国家自然科学基金(31371144)
- 作品数：10 被引量：15H指数：2
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- 相关机构：广东药科大学广东药学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 外泌体的功能浅析被引量：3
- 2016年
- 外泌体是一种由多种细胞分泌,直径在40~100 nm左右的微小囊泡,其间包含了丰富的蛋白质,m i R N A以及R N A片段,能够参与细胞之间的物质转导和信号交流。本文将从外泌体的形成、分泌、构成,以及与肿瘤,心血管疾病,神经系统疾病的关系等方面进行综述。
- 王鑫伟毛建文
- 关键词：外泌体肿瘤心血管系统神经系统
- ClC-3基因敲除小鼠的构建及鉴定
- 2017年
- 目的构建并鉴定ClC-3基因敲除小鼠,为研究ClC-3氯通道蛋白的生物学功能提供动物模型。方法将从2015年9月—2016年9月选取的6只赛业生物科技有限公司(广州)构建的ClC-3flox/+小鼠与2只Jackson实验室引进的Ubc-Cre小鼠进行杂交繁殖,得到基因型为ClC-3flox/flox-Cre+及ClC-3flox/+-Cre+的小鼠。取鼠尾DNA,通过PCR法鉴定子代小鼠的基因型。结果子代小鼠基因组DNA结果显示在357 bp与100 bp处均有条带,符合预期结果。结论该研究基于Cre/Loxp系统,利用loxp转基因的ClC-3flox/+小鼠和在全身表达Cre重组酶的Ubc-Cre小鼠,成功构建并鉴定了ClC-3基因敲除小鼠。
- 余杰毛建文徐彬
- 关键词：CLC-3基因敲除CRE/LOXP系统
- CLCN3/MMTV-PyMT转基因小鼠杂交群体的建立及鉴定
- 2014年
- 目的建立并鉴定CLCN3/MMTV-Py MT双转基因小鼠杂交群体,构建氯通道Cl C-3过表达的自发乳腺肿瘤转基因小鼠模型。方法将CLCN3转基因小鼠和MMTV-Py MT转基因小鼠分别进行繁殖,选取阳性子代鼠进行配对,培育杂交后代,然后通过PCR鉴定基因型、通过组织免疫荧光方法、Western blot检测转基因小鼠蛋白表达情况。结果成功繁育CLCN3转基因小鼠和MMTV-Py MT转基因小鼠,经PCR鉴定成功构建CLCN3/MMTV-Py MT双转基因鼠杂交群体,并成功保种和扩群,经组织免疫荧光和Western-blot分析双转基因小鼠的Cl C-3蛋白的表达高于MMTV-Py MT转基因小鼠。结论成功构建Cl C-3过表达的自发乳腺肿瘤转基因小鼠模型,为进一步研究Cl C-3在肿瘤生长和转移中的功能提供了良好的动物模型。
- 邓璐璐李琴吴慧毛建文徐彬
- 关键词：MT转基因小鼠
- 一种简易的细胞烟草烟雾暴露装置的构建
- 2018年
- 目的设计一种简易的细胞烟草烟雾暴露装置,并用其检测烟草烟雾暴露对人支气管上皮(HBE)细胞自噬的影响。方法2017年3月份起在广东药科大学广东省生物活性药物研究重点实验室利用transwell小室和六孔板构建烟草烟雾暴露装置;利用该装置对HBE细胞进行烟草烟雾处理;细胞免疫荧光和蛋白质免疫印迹法检测自噬蛋白LC3B的表达。结果成功制作简易装置用于细胞烟草烟雾暴露。利用该装置将HBE细胞烟草烟雾暴露后出现明显的细胞自噬。结论制作的细胞烟草烟雾暴露装置能用于细胞烟草烟雾暴露的研究,该装置具有制作简易、价格低廉等优点。
