国家自然科学基金(81273980)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
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- 相关机构：武警总医院锦州医科大学更多>>
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- 二甲双胍对ALDH^+胃癌干细胞的抑制作用及其机制被引量：7
- 2018年
- 目的探讨二甲双胍(Met)对乙醛脱氢酶(ALDH)阳性胃癌干细胞的抑制作用及其可能机制。方法选择人胃癌细胞系MKN45作为亲本细胞,采用流式细胞仪分选出ALDH^+和ALDH~–细胞,进行自我更新能力、分化能力、裸鼠移植瘤实验,鉴定其是否为胃癌干细胞及是否具备肿瘤干细胞特性。实验设置1mmol/L Met组、5mmol/L Met组和MKN45细胞组,分别作用48h后,检测各组ALDH^+细胞的比例;RT-PCR实验检测各组Oct4、Sox2、AKT基因表达量的变化。结果细胞鉴定实验结果显示,ALDH^+细胞的自我更新能力、分化能力、致瘤能力均高于ALDH~–细胞,表明ALDH^+细胞具有肿瘤干细胞特性。实验结果显示,MKN45细胞组、1mmol/L Met组、5mmol/L Met组ALDH^+细胞比例分别为36.5%±5.4%、15.6%±1.9%和7.6%±1.6%,三组差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR结果显示,Met处理后Sox2和AKT基因的表达量均下降,且随Met浓度升高下降更为明显;Oct4基因在1mmol/L Met组的表达量高于MKN45细胞组,5mmol/L Met组的表达量低于MKN45细胞组。结论 Met能抑制ALDH^+胃癌干细胞生长,抑制AKT基因的表达,可作为临床治疗胃癌的靶点药物。
- 王一向勇平刘丹丹刘理金姜伟李锦毅
- 关键词：乙醛脱氢酶二甲双胍OCT4SOX2
- 索拉非尼与阿帕替尼对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用比较被引量：3
- 2017年
- 目的比较索拉非尼及阿帕替尼对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用。方法设置药物浓度6.25μg/ml、12.5μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml的索拉非尼(索拉非尼组)与阿帕替尼(阿帕替尼组)分别作用于SMMC-7721细胞。采用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]比色法检测索拉非尼、阿帕替尼对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用,细胞划痕实验比较两种药物对SMMC-7721细胞迁移的影响,酶联免疫吸附测定法(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测两种药物作用细胞后,其上清液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白介素6(interleukin-6,IL-6)的浓度。结果 (1)随着给药浓度的增加,索拉非尼、阿帕替尼对细胞增殖的抑制作用增强;且同一药物浓度下,索拉非尼组生长抑制率均高于阿帕替尼组,差异有统计学意义(P<0.001)。(2)索拉非尼组、阿帕替尼组和对照组细胞迁徙面积比率分别为(0.26±0.012)%、(0.46±0.011)%和(0.66±0.023)%,三组迁徙面积比率差异有统计学意义(F=746.020,P<0.001),进一步两两比较显示,索拉非尼组的迁徙面积小于阿帕替尼组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)药物作用后细胞上清液中VEGF、TNF-α、IL-6浓度,索拉非尼组均低于阿帕替尼组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论索拉非尼、阿帕替尼都对SMMC-7721细胞的增殖、迁移、细胞因子均有抑制作用,且索拉非尼作用强于阿帕替尼。
- 王一李锦毅
- 关键词：索拉非尼SMMC-7721血管内皮生长因子肿瘤坏死因子Α
- 胃癌细胞表面ALDH1表达及ALDH1^+细胞的“干性”鉴定被引量：2
- 2018年
- 目的检测胃癌细胞系的乙醛脱氢酶1(ALDH1)表达,鉴定ALDH1^+细胞生物学特性。方法采用Aldefluor实验方法,通过流式细胞仪检测胃癌细胞系MGC-803、BGC-823及MKN-45中ALDH1的活性表达;选取MGC-803细胞系,分选出ALDH1^+和ALDH1^-细胞,进行分化潜能、平板克隆、耐药性、干性相关基因检测及裸鼠成瘤实验。结果MGC-803、BGC-823及MKN-45中ALDH1的表达比例为(13.00±1.34)%、(5.80±2.15)%及(36.5±5.4)%;分选出ALDH1^+、ALDH1^-细胞组,含血清培养1周后,ALDH1^+的表达比例为21.2%和3.9%,ALDH1^+细胞具有不对称分裂能力;ALDH1^+细胞组克隆形成率为(42.63±0.63)%,高于ALDH1^-细胞组(18.5±2.04)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);相同氟尿嘧啶浓度下,ALDH1^+组生长抑制率均低于ALDH1^-组,差异有统计学意义(P<0.05);接种5×10~3个ALDH1^+及ALDH1^-细胞于小鼠皮下成瘤,与ALDH1^-细胞比较,ALDH1^+细胞成瘤率高。两组肿瘤体积比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌细胞系普遍存在ALDH1的活性表达,ALDH1^+细胞具有干细胞生物学特性,可能提供胃癌新的诊断和治疗途径。
- 王一刘丹丹向勇平刘理金姜伟李锦毅
- 关键词：胃癌细胞系ALDH1
