国家科技重大专项(2008ZX09101-021)
- 作品数：24 被引量：176H指数：9
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- 基于耐缺氧能力的注射用复方荭草冻干粉生物活性测定方法被引量：4
- 2012年
- 目的:建立可用于注射用复方荭草冻干粉针生物活性质量控制测定的方法。方法:将小鼠随机分为正常对照组、盐酸异丙肾上腺素组、盐酸川芎嗪组及注射用复方荭草冻干粉针高、中、低剂量组,每组10只。除对照组外,其余各组小鼠均皮下注射盐酸异丙肾上腺素建立心肌缺氧模型,再分别给予盐酸川芎嗪和不同剂量的注射用复方荭草冻干粉针,测定小鼠的存活时间。并对10批注射用复方荭草冻干粉针生物活性进行测定。结果:与盐酸异丙肾上腺素组比较,注射用复方荭草冻干粉针连续给药3 d,可明显延长缺氧小鼠的存活时间,且10批注射用复方荭草冻干粉针样品均显示出较好的生物活性。结论:小鼠耐缺氧测定法准确、可靠,可通过小鼠耐缺氧测定法有效控制注射用复方荭草冻干粉针的质量。
- 董永喜李美珍董莉黄勇李勇军兰燕宇
- 关键词：荭草缺氧小鼠
- 荭草DNA提取方法实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的利用不同方法对荭草DNA提取,比较提取质量的差异,为研究药材的遗传多样性、种类鉴定和基因指纹图谱的构建等提供优质基础。方法采用改进的CTAB法和SDS法提取荭草叶片基因组DNA,利用琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法测定样品OD260/OD280的比值,检测所提DNA的纯度和质量。结果采用CTAB法提取的荭草基因组DNA样品的纯度和浓度均高于SDS法,其DNA的OD260/OD280值为1.801～1.993,CTAB法所提的DNA泳带分布较集中,无拖尾现象,其DNA浓度能够满足RAPD、SSR/ISSR扩增模板的需求。结论改良CTAB法是提取荭草基因组DNA的最佳方法。
- 常楚瑞王永林王爱民郑林王文婷
- 关键词：荭草DNA提取CTAB法SDS法
- 平衡透析法研究荭草及其制剂的人血浆蛋白结合率被引量：10
- 2012年
- 目的:比较荭草提取物及其复方制剂中两类成分的人血浆蛋白结合率。方法:以超高效液相色谱—质谱联用为检测手段,结合平衡透析法考察单味荭草提取物及注射用复方荭草在人血浆中的蛋白结合率并计算相关参数。结果:在所研究浓度范围内,原儿茶酸与血浆蛋白具有中等强度结合,异荭草素与血浆蛋白结合力较强。经统计分析,两者与血浆蛋白的结合能力在考察浓度范围无显著差异;其中异荭草素指标在复方中的血浆蛋白结合率有所升高,复方中其他的血浆蛋白结合动力学参数相对单味荭草也有一定变化。结论:荭草中化学成分的血浆蛋白结合无浓度依赖性,而在组成复方后某些成分的结合率可能发生改变。
- 黄勇陈慧何峰张治蓉王永林
- 关键词：血浆蛋白结合率平衡透析法液质联用
- UPLC-MS/MS研究注射用复方荭草中原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷的大鼠组织分布被引量：3
- 2011年
- 目的:建立同时测定大鼠静脉注射复方荭草后组织器官中原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷含量的UPLC-MS/MS分析方法,研究3种指标成分在大鼠体内的分布特征。方法:采用Acquity UPLC系统,BEH C18柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm,美国Waters公司),流动相为乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速为0.35 mL.min-1。采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测(MRM);组织样本采用机械匀浆、甲醇沉淀处理供测定。