广西壮族自治区自然科学基金(9912035)
- 作品数：10 被引量：60H指数：5
- 相关作者：赖祥进曹林枝廖志红凌敏周素芳更多>>
- 相关机构：广西医科大学右江民族医学院钦州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金新世纪广东省高等教育教学改革工程项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 野生型p53基因诱导人肝癌细胞系HuH-7凋亡的研究被引量：3
- 2005年
- 目的 通过转染野生型p5 3基因作用于肝癌细胞株HuH -7,来研究其诱导肿瘤细胞的凋亡作用。方法 野生型p5 3基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞系HuH 7,96h后,用流式细胞仪进行细胞凋亡分析。结果 流式细胞仪分析细胞凋亡结果:阴性对照组为2 . 8%、转染pUHD 10 3组为4 .1%、转染pUHD- 10 - 3 p5 3组为39. 6 %。结论 野生型p5 3基因可诱导人肝癌细胞系HuH 7发生凋亡。
- 赖祥进曹林枝廖志红翁国庆
- 关键词：肝癌P53基因凋亡
- pUHD10-3-p53质粒的扩增及分离纯化被引量：1
- 2006年
- 目的:建立一种确实有效的pUHD10-3-p53质粒提取方法,为科学研究制备高纯度pUHD10-3-p53质粒奠定基础。方法:将克隆有Wt-p53基因的cDNA质粒(pUHD10-3-p53)转染感受态细菌E.coli DH5a菌株。经扩增,用小量碱裂解法提取质粒DNA,再纯化后,用紫外分光光度计测定其含量,并进行酶切电泳鉴定。结果:pUHD10-3-p53质粒用限制性内切酶BamH I酶切后在1.5%琼脂糖凝胶中电泳,可观察到3.15、1.8 kb两条区带。结论:用小量碱裂解法提取pUHD10-3-p53质粒,效率高,质量稳定,得到的质粒DNA的质量与纯度均符合实验要求。
- 廖志红赖祥进曹林枝黄文君
- 关键词：纯化酶切
- 野生型p53基因与双脱水二乙酰卫矛醇联合诱导肝癌HLE细胞凋亡的研究被引量：9
- 2004年
- 背景和目的:p53基因是抑癌基因,研究发现在人类肿瘤中p53基因常发生突变。实验证明野生型p53基因不但抑制肿瘤细胞增殖,而且诱导肿瘤细胞凋亡。但是,单独应用野生型p53基因诱导肿瘤细胞凋亡的作用不很明显。因此,野生型p53基因与药物的联合作用来提高肿瘤细胞凋亡率是目前对肿瘤研究的一新领域。本实验通过转染野生型p53基因联合双脱水二乙酰卫矛醇(1,2:5,6-dianhydro-3,4-diacetylgalactitol,DADAG)作用于肝癌细胞株HLE,研究联合诱导肿瘤细胞的凋亡作用。方法:野生型p53基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞株HLE,同时加入DADAG。96h后,用流式细胞仪、DNA电泳方法进行细胞凋亡分析。结果:流式细胞仪分析细胞凋亡结果:阴性对照组为1.4%、转染pUHD10-3组为3.5%、DADAG处理组为32.6%、转染pUHD10-3-p53组为43.4%、转染p53基因及DADAG处理组为74.6%。DNA电泳发现,转染p53基因及DADAG处理组有到DNA梯形条带。结论:野生型p53基因与DADAG均可诱导人肝癌细胞HLE发生凋亡,转染野生型p53基因与DADAG联合作用,有促进肝癌细胞凋亡的作用。
- 赖祥进曹林枝周瑛蓝秀万廖志红周素芳
- 关键词：野生型P53基因转染HLE肿瘤细胞凋亡肝癌电泳
- 人Mn-SOD cDNA的克隆及其在巴斯德毕赤酵母中的表达被引量：14
- 2005年
- 以人肝细胞株(L0 2 )总RNA为模板,用RT PCR扩增出人锰超氧化物歧化酶(hMn SOD)cDNA ,将其插入含有AOX1基因启动子和α分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC9k ,构建重组质粒pPIC9k MnSOD ,转化毕赤酵母GS115 ,筛选出整合了多拷贝hMn SOD基因的Mut+ 表型菌株,摇瓶培养,0 5 %甲醇诱导表达。SDS PAGE分析显示,诱导4d的培养上清中hMn SOD的表达量约为上清总蛋白的32 % ,酶比活可达2 4 7 7u mg。hMn SOD在巴斯德毕赤酵母中实现了分泌性表达。
- 凌敏赖祥进谢科
- 转染野生型p53基因对人肝癌细胞生长的抑制作用被引量：13
- 2005年
- 目的 研究转染野生型 p5 3基因对人肝癌细胞的生长影响作用。 方法 将克隆有野生型 p5 3基因的 pUHD10 3质粒 ,通过Lipofectin转染肝癌细胞株BEL 74 0 2、BEL 74 0 4、HLE、HuH 7及SMMC 772 1,用四甲基偶氮唑 (MTT)法观察细胞的生长情况。结果 转染野生型p5 3基因 ,可使肝癌细胞BEL 74 0 4、HLE、HuH 7的生长明显受到抑制 ,第 4天生长抑制率分别是5 0 .0 %、6 9.0 %及 6 5 .1%。结论 转染野生型 p5 3基因能有效抑制肝癌细胞株BEL 74 0 4、HLE、HuH
