国家自然科学基金(31371174)
- 作品数：17 被引量：47H指数：5
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- 黏蛋白在良、恶性子宫颈病变中的表达及其临床意义被引量：6
- 2015年
- 采用免疫组织化学技术检测黏蛋白(MUC)1、MUC2、MUC4、MUC5AC和MUC20在158例良、恶性宫颈病变中的表达,并探讨其临床意义。结果表明:1正常宫颈上皮高表达MUC1、MUC4和MUC5AC,部分表达MUC20,正常和良性宫颈组织不表达MUC2。2从慢性宫颈炎→宫颈上皮内瘤变→宫颈鳞癌,MUC1、MUC4和MUC20表达差异显著(P<0.05)。与正常宫颈相比,宫颈腺癌中MUC2表达增加(P<0.05),且MUC1和MUC5AC表达减少(P<0.05)。3在宫颈鳞癌中,MUC1的表达与癌组织的浸润深度和临床分期有关(P<0.05);MUC4和MUC20的表达与其分化程度和临床分期有关(MUC4,P<0.05;MUC20,P<0.01)。4 MUC1、MUC4和MUC20三者呈显著相关(P<0.05)。黏蛋白可能参与宫颈癌的发生发展,其在宫颈良性病变和宫颈癌的表达不同,有利于宫颈不同组织类型的鉴别诊断和预后判断。
- 丁丽娟贺莉娜郑英孔祥
- 关键词：黏蛋白宫颈上皮内瘤变宫颈鳞癌宫颈腺癌
- 雄性小鼠联会复合体的研究进展被引量：1
- 2016年
- 联会复合体（synaptonemal complex，SC）是同源染色体之间具有三级结构的阶梯状聚合亚蛋白复合体，大部分由减数分裂特异性蛋白组成，联会复合体的装配开始于第一次减数分裂前期早期。
- 申雪沂牛长敏郭佳倩马海涛夏静郑英
- 关键词：联会复合体减数分裂精子发生
- miRNA--194--5p通过Stra8调控精子发生细胞凋亡及自噬的机制研究及睾丸特异性蛋白Tex33在精子发生中的作用研究
- 本文主要从以下几方面进行论述： 第1章 miR-194-5p通过Stra8调控精子发生细胞凋亡及自噬的机制研究 目的: 本研究旨在探索miR-194-5p通过Stra8调控精子发生细胞凋亡与自噬的分子机制。 方法...
- 夏蒙蒙
- 关键词：精子发生细胞凋亡细胞自噬
- 慢病毒介导的miR194-5p过表达精原细胞株的建立被引量：1
- 2018年
- 目的构建miR194-5p慢病毒表达载体pMSCV-PIG-miR194-5p,应用包装后产生的慢病毒感染Stra8-GC1-spg细胞,获得稳定过表达miR194-5p精原细胞株。方法用PCR法扩增miR194-5p的前体序列pri-miR194-5p。利用分子克隆技术构建慢病毒表达载体pMSCV-PIG-miR194-5p。将其与Gag pol和VSV.G辅助质粒一起用PEI法共转染至293T包装细胞内,收集慢病毒上清,后将其感染Stra8-GC1-spg细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定过表达miR194-5p的精原细胞株。结果构建了慢病毒重组质粒pMSCV-PIG-miR194-5p。经酶切鉴定及DNA测序法证实序列准确无误。经包装产生的慢病毒能成功感染Stra8-GC1-spg细胞,并稳定过表达miR194-5p。结论成功地构建了慢病毒表达重组质粒pMSCV-PIG-miR194-5p,经包装后产生预计的慢病毒,建立了稳定过表达miR194-5p的精原细胞株。
- 夏静夏蒙蒙牛长敏申雪沂王建军郑英
- 关键词：微RNAS精原细胞细胞系
- mTOR信号通路在生精细胞发育中的作用
- 2016年
- 精子发生是指精原细胞经过一系列分裂分化演变为精子的过程,包括精原干细胞的增殖及其子细胞分化、精母细胞的减数分裂和精子形成三个阶段。许多研究表明mTOR信号通路参与精子发生的各个阶段。本文主要就mTOR信号通路在生精细胞发育的不同阶段中的作用做一综述。
- 夏静牛长敏马海涛申雪沂王建军郑英
- 关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白生精细胞信号通路精子发生
- MUC4、MUC16在卵巢上皮癌细胞系SKOV-3、OVCAR-3、CAOV-3和组织中的表达及临床意义被引量：2
- 2014年
