四川省教育厅资助科研项目(2006B026)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：彭强宋淑敏杨春刘铭李燕更多>>
- 相关机构：泸州医学院附属医院泸州医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 外源性内皮祖细胞在裸鼠骨髓内的归巢和维持被引量：1
- 2011年
- 目的研究外源性内皮祖细胞(EPCs)在裸鼠骨髓内的归巢性和维持情况,及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在其中的作用。方法从脐血中利用梯度密度离心法分离、培养EPCs。将绿色荧光蛋白(GFP)基因转染入EPCs,将转染后的EPCs移植到肢体缺血的裸鼠体内。分别在术后12 h、3 d7、d、14 d2、1 d通过荧光显微镜、免疫组化和PCR检测GFP-EPCs、CD133、HIF、CD31在裸鼠皮肤、脾脏、缺血组织和骨髓中的表达情况。结果在裸鼠缺血组织和骨髓内可见转染GFP的EPCs。缺血组织和骨髓内的CD133、HIF-1αRNA表达高于皮肤和脾脏内(P<0.01)。移植后71、42、1 d,CD133在骨髓内的表达无明显改变(P>0.05)。结论外源性EPCs可在受体体内向骨髓归巢,并在一定时间内在骨髓内保持未分化状态。
- 彭强李先华宋淑敏刘铭杨春杨恩肖婷婷
- 关键词：内皮祖细胞骨髓裸鼠归巢
- 慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因转染血管内皮祖细胞的实验研究
- 2011年
- 目的探讨HIV-1来源的慢病毒载体介导绿色荧光蛋白(GFP)基因转染血管内皮祖细胞(EPCs)的可行性和方法。方法用梯度密度离心法分离人脐带血内皮祖细胞,在EGM-2培养基中培养。用细胞免疫荧光染色和流式细胞仪检测其表达情况。以HIV-1来源的慢病毒为载体、以GFP基因为目的基因转染EPCs,MTT法检测不同病毒滴度(MOI)时细胞增殖情况并观察转染率。结果单个核细胞经EGM-2培养基培养1周后即分化成EPCs。GFP转染后48 h细胞即发出绿色荧光。MOI 1∶10转染组细胞转染率低于MOI 1∶50组(P<0.05)。MOI 1∶50转染后的细胞与未转染GFP组比较,生长曲线无明显差异(P>0.05)。MOI 1∶100组转染后细胞的增殖处于停滞状态。结论采用HIV-1来源的慢病毒载体介导GFP基因转染标记EPCs是可行的。以MOI 1∶50进行转染对细胞生长影响小,转染效率高。
- 宋淑敏刘铭彭强植勇杨春
- 关键词：血管内皮祖细胞转染慢病毒绿色荧光蛋白质类
- 人脐血内皮祖细胞的体外培养被引量：2
- 2012年
- 目的从人脐带血中分离内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),建立人脐血内皮祖细胞体外培养的方法,为实现内皮祖细胞的移植及实验研究提供足量的细胞来源。方法采用密度梯度离心法分离人脐带血内皮祖细胞,在EGM-2培养基中培养,采用流式细胞仪、免疫组化和免疫荧光鉴定EPCs。结果脐带血单个核细胞在经EGM-2培养过程中出现梭形贴壁和铺路石样等形态;1周后既分化成EPCs,细胞免疫荧光CD133染色率在培养第7天为(67.2±2.12)%,免疫组化CD34染色率为(89.67±2.05)%,流式细胞仪鉴定该种细胞CD133与KDR的双阳性率达87.8%。可确定该细胞为EPSc。结论采用本培养方法可获得良好的内皮祖细胞用于实验研究。
- 王明勇李燕宋淑敏彭强
- 关键词：细胞培养技术单个核细胞人脐血内皮祖细胞