- 赖祥进
- 关键词：P53基因肝癌凋亡
- 双脱水二乙酰卫矛醇对3种肝癌细胞生长的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨双脱水二乙酰卫矛醇(DADAG)对3种人肝癌细胞生长的影响。方法:在培养的人肝癌细胞HLE、BEL-7404和SMMC-7721中,加入DADAG作用1、2、3、4d后,用MTT法检测细胞生长情况。结果:DADAG对不同肝癌细胞其半数抑制浓度(IC50)不同,HLE为5.39mg/L;BEL-7404为7.49mg/L;SMMC-7721为14.30mg/L。加入浓度为8.0mg/L的DADAG作用4d后,HLE的生长抑制率分别为31.48%、16.05%、34.86%和48.20%;BEL-7404的生长抑制率分别为26.32%、25.88%、17.86%和29.40%;而加入浓度为16.7mg/L的DADAG作用4d后,SMMC-7721的生长抑制率分别为23.81%、36.62%、33.15%和50.83%。镜下可见药物作用后细胞形态变圆、固缩等现象。结论:DADAG在体外具有明显的抑制肝癌细胞生长的作用。
- 曹林枝滕少康廖志红赖祥进
- 关键词：肝癌
- 双脱水二乙酰卫矛醇对人肝癌细胞生长影响的研究被引量：3
- 2005年
- 目的 探讨双脱水二乙酰卫矛醇 (1,2 :5 ,6 Dianhydro 3,4 diacetylgalactitol,DADAG)对肝癌细胞生长的影响。 方法 在培养的人肝癌细胞SMMC 772 1中 ,加入DADAG分别作用 1、2、3、4d ,用MTT法检测细胞生长情况。结果 加入浓度为16 .7μg/ml的DADAG作用肝癌细胞 1、2、3、4d后 ,肝癌细胞的生长抑制率分别为 2 3.8%、35 .7%、33.1%和 5 0 .8%。镜下可见细胞形态变圆、固缩等现象。表明细胞生长受到抑制。
- 韦怡怡赖国丽邓振德黄凌云曹林枝赖祥进
- 关键词：肝癌
- 二乙酰去水卫矛醇联合p53基因转染对肝癌细胞生长的影响被引量：6
- 2004年
- 目的 :观察野生型p5 3基因转染联合二乙酰去水卫矛醇 (1,2∶5 ,6 dianhydro 3,4 diacetylgalactitol,DADAG)对肝癌细胞生长的影响。方法 :将克隆有野生型p5 3基因的pUHD10 3质粒 ,通过脂质体 (lipofectamine)介导转染人肝癌细胞 ,同时 ,在培养液中加入DADAG ,用四甲基偶氮唑 (MTT)法分析细胞的生长情况。结果 :人肝癌细胞HLE转染野生型p5 3基因后 ,其生长作用明显受到抑制 ,细胞生长抑制率在第 4天可达 6 7.6 8%。如果HLE细胞中只加入含DADAG的培养液后 ,其细胞生长也受到一定的抑制 ,生长抑制率最高可达到 5 3.0 9%。肝癌细胞HLE转染野生型p5 3基因后联合应用DADAG时 ,细胞的生长抑制率在第 4天可达到 85 .37% ,实验结果显示DADAG联合野生型p5 3基因增强对肝癌细胞的生长抑制作用。结论 :DADAG能加强野生型p5 3基因对肝癌细胞的生长抑制作用。
- 赖祥进曹林枝周瑛蓝秀万廖志红周素芳
- 关键词：P53基因肝癌
- 转染野生型p53基因对肝癌细胞生长的影响被引量：5
- 2005年
- 目的:通过转染野生型p53基因致肝癌细胞株BEL-7404,研究其对肝癌细胞的生长及凋亡作用。方法:野生型p53基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞株BEL-7404。用四甲基偶氮唑(MTT)法测定细胞生长曲线,用流式细胞仪进行细胞凋亡分析。结果:肝癌细胞BEL-7404转染野生型p53基因后,其生长作用明显受到抑制,细胞生长抑制率在第4天可达50.8%。流式细胞仪分析细胞凋亡结果:阴性对照组为1.7%,转染pUHD10-3组为3.2%,转染pUHD10-3-p53组为40.7%。结论:野生型p53基因可诱导肝癌细胞BEL-7404的生长抑制及发生凋亡。
- 赖祥进曹林枝廖志红刘波翁国庆
- 关键词：肝癌P53基因凋亡
- 猪血超氧化物歧化酶、血红素和蛋白胨分离制备的研究被引量：9
- 2005年
- 目的:研究从猪血分离制备超氧化物歧化酶(SOD)、血红素(Hematin)和蛋白胨(peptone)的工艺流程。方法:SOD的分离纯化采用加热变性、盐析和凝胶过滤的方法;血红素的提取采用鞣酸法;蛋白胨的制备采用碱性酶解法。结果:根据这一工艺流程,能从1000ml猪血的红细胞中获得总活力为25.8×104U、比活力为1.19×104U/mg的SOD和产量达2678mg、纯度达92.3%的血红素,并且还从猪血总蛋白中制备了含Arg、Leu、Lys、Phe、Val丰富的蛋白胨。结论:从猪血中成功制备了产率与纯度较高的SOD、血红素以及营养价值较高的蛋白胨。
- 凌敏蔡丹昭苏上贵黄勇奇赖祥进
- 关键词：猪血超氧化物歧化酶血红素蛋白胨