- 李梦鸽毛建文
- 关键词：吸烟细胞自噬
- 囊性纤维化跨膜调节因子与非囊性纤维化肺部疾病关系的研究进展被引量：1
- 2017年
- 囊性纤维化跨膜调节因子(cystic fibrosis transmembrane regulatory factor,CFTR)是一种跨膜蛋白质,也是一种重要的离子通道。囊性纤维化(cystic fibrosis,CF)是一种具有家族常染色体隐性遗传的先天性疾病,CFTR基因突变使其编码的CFTR蛋白功能缺陷从而导致囊性纤维化的发生。CFTR与非囊性纤维化肺部疾病如肺水肿、急性呼吸窘迫综合征和气道上皮损伤等的发生发展密切相关。
- 李梦鸽(综述)毛建文
- 关键词：离子通道H5N1HIV
- 试剂盒法与差速超速离心法所提血清外泌体的形态学比较被引量：8
- 2016年
- 目的：比较常用的外泌体提取方法，获得可靠有效的血清外泌体提取方法。方法：电镜下观察鉴定差速超速离心法、试剂盒法及组合优化方法所提外泌体的形态；蛋白印迹法检测外泌体标志蛋白CD63的表达。结果：差速超速离心法提取的外泌体呈茶托样双层膜结构，直径100nm左右；试剂盒法提取的外泌体颗粒多，大小50～200nm之间，无明显的立体结构，经差速超速离心法纯化后形态与差速超速离心法类似，经试剂盒法纯化后与仅使用一次试剂盒提取的外泌体无明显形态差异；四种方法所提外泌体表达标志蛋白CD63。结论：差速超速离心法是更为可靠且有效的外泌体提取方法。
- 王鑫伟毛建文
- 关键词：外泌体血清
- 一种不溶血红细胞免疫荧光细胞化学检测方法的建立
- 2013年
- 目的以氯通道蛋白ClC-3为靶蛋白,建立一种不溶血的红细胞免疫荧光细胞化学检测方法。方法采集大鼠红细胞,涂片,0.5%丙烯醛/PBS固定,以不同浓度的Triton X-100/PBS(含0.1 mol/L甘氨酸)溶液透膜,用含0.05 mmol/L甘氨酸、2%BSA、0.05%NaN3的PBS溶液封闭抗原,随后孵育ClC-3的一抗和荧光标记的二抗,最后在共聚焦荧光显微镜下观察结果。结果 0.1%Triton X-100/PBS结合其他优化液处理的红细胞未出现溶血现象,共聚焦显微镜下清晰地观察到目的蛋白及其亚细胞分布情况。结论通过优化固定液、透膜液、封闭液和洗涤液,解决了常规免疫细胞化学法导致红细胞易溶血的缺点,在确保红细胞不溶血的同时成功检测到红细胞氯通道ClC-3蛋白,即成功建立了一种不溶血的红细胞免疫荧光细胞化学检测方法。
- 李琴杨清松徐彬毛建文
- 关键词：红细胞免疫荧光技术溶血
- ClC-3高表达对MMTV-PyMT转基因鼠乳腺肿瘤生长的影响
- 2015年
- 目的:探讨Cl C-3高表达对MMTV-Py MT转基因鼠乳腺肿瘤生长的影响。方法:通过MMTVPy MT转基因鼠与CLCN3转基因鼠交配,构建MMTV-Py MT/CLCN3双转基因鼠,用DNA电泳和免疫组织化学的方法确定MMTV-Py MT转基因鼠及MMTV-Py MT/CLCN3双转基因鼠,观察和测量两种转基因鼠不同周数的自发乳腺肿瘤数目及体积。结果:成功构建MMTV-Py MT/CLCN3转基因鼠。每周对两种转基因鼠进行肿瘤观察及测量,结果显示MMTV-Py MT/CLCN3双转基因鼠比MMTV-Py MT转基因鼠的肿瘤生长快。结论:Cl C-3高表达能促进MMTV-Py MT鼠自发性乳腺肿瘤的生长。
- 吴慧李琴邓璐璐毛建文徐彬李红枝
- 关键词：CLC肿瘤生长转基因鼠
