应用基因工程技术,成功构建了小鼠MMP-9基因RNAi慢病毒载体,为应用于在体基因治疗创造了条件。
- 金哲秀王育珊李南
- 关键词：基质金属蛋白酶-9RNA干扰慢病毒载体
- 不稳定动脉粥样硬化斑块与基质金属蛋白酶相关性研究进展被引量：7
- 2010年
- 金哲秀王育珊
- 关键词：基质金属蛋白酶冠状动脉血运重建术冠状动脉狭窄病变急性冠脉综合征不稳定性心绞痛心源性猝死
