上海市青年科技启明星计划(10QH1400400)
- 作品数：2 被引量：14H指数：1
- 相关作者：莫晓芬蒋旭花荣先芳缪华茂王振宇更多>>
- 相关机构：复旦大学复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：上海市青年科技启明星计划国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 银杏内酯B通过抑制视网膜神经节细胞凋亡促进其轴突生长被引量：14
- 2012年
- 青光眼、视神经炎等疾病的一个共同病理特征是视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的持续、不可逆性凋亡。银杏内酯B对脑组织神经元有很好的保护作用,并对神经元突起的生长和突触形成起重要作用。本文旨在观察银杏叶提取物(EGB761)和银杏内酯B对RGCs轴突生长的影响。采用三维立体培养系统进行视网膜植片培养,观察RCGs轴突数目和长度的变化,并对生长出的轴突进行免疫荧光染色鉴定,培养的视网膜植片用TUNEL法检测RGCs的凋亡,并进行免疫染色观察Caspase-3激活的情况。结果显示,与阴性对照组相比,EGB761或银杏内酯B处理的视网膜植片中轴突数量和长度明显增加。免疫荧光染色证实生长出的突起为RGCs轴突。相对阴性对照组,银杏内酯B处理的RGCs凋亡减少,Caspase-3的激活也被抑制。以上结果提示,银杏内酯B能够促进RGCs轴突的生长,主要机制是抑制RGCs凋亡。
- 王振宇莫晓芬蒋旭花荣先芳缪华茂
- 关键词：银杏叶提取物银杏内酯B视网膜神经节细胞神经保护轴突生长
- 在体电穿孔辅助基因转染视网膜色素上皮细胞层和光感受器细胞层的实验研究
- 2010年
- 目的探讨在体电穿孔辅助基因转染视网膜色素上皮（RPE）细胞层和光感受器（PR）细胞层的可行性。方法147只健康雄性Spragne—Dawley（SD）大鼠根据电穿孑L刺激模式电压值分为5、10、15、20、25、30、35V组，右眼视网膜下腔注射增强型绿色荧光蛋白（EGFP）真核表达质粒pEGFP—N1为实验眼，左眼注射TE Buffer为对照眼。各组根据不同转染方向再分为RPE和PR两个亚组。各组除电压不同外，其余参数均为脉宽99ms，脉冲间期0．5s，连续5个脉冲。将带有负电荷的质粒在电场作用下，拟转染到RPE细胞层，反向置电极，拟转染到PR细胞层。转染后7d取各组视网膜铺片，荧光显微镜下观察EGFP表达强弱、范围及荧光细胞计数分析；采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）、实时逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）半定量观察EGFP蛋白和mRNA的表达。结果转染后7d，荧光显微镜观察发现，各组RPE亚组对照眼RPE细胞层内均未见特异性荧光表达，实验眼可见绿色荧光表达；各组RPE亚组对照眼视网膜铺片均未见荧光表达，实验眼视网膜铺片均可见转染了EGFP的RPE细胞。Western blot检测显示，随电压增加，EGFP蛋白与β-肌动蛋白条带灰度相对比值呈上升趋势。RTPCR检测显示，各组均产生阳性扩增条带，随电压增高，EGFP mRNA与GADPH mRNA扩增条带灰度相对比值逐渐增高。结论在体电穿孔方法可以有效辅助基因转染大鼠RPE细胞层。
- 张萌莫晓芬郭文毅吴继红方媛张圣海李希
- 关键词：色素上皮视网膜炎电穿孔光感受器
