广东省医学科学技术研究基金(A2013239) 作品数:6 被引量:9 H指数:2 相关作者: 洪乐鹏 邵帅 汪光亮 王智明 王迪 更多>> 相关机构: 广州医科大学 更多>> 发文基金: 广东省医学科学技术研究基金 广东省科技计划工业攻关项目 广州市科技支撑计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
Purmorphamine对BV2细胞帕金森病相关基因Nurr1表达的影响 被引量:2 2016年 目的探讨Purmorphamine(PM)激活小胶质细胞瘤BV2细胞中Sonic hedgehog(SHH)信号通路对帕金森病(PD)相关基因Nurr1表达的影响。方法体外培养BV2小胶质细胞并分为对照组、脂多糖(LPS)处理组、PM+LPS处理组以及PM处理组,运用荧光定量PCR(Q-PCR)检测经LPS处理后BV2细胞中SHH信号通路Smoothened(Smo)、Gli1及Nurr1基因mRNA表达情况;PM激活SHH信号通路后,Q-PCR检测Nurr1mRNA含量以及炎性反应因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达情况。结果(1)与对照组相比,LPS处理后4h和24h时Smo和Gli1mRNA表达均升高(P<0.01,P<0.05);(2)与对照组相比,PM处理组细胞Smo和Gli1mRNA表达升高(P<0.01),LPS组Nurr1、IL-1β、TNF-αmRNA表达亦均升高(均P<0.01);而PM+LPS组Nurr1、IL-1β、TNF-αmRNA表达均较LPS处理组下降(均P<0.01)。结论PM激活SHH信号通路能够抑制BV2细胞中Nurr1的表达,并能发挥抑制炎性反应作用。 洪乐鹏 邵帅 汪光亮关键词:BV2细胞 帕金森病 NURR1 炎症 Purmorphamine通过调控Smad6的表达发挥抗炎作用 被引量:1 2016年 目的探讨2,6,9-三取代嘌呤化合物(PM)激活BV2细胞中SHH信号通路发挥抑制炎症作用的分子机制。方法 BV2细胞按实验需要分为1对照组;2脂多糖(LPS)组;3PM+LPS组;4PM组。PM激活BV2细胞中SHH信号通路后,应用荧光定量PCR(Q-PCR)检测Smad6、E3泛素连接酶Peli1、炎症转录因子(NF-κB)以及转化生长因子β1(TGF-β1)的m RNA表达情况。结果与对照组比较,LPS刺激后Smad6 m RNA表达下降(P<0.01),Peli1 m RNA和NF-κB m RNA表达升高(均P<0.01),PM处理后能促进Smad6 m RNA和TGF-β1 m RNA表达(P<0.01,P<0.05);与LPS组比较,PM对LPS作用下的Peli1 m RNA和NF-κB m RNA表达起抑制作用(均P<0.01)。结论 PM激活SHH信号通路后发挥抗炎作用下调Peli1和NF-κB表达水平,可能与上调Smad6表达和增加TGF-β1表达水平有关。 洪乐鹏 邵帅 谭珍 甘斯婷 汪光亮关键词:SHH信号通路 SMAD6 炎症 脂多糖 SHH信号通路的激活对帕金森病模型小鼠的保护及其机制 被引量:2 2017年 目的:为探讨Sonic Hedgehog(Shh)信号通路激活剂,2,6,9-三取代嘌呤化合物(purmorphamine,PM)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型动物中小鼠身体的协调能力、多巴胺能神经元及小胶质细胞细胞活性的影响及可能机制。方法:将47只C57BL/6J雄性8周小鼠随机分为control组、PM组、MPTP组、PM+MPTP组,使用腹腔注射1-methyl-4-phenyl 1,2,3,6-tet-rahydropyridine(MPTP)制作小鼠的帕金森病模型。应用悬杆实验、免疫组织化学和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,Q-PCR)技术分别检测小鼠的运动协调能力,酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性的多巴胺(DA)能神经元的形态、数目,Ionized calcium binding adapter molecule 1(Iba1)阳性的小胶质细胞的形态以及炎症因子TNF-α的表达情况。结果:(1)悬杆实验显示:在预处理PM 24 h后MPTP诱导的PD模型小鼠中,与MPTP组相比,PM+MPTP组小鼠后爪抓到横杆的时间明显缩短(P<0.01);而与control组相比,MPTP组中小鼠后爪抓到横杆的时间显著延长(P<0.01)。