结果:3种成分的线性关系良好(r>0.99),准确度、日内和日间精密度、提取回收率均符合生物样品的分析要求。大鼠注射复方荭草后原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷主要分布在肾、肺、心等器官中,在脑中分布最少。结论:指标成分分布研究表明,大鼠静脉给予注射用复方荭草后,体内分布具有不均衡的特征,血流充沛组织的分布相对较多;药物在体内各组织器官消除迅速,无蓄积情况;建立的方法可特异、灵敏、快速地同时测定大鼠组织中的原儿茶酸、异荭草素和野黄芩苷。
- 黄勇张治蓉郑林何峰陈慧王永林
- 关键词：原儿茶酸异荭草素野黄芩苷UPLC-MS/MS
- 过氧化氢对原代心肌细胞及H9c2细胞的损伤作用被引量：8
- 2012年
- 目的:考察过氧化氢对H9c2心肌细胞及原代心肌细胞损伤作用的相似性。方法:选用H9c2心肌细胞与新生大鼠原代心肌细胞,应用MTT法测定不同浓度过氧化氢对H9c2心肌细胞及原代心肌细胞活性的影响,观察两株细胞对过氧化氢损伤的敏感性。结果:600～1 600μmol/L的过氧化氢对H9c2心肌细胞及原代心肌细胞所造成的氧化损伤均具有浓度依赖性,1 200μmol/L的过氧化氢使H9c2心肌细胞的存活率降低40%～60%(P<0.01),表现出与原代心肌细胞相似的H2O2损伤敏感性(P>0.05)。结论:H9c2心肌细胞与原代心肌细胞对过氧化氢氧化损伤具有相似的作用和浓度依赖性。
- 李月婷刘影王静娴李靖肖婷婷王爱民廖尚高王永林
- 关键词：过氧化氢H9C2细胞
- UPLC-PDA法同时测定灯盏细辛中飞蓬苷、绿原酸和野黄芩苷的含量被引量：4
- 2010年
- 目的:建立同时测定灯盏细辛中飞蓬苷、绿原酸和野黄芩苷含量的方法。方法:采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA),BEHC18色谱柱(2.1mm×150mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱(0min,2%A;3min,5%A;4min,13%A;6min,15%A;7min,18%A;9min,19%A;9.1min,80%A;10min,80%A;),流速为0.35mL/min,柱温40℃,检测波长:260nm(检测飞蓬苷),326nm(检测绿原酸)和335nm(检测野黄芩苷)。结果:飞蓬苷、绿原酸和野黄芩苷浓度分别在28.32～453.12μg/mL(r=0.9999),12.50～200μg/mL(r=0.9996),25.08～401.20μg/mL(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为101.43%(RSD=1.72%),97.49%(RSD=1.61%),99.38%(RSD=2.04%)。结论:本方法快速、准确,重复性好,可较全面地评价灯盏细辛药材的质量。
- 郑林王永林王爱民乔希官志忠兰燕宇
- 关键词：灯盏细辛绿原酸野黄芩苷
- 荭草化学成分研究Ⅱ被引量：16
- 2011年
- 目的:研究荭草Polygonum orientale有效部位的化学成分。方法:应用色谱技术分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果:分离并鉴定了7个化合物,分别为商陆素-3-O-β-D-半乳糖苷(ombuine-3-O-β-D-galactopyrano-side,1),商陆素-3-O-芸香糖苷(ombuine-3-O-rutinoside,2),色氨酸(tryptophan,3),槲皮素-3-甲醚(quercetin-3-O-methyl ether,4),山柰酚-3-O-(2″-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖醛酸苷[kaempferol-3-O-(2″-O-α-L-rhamnopyranosyl)-β-D-glucuronopyranoside,5],槲皮素-3-O-(2″-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖醛酸苷[quercetin-3-O-(2″-O-α-L-rhamnopyranosyl)-β-D-glucuronopyranoside,6],槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(quercetin-3-O-β-D-glucuronide,7)。