广西壮族自治区自然科学基金(0342010-5)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 相关作者：李力黎丹戎张洁清覃捷张玮更多>>
- 相关机构：广西医科大学附属肿瘤医院广西壮族自治区人民医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 尿激酶型纤溶酶原激活因子介导的卵巢上皮癌细胞浸润转移体外的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目地:探讨尿激酶型纤溶酶原激活因子在卵巢上皮癌浸润转移中的作用机制。方法:用RT-PCR技术从人卵巢上皮癌组织总RNA中逆转录uPA基因cDNA全长,克隆至pGEM-T Easy Vector,鉴定后与真核表达载体PCMV-HA连接,酶切及测序。用脂质体法将重组质粒DNA转染至SKOV3细胞。加压筛选并培养PCMV-HA-uPA及对照细胞。分别用RT-PCR和W estern blot方法检测转染前后SKOV3细胞uPA的表达。细胞增殖能力测定用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验,细胞周期测定用流式细胞仪法,细胞体外侵袭,迁移和黏附能力测定分别采用Matrigel Invasion,TranswellM igration和Adhersion Assay方法。结果:(1)uPA阳性表达能介导SKOV3细胞克隆形成,与对照组细胞的差异有统计学意义(P<0.05);(2)uPA阳性表达能介导SKOV3细胞的细胞周期中S期比例增加,与对照组细胞的差异有统计学意义(P<0.05);(3)uPA阳性表达介导SK-OV3细胞的体外侵袭,迁移和黏附能力均明显强于对照细胞株,差异有统计学意义(P=0.0002,<0.0001和0.0049)。结论:uPA通过促进肿瘤细胞侵袭,迁移和黏附能力在卵巢上皮癌浸润转移中起了重要作用。
- 覃捷李力张洁清张玮黎丹戎
- 关键词：尿激酶型纤溶酶原激活剂卵巢肿瘤肿瘤浸润基因转染技术
- uPA和PAI-1基因克隆及真核表达载体的构建及鉴定
- 2009年
- 目的:克隆人卵巢上皮癌组织uPA和PAI-1基因cDNA全长,构建表达uPA和PAI-1基因的真核表达载体。方法:采用RT-PCR技术从人卵巢上皮癌组织总RNA中逆转录uPA和PAI-1基因的cDNA全长,克隆到pGEM-TEasy Vector上,通过酶切和测序进行鉴定;酶切后与真核表达载体pcDNA3.1/myc-his(-)B连接,酶切及测序再次鉴定;采用脂质体法将重组质粒DNA转染至卵巢癌上皮细胞SKOV3细胞;采用有限稀释法和G418分别加压筛选并培养SKOV3-uPA和SKOV3-PAI-1细胞及对照细胞;Western blot法检测转染前后SKOV3细胞uPA和PAI-1基因的表达。结果:成功扩增出uPA和PAI-1基因的cDNA的全长,并克隆入T载体,DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建含正确目的基因的表达载体pcDNA3.1-uPA和pcDNA3.1-PAI-1,Western blot能检测到uPA和PAI-1基因蛋白分别在SKOV3-uPA和SKOV3-PAI-1细胞中的表达。结论:成功构建了uPA和PAI-1表达基因的真核表达载体,为进一步研究uPA和PAI-1基因在卵巢癌侵袭转移中的作用提供了实验基础。
- 覃捷李力张洁清张纬黎丹戎
- 关键词：卵巢上皮癌UPA真核表达载体
- 卵巢恶性肿瘤组织中uPA PAI-1蛋白表达与其临床病理因素的关系被引量：2
- 2008年
- 目的:最近研究表明尿激酶型纤溶酶原激活因子(urokinase-type plasminogen activator,uPA)及其1型抑制因子(PAI-1)在恶性肿瘤的发生、发展及转移过程中起重要作用,且其过度表达与预后差有关。本研究从蛋白水平探讨uPA及PAI-1表达与卵巢肿瘤发生、发展及预后的关系。方法:采用SABC免疫组织化学方法检测40例卵巢恶性肿瘤(Ⅰ～Ⅱ期14例,III～IV期26例)、20例良性肿瘤及20例正常卵巢组织uPA及PAI-1蛋白的表达。结果:1)uPA、PAI-1在恶性肿瘤中的表达率为52.5%及67.5%,明显高于良性肿瘤及正常组织,差异均有显著性(P<0.05),而良性肿瘤与正常组织无明显差异(P>0.05)。2)uPA、PAI-1在恶性卵巢肿瘤中表达与病理类型、腹水多少、有无淋巴结转移无关。3)uPA、PAI-1在III～IV期的表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期,大网膜及肝有转移者明显高于无转移者;uPA表达与肿瘤分化程度呈负相关,PAI-1与残存灶大小呈正相关。4)uPA阴性表达者的平均总生存期(49.0个月)明显高于阳性者(29.3个月);PAI-1阴性表达者的平均总生存期(52.2个月)明显高于阳性者(31.8个月),(P均<0.01)。5)COX模型分析显示PAI-1蛋白表达可作为独立的预后指标。结论:uPA、PAI-1与卵巢肿瘤的发生、恶化有关,可作为估计肿瘤转移潜能及预后的重要指标。
- 张洁清凌丹李力黎丹戎张纬
- 关键词：卵巢肿瘤纤溶酶原激活因子
- 卵巢肿瘤患者血清尿激酶型纤溶酶原激活物及其抑制物1含量检测的临床意义被引量：3
- 2010年
- 目的：探讨血清尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）及其抑制物1（PAI-1）含量的检测对卵巢恶性肿瘤浸润转移诊断的临床意义。方法：采用酶联免疫吸附反应（ELISA）检测49例卵巢恶’性肿瘤，49例卵巢良性肿瘤和49例正常健康妇女血清中uPA和PAI—1含量。并对其中22例卵巢上皮性癌患者手术治疗前后外周血uPA和PAI—1含量进行动态观察，分析其与临床病理因素及预后关系和作为卵巢恶性肿瘤浸润转移诊断标志物的可能性。结果：①卵巢恶性肿瘤患者血清中uPA和PAI．1含量明显高于正常对照和良性肿瘤（P〈0．01）。②卵巢恶性肿瘤患者术后血清uPA和PAI-1含量较术前有明显下降（P〈0．01）。③低分化恶性肿瘤、Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移患者术前血清uPA和PAI-1含量均明显高于高中分化者（P〈0．05，P〈0．01）、Ⅰ～Ⅱ期患者（P〈0．05，P〈0．01）、无淋巴结转移者（P〈0．05，P〈0．01），大网膜转移者术前血清uPA含量高于无大网膜转移者（P〈0．05）。④uPA或PAI-1阳性者和阴性者的中位生存时间相比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论：卵巢恶性肿瘤患者血清uPA和PAI-1含量高低与其疾病进展相关，血清uPA和PAI．1含量测定有助于判断卵巢恶性肿瘤浸润转移。
- 覃捷李力张玮张洁清黎丹戎潘忠勉高琨
- 关键词：卵巢肿瘤