(2)TH免疫组织化学结果显示:control组TH+DA能神经元染色很深,胞体密集,突起明显;与control组相比,MPTP组TH+DA能神经元的数量明显减少,细胞质着色变浅,突起变短或者消失(P<0.01);与MPTP组相比,PM+MPTP组TH+DA能神经元不仅使损失细胞的数目明显减少,而且细胞质染色变深,突起有所增多(P<0.01)。(3)Iba1免疫组织化学染色显示:与control相比,MPTP组小胶质细胞变大、形态不规则、突起变粗;与MPTP组相比,PM+MPTP组小胶质细的胞体形态较小,突起呈现细长较多。(4)Q-PCR检测结果显示:与control组相比,MPTP组TNF-α和Iba1mRNA表达明显增加(P<0.01);与MPTP组对比,PM+MPTP组表达的TNF-α和Iba1 mRNA水平明显降低(P<0.01)。结论:PM可改善PD模型小鼠的运动协调能力,保护多巴胺能神经元,其机制可能与降低小胶质细胞的炎症水平有关。 洪乐鹏 汪光亮 王迪 王智明 邵帅关键词:帕金森病 炎症 小胶质细胞 小鼠 不同添加剂对BSA-PLGA缓释微球特性的影响 2014年 目的:探讨不同添加剂对聚乳酸-聚乙二醇酸(PLGA)包裹牛血清白蛋白(BSA)制备的BSA-PLGA微球特性的影响。方法:采用复乳-溶剂挥发法制备BSA-PLGA微球,显微测量微球粒径,以微量BCA法测定微球的蛋白含量并计算包封率,进行体外释放,测定微球的累积释放量。探索添加剂PEG6000、Tween-20、Trehalose对微球粒径、包封率、突释量和累积释放量的影响。结果:加入添加剂制备的微球,粒径增大,突释降低,载药量、包封率、累积释放量均有所提高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论:通过加入适当种类和浓度的添加剂,可以得到较高包封率和累积释放量、较小突释、适当载药量和粒径的BSA-PLGA微球。 黄婉丹 洪乐鹏 龙大宏关键词:牛血清白蛋白 微球 埋植型和非埋植型种植义齿受载过程中种植体骨界面白细胞介素-1β的表达 被引量:1 2014年 目的对比埋植型与非埋植型种植体在义齿修复受载后,种植体骨界面白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)表达的变化。方法选用健康成年Beagle犬8只,于每只实验犬下颌左侧植入埋植型种植体3枚,右侧植入非埋植型种植体3枚,共植入48枚种植体。双侧第1个种植体均不修复,作为对照组,其余种植体均行铸造全冠修复,作为受载组。实验犬分别在加载2、4、8、12周时各处死2只。采用免疫组织化学方法,对修复后不同时期埋植型与非埋植型种植体的种植体骨界面IL-1β的表达进行比较,并对结果进行统计学分析。结果种植义齿修复受载2周时种植体骨界面IL-1β的表达较对照组增高;4周时达高峰,与对照组差异有统计学意义(P<0.05);8周时表达开始下降,但仍高于对照组;12周时恢复到接近对照组水平。埋植型和非埋植型种植体在修复后受载的4个检测时间点种植体骨界面IL-1β水平的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论埋植型和非埋植型种植体在义齿修复受载后,所承受的机械负荷均能经过种植体传递至周围骨组织,刺激种植体骨界面IL-1β表达的变化,但二者的表达变化无显著差异。 袁林 王伟东 杨征毅 郝璐 王涵 孙晋 曹依娜 洪乐鹏关键词:埋植型 非埋植型 白细胞介素-1Β 种植体骨界面 Purmorphamine对帕金森病炎症细胞模型的影响及其作用机制 被引量:3 2016年 为探讨Shh信号通路激活剂,2,6,9-三取代嘌呤化合物(Purmorphamine,PM)对帕金森病炎症细胞模型中炎症因子TNF-α,IL-1β和Peli1等的表达,以及对PC12细胞的影响及其作用机制,本研究应用MTT法和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,Q-PCR)技术分别检测了细胞活性和相关基因的表达。结果显示:(1)MTT法检测结果显示:与对照组细胞相比,脂多糖(LPS)组、PM组和二甲基亚砜(DMSO)组BV2细胞的存活率无明显差异(P>0.05);而与LPS组相比,PM+LPS组PC12细胞的存活率显著升高(P<0.01)。2)Q-PCR实验结果显示:与对照组相比,LPS-24 h组TNF-α、IL-1β、Peli1的表达显著升高,LPS-4 h组Smo和Gli1的表达显著升高,而LPS-24 h组TRAF3表达显著下降(P<0.01);与对照组相比,PM-24 h组的Smo、Gli1表达显著升高(P<0.01);与LPS组相比,PM+LPS组BV2细胞TRAF3的表达显著升高,而炎症因子TNF-α,IL-1β,Peli1的表达显著下降(P<0.01)。由此我们推测:PM可提高炎症因子作用下PC12细胞的存活率,其作用机制可能与增加TRAF3的表达有关。 洪乐鹏 汪光亮 王迪 王智明 邵帅关键词:帕金森病 BV2细胞 PC12细胞 炎性因子