- 目的 :研究MUC4、MUC16在卵巢上皮癌细胞系SKOV-3、OVAR-3、CAOV-3和卵巢上皮癌组织的表达及与临床病理特征关系。方法:1培养卵巢癌SKOV-3、OVAR-3、CAOV-3细胞系,行免疫细胞化学SABC法和Western blot观察MUC4、MUC16蛋白表达;2对临床卵巢癌组织采用免疫组织化学SP两步法检测正常卵巢组织和肿瘤组织中MUC4、MUC16表达与临床病理特征关系。结果:1经免疫细胞化学和Western blot研究发现MUC4在人卵巢癌SKOV-3和OVCAR-3细胞中不表达,而在CAOV-3细胞中有表达;MUC16在人卵巢癌OVCAR-3细胞中表达量最高,其次是CAOV-3细胞,在SKOV-3细胞表达量最低;2在正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤中,MUC4和MUC16表达量均较低。但在卵巢交界性肿瘤和卵巢癌中,MUC4和MUC16表达非常明显;3 MUC4在卵巢浆液性和黏液性上皮癌中表达无差异(86.36%vs 75.00%),而MUC16在浆液性卵巢癌中阳性表达率(81.81%)明显高于黏液性卵巢癌(25.00%)(P<0.05)。MUC4在早期卵巢癌表达偏高,达91.67%,而MUC16在晚期卵巢癌表达(85.70%)明显高于早期(50.00%)。结论:不同卵巢癌细胞MUC4和MUC16表达不同;联合MUC4和MUC16的检测有助于卵巢癌的病理分型、临床诊断及预后的判断。
- 孔祥陆荣钱静郑英王志学
- 关键词：细胞系
- 小鼠Setd8截短片段真核表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的构建小鼠Setd8第1-214aa的截短片段p CMV-HA-Setd8NO.214真核表达载体,并在293T细胞中验证其表达。方法利用PCR方法扩增出Setd8的截短片段Setd8NO.214基因片段,通过酶切将其定向插入到p CMV-HA载体中,构建真核表达质粒p CMV-HA-Setd8NO.214,通过限制性内切酶酶切和DNA测序鉴定正确后,应用脂质体转染法转染入293T细胞中,应用Western blot鉴定蛋白的表达。结果酶切电泳及测序结果证明,构建的真核表达质粒p CMAHA-Setd8NO.214序列正确无误,Western blot法证明了Setd8NO.214蛋白能够高效表达。结论成功构建了p CMV-HASetd8NO.214真核表达载体,并证明了其在真核细胞293T中的表达,为进一步研究Setd8在真核细胞中的功能提供了前提基础。
- 郭佳倩牛长敏马海涛马仕昆郑英
- 关键词：真核表达
- 小鼠精子顶体形成相关基因研究进展被引量：4
- 2016年
- 精子变形是一个复杂的细胞分化和形态学变化过程,顶体形成是其中的一个步骤。顶体是精子头部的重要组成部分,其形成过程包含4个阶段:高尔基体阶段、顶帽阶段、顶体和成熟阶段,其每一步都受多种基因调控。高尔基体阶段的调控基因有GOPC、Hrb、SPATA16、PICK1、CK2α'等,顶帽阶段的调控基因有Fads2、syntaxin 2、Kdm3a及UBR7等;顶体及成熟阶段的调控基因有KIFC1、Rnf19a及DPY19L2等。这些基因的异常会影响核致密层以及顶体锚定体盘与核膜之间的连接,囊泡的融合及运输,最终影响男性的生育能力。本文着重对顶体形成各阶段相关基因的研究进展进行了综述。
- 牛长敏郭佳倩马海涛郑哲郑英
- 关键词：基因小鼠
- 兔抗小鼠含SET结构域(赖氨酸甲基转移酶)8(Setd8)多克隆抗体制备和应用被引量：8
- 2017年
- 目的在大肠杆菌表达小鼠含SET结构域(赖氨酸甲基转移酶)8(Setd8)蛋白并制备兔抗Setd8多克隆抗体。方法将p GADT7-Setd8质粒和p ET-30a载体分别双酶切后连接、转化和鉴定,构建p ET-30a-Setd8原核表达质粒。将p ET-30a-Setd8质粒转化到E.coli BL21中,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,通过镍亲和层析柱进行蛋白纯化。应用纯化的Setd8蛋白免疫新西兰大白兔,获得Setd8多克隆抗体。利用ELISA、Western blot法及免疫组织化学染色法对所得多克隆抗体进行效价测定及特异性鉴定。结果应用限制性内切酶双酶切后电泳及序列测定法,成功构建的p ET-30a-Setd8重组质粒在大肠杆菌中IPTG诱导下能够高效表达重组Setd8蛋白。免疫获得的多克隆抗体经ELISA检测其抗体效价为1∶1 000 000,Western blot法结果显示制备的多克隆抗体能特异性识别细胞和组织中的Setd8蛋白,免疫组织化学染色法显示多克隆抗体识别的Setd8主要表达于成年小鼠睾丸组织中的精原细胞。结论成功获得较高纯度Setd8蛋白,制备的Setd8多克隆抗体具有较高反应性和特异性。
- 马海涛郭佳倩夏静牛长敏申雪沂孙红亚郑英
- 关键词：多克隆抗体
- 生精细胞发育相关lncRNA的研究进展被引量：2
- 2016年
- 精子发生包括精原细胞的增殖分化、精母细胞减数分裂及圆形精子细胞形态学改变。每一个过程都受到各种转录因子、基因或信号通路的高度调控。近年来，由于深度测序技术的进步，使我们对转录复杂性的认识从以mRNA为中心跳跃到一个高度保守的非翻译转录组——非编码RNA（ncRNA）。
- 夏静郑英
- 关键词：生精上皮精子发生