结论:化合物4～7为首次从该种植物中分离得到,化合物1～3为首次从该属植物中分离得到,并首次归属化合物1的1H和13C-NMR谱信号。
- 李勇军李翠兵何迅廖尚高兰燕宇王爱民王永林
- 关键词：蓼科荭草化学成分
- UPLC-MS/MS法同时测定家兔血浆中6个黄酮类成分及其药代动力学研究被引量：7
- 2012年
- 目的:建立UPLC-MS/MS同时测定家兔血浆中注射用复方荭草冻干粉针的6个黄酮类化合物(异荭草素,荭草素,牡荆素,灯盏乙素,木犀草苷,槲皮苷)的分析方法,并计算其在家兔体内的药动学参数。方法:血浆样品酸化后以甲醇沉淀蛋白;色谱采用Waters BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,质谱采用多反应监测(MRM)进行正离子检测,样品分析时间为3.5 min。结果:6个黄酮类成分在家兔血浆中呈良好线性关系,提取回收率在79.4%～105.9%之间,日内、日间精密度和准确度良好,各检测成分的方法回收率分别为异荭草素96.8%～110.1%,荭草素85.8%～98.8%,牡荆素86.0%～110.6%,灯盏乙素86.7%～102.5%,木犀草苷84.1%～93.8%,槲皮苷96.5%～112.2%。6个黄酮类成分在家兔体内的平均滞留时间均较短,在16 min以内。结论:该方法特异、快速、灵敏,可用于注射用复方荭草冻干粉针的药代动力学研究。
- 黄勇何峰郑林张治蓉兰燕宇王永林
- 关键词：异荭草素荭草素牡荆素灯盏乙素槲皮苷
- 超高效液相色谱-串联质谱法研究荭草提取物中4个黄酮类成分的大鼠组织分布被引量：5
- 2012年
- 目的:建立同时测定大鼠静脉注射荭草提取物后组织器官中荭草素、牡荆素、木犀草苷和槲皮苷含量的UPLC-MS/MS方法,研究荭草提取物在大鼠体内心、肝、脾、肺、肾等9个组织器官的分布特征。方法:色谱柱为BEH C18柱(2.1 mm×50mm,1.7μm),流动相:0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速0.35 mL.min-1。组织样品机械匀浆后甲醇沉淀供测定。结果:在线性范围内4个成分的线性关系良好,准确度、日内和日间精密度、提取回收率均符合生物样品的分析要求。大鼠静脉注射荭草提取物后的组织分布试验结果表明:4个成分在肾脏等9种组织器官中均能检测到。4个成分主要分布在肾、肺等组织中,在脑中分布最少。结论:本文方法可用于荭草花提取物在大鼠体内的组织分布研究。
- 黄勇张治蓉郑林何峰石凌云兰燕宇
- 关键词：MS荭草素牡荆素木犀草苷槲皮苷
- 平衡透析法、超滤法结合液质联用技术比较测定注射用复方荭草中黄酮类成分的血浆蛋白结合率被引量：11
- 2012年
- 目的:测定注射用复方荭草中黄酮类成分的人血浆蛋白结合率,为临床安全用药及血浆蛋白测试方法研究提供依据。方法:以超高效液相色谱-质谱联用为检测手段,采用平衡透析法、超滤法考察荭草素、牡荆素、木犀草苷、槲皮苷等黄酮类成分与血浆蛋白的结合情况,并比较二者的差异。结果:注射用复方荭草在人血浆中质量浓度为5～100 mg.L-1时,荭草素、牡荆素、木犀草苷、槲皮苷等黄酮的结合率较强且无浓度依赖性,两种测定方法牡荆素和木犀草苷存在统计学差异(P<0.01)。结论:建立的平衡透析法、超滤法均能够满足血浆蛋白结合率测定的要求,两种方法所测定的部分指标存在差异。
- 黄勇牟景丽陈慧郑林何峰张治蓉王永林
- 关键词：血浆蛋白结合率超滤法平衡透析法液质联用
