国家高技术研究发展计划(2006AA10Z349)
- 作品数：6 被引量：65H指数：5
- 相关作者：郑媛孙谧王跃军刘均忠于建生更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛科技大学上海水产大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 海洋侧孢短芽孢杆菌S-12-86溶菌酶的分离纯化与冻干技术研究
- 2010年
- 海洋微生物溶菌酶发酵液经低温离心、超滤浓缩、乙醇提取、Superdex 75 10/300凝胶层析和反相高效液相色谱层析纯化得到电泳纯海洋溶菌酶,分子量为17.1 kD,比活达到3 987.7 U/mg,纯度提高41.98倍,活力回收率为21.7%。对该酶冷冻干燥过程的研究结果表明,海藻糖、蔗糖和麦芽糖对该酶均有一定的冻干保护作用。其中,以海藻糖的保护效果最佳。0.5 mol/L海藻糖与20 mg/ml吐温80复合作为冻干保护剂,使冻干后的溶菌酶活性维持在95%以上,为该酶进一步研究和应用提供了稳定的酶制剂。
- 纪存朋孙谧于建生郑媛
- 关键词：海洋微生物溶菌酶分离纯化冷冻干燥
- 海洋侧孢短芽孢杆菌Lh-1株所产多肽R-1性质分析及作用原理探讨被引量：5
- 2010年
- 对海洋侧孢短芽孢杆菌（Brevibacillus laterosporus）Lh-1所产多肽R-1的性质及作用机理进行了研究。R-1对温度和pH稳定,在pH 11.0~12条件下,121℃处理1 h,其活力保持在75%以上。经3种不同浓度的蛋白酶（碱性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶）处理4 h后,活性保持在80%以上。与常见的金属离子和化学试剂在一起反应,对抗菌肽R-1的活性无明显影响,可以配合一起使用,仅吐温和SDS对其影响较大。氨基酸分析表明,抗菌肽R-1由亮氨酸（Leu）、酪氨酸（Tyr）、缬氨酸（Val）、异亮氨酸（Ile）、赖氨酸（Lys）、甘氨酸（Gly）、蛋氨酸（Met）、丝氨酸（Ser）、丙氨酸（Ala）9种氨基酸组成,其中疏水氨基酸居多。抑菌试验表明R-1的抑菌谱广泛,对经培养分离出来的大肠杆菌及白假丝酵母菌的扫描电境超微结构观察表明,R-1的杀菌机制主要是通过含有带正电荷的Lys与带负电荷的磷脂分子结合,然后R-1的疏水端插入到指示菌的疏水区,改变膜的构象,从而导致菌体的死亡。
- 任召珍孙谧郑媛刘均忠王跃军郝建华张胜军
- 关键词：多肽
- 海洋溶菌酶高产菌株发酵条件探讨及培养基优化被引量：5
- 2008年
- 对海洋溶菌酶高产菌株R-J-101液体发酵的主要影响因子进行了单因素实验探讨,确定了最佳培养条件:初始pH为7.5,温度为30℃,转速为200r/min,接种量为6%。采用二次回归正交设计法优化发酵培养基各组分的配比,结果表明,最优培养基组合为:玉米粉0.200%、蛋白胨0.773%、牛肉膏0.132%、NaCl 0.320%、MgSO40.759×10-5mol/L。实验验证优化结果,所得发酵液酶活力为2965U/mg,比未优化前提高了64%。
- 冯学珍郑媛孙谧王跃军宋永相程江峰于建生
- 关键词：发酵培养基优化
- 抗菌性海藻酸钠涂膜在罗非鱼片保鲜中的应用被引量：23
- 2010年
- 采用测定涂膜抑菌性能、缓释效果来探讨抗菌性海藻酸钠涂膜的抑菌机理并将其应用在罗非鱼片的涂膜保鲜中。实验结果表明,抗菌膜是一种具有缓释效果的保鲜膜,对大肠杆菌Esche-richia coli、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、腐败希瓦氏菌Shewanella putrefaciens及鱼片表面其他杂菌均有较好的抑制效果,保鲜剂在40h内可从涂膜中完全释放;与未经涂膜处理的对照组相比,抗菌膜可以明显控制鱼片细菌总数的增长、维持较低的挥发性盐基氮值和改善鱼片的感官质量,综合考虑鲜度指标并本着以感官评分为基础的原则,抗菌涂膜处理可以将罗非鱼片的保鲜期延长约5.5d。
- 张杰王跃军刘均忠郑媛王伟孙谧
- 关键词：抗菌性缓释罗非鱼片保鲜
- 海洋侧孢短芽孢杆菌Lh-1抗菌活性物质的分离及特性研究被引量：28
- 2007年
- 采用超滤、DEAE-Sephadex A25和CM-Sepharose FF离子交换层析及HPLC反相层析等步骤得到了海洋侧孢短芽孢杆菌（Brevibacillus laterosporus）Lh-1的抗菌活性物质，命名为R-1。HPLC纯化出的抗菌物质经质谱测定其分子量为1608．023Da，BIO．RAD等电聚焦测得其pI为8．55，氨基酸分析表明该物质由Leu、Tyr、val、Ile、Lys、Gly、Met、Ser、Ala9种氨基酸组成。该抗菌物质具有极强的耐热、耐酸碱特性，在pH 11．0～12．0条件下，121℃处理1h，其活力保持在75％以上。经3种蛋白酶（碱性蛋白酶、胰酶、胃蛋白酶）处理后，活性保持在80％以上。茚三酮反应阳性。推测R-1可能是低分子量的脂肽。抑菌试验表明对食品腐败菌、致病性革兰氏阴性、阳性菌及少数真菌均有抑菌活性。
- 任召珍郑媛孙谧刘均忠王跃军郝建华
- 关键词：抗菌活性物质分离纯化
- 紫外诱变原生质体选育溶菌酶高产菌株的研究被引量：5
- 2009年
- 以1株产海洋溶菌酶活性较高的菌株(S-12-86)为原始菌株,对其原生质体的制备、再生及紫外诱变育种进行了研究。实验所确定的原生质体的最佳制备条件为:菌株S-12-86培养18h,溶菌酶浓度为1.0mg/ml,在35℃下,酶解30min,原生质体形成率为97.6%,再生率为23.6%。同时实验所确定的原生质体诱变的适宜条件为:30W紫外灯下80cm照射120s。对大量再生突变株进行筛选,最终获得了1株遗传性能稳定的菌株R-J-101,其产酶活力达到1808U/mg,比原始菌株(1290U/mg)提高了40%。
- 冯学珍郑媛王跃军孙谧于建生程江峰
- 关键词：芽孢杆菌诱变
