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人肠道病毒71型动物模型的研究进展被引量：2: 2013年; 人肠道病毒71型（EV71）是引起手足口病（HFMD）的主要病原体之一，自1974年Schmidt等发现，主要引起5岁以下儿童手足口部疱疹，少数病例出现伴有中枢神经系统损伤的严重并发症，甚至死亡。目前临床尚无预防和治疗该病毒感染的有效疫苗和药物，有关EV71发病机制，病毒与宿主之间的关系及病毒不同基因型别间的关系等问题尚不明确。供进一步研究的合适的动物模型可以为解决以上问题奠定基础。本文现就近年来国内外开展的不同类型动物模型的研究进行综述。; 崔晓青温红玲王志玉; 关键词：人肠道病毒71型手足口病动物模型

肠道病毒71型山东临沂分离株3D区遗传进化分析被引量：4: 2012年; 目的构建肠道病毒71型(EV71)山东临沂分离株3D区的系统进化树,进行遗传进化分析,探讨3D区与神经毒力的关系。方法于2009—2010年在山东省临沂市人民医院采集手足口病(HFMD)患儿的粪便标本和咽拭子标本107份,进行EV71的分离;用Bioedit和MEGA 4对EV71山东临沂分离株SDLY1、SDLY11、SDLY48、SDLY96、SDLY107的3D区进行序列分析,参比序列选自GenBank。结果 3D区的系统发生树分析结果显示,5株临沂分离株在发生树上比较集中,SDLY11、96、107的3D区同源性最高,与CoxA16原型株G-10的系统发生关系较近,与EV71原型株BrCr/70的系统发生关系较远;3D区碱基构成比和氨基酸构成比分析显示,含量最高的碱基为A(29%),含量最高的氨基酸为亮氨酸(>10%);基因序列比对和氨基酸序列比对分析结果显示,碱基突变较多,但大多为静默突变,临沂分离株与CoxA16 G-10之间的氨基酸突变中有很大一部分是赖氨酸与精氨酸之间的突变,在SDLY107的3D区发现了3个特有的氨基酸突变:N37S、K142R、G261E。结论 EV71山东临沂分离株3D区的进化可能与CoxA16 G-10有关,突变N37S、K142R、G261E可能与EV71的神经毒力有关。; 温红玲郝树彬高峰赵丽袁晓晶司鲁莹王东旭王志玉; 关键词：遗传进化分析

BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞体外转化试验条件的优化研究被引量：5: 2011年; 为了探索BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞转化试验的最佳培养条件,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法,对脾细胞浓度和刀豆蛋白A(ConA)的浓度两个参数进行研究。结果表明,在本次实验条件下,采用5×105个/ml细胞、2.5μg/ml的ConA可获得最大的吸光度(A)值,两个因素间存在明显的交互效应。; 郝树彬温红玲尹玉霞侯丽; 关键词：MTT法 BALB/C鼠

肠道病毒71型实验室诊断研究进展被引量：2: 2012年; 人肠道病毒71型（human enterovirus71，EV71）属于小RNA病毒科，基因组为单股正链RNA，最早是于1969—1970年问在美国加利福尼亚州发生中枢神经系统症状的婴儿粪便中分离得到，之后世界上许多国家相继报道了Ev71感染的流行，HFMD与Ev71感染的关系也受到了广泛的重视。; 王东旭温红玲王志玉; 关键词：手足口病

山东省肠道病毒71型分离株SDLY11全基因组序列分析被引量：2: 2013年; 目的了解2009年山东省临沂市分离的肠道病毒71型(EV71)分离株SDLY11的基因组序列特征,探讨病毒的神经毒力候选位点。方法自手足口病患者的粪便标本中分离EV71,采用一步法RT-PCR对病毒株基因组进行全序列扩增,运用DNAstar和MEGA 4软件进行序列分析。结果 SDLY 11基因组全长为7 405nt,其中5′非编码区(UTR)742nt,3′UTR 84nt,中间为6 579nt的开放阅读框架(ORF),编码2 193个氨基酸的多聚蛋白。VP1区及全基因组序列系统进化分析表明SDLY 11位于EV71病毒C4亚型的分支,同源性分析显示SDLY 11与安徽阜阳株同源性最高。序列比对结果发现,CNS累及HFMD患者病毒株在5′UTR区出现了两处核苷酸位点的突变(T40C、C575T),在VP2区第144位出现了氨基酸的突变(T144S)。结论 SDLY 11分离株属EV71病毒C4亚型。5′UTR区的两处突变(T40C、C575T)及VP2区的一处突变(T144S)可能与病毒的致神经毒力作用有关。; 袁晓晶温红玲高峰许洪芝司鲁莹王东旭赵丽王志玉; 关键词：肠道病毒71型系统进化分析同源性分析神经毒力

肠道病毒71型分离株基因特征分析被引量：3: 2012年; 目的了解2009—2010年山东省临沂市肠道病毒71型(EV71)分离株的基因特征,初步探讨VPl区核苷酸或氨基酸变异与不同临床类型的关系。方法从手足口病(HFMD)病例、重症病例和死亡病例的粪便标本中分离获得23株EV71病毒株,RT-PCR扩增VP1区,并进行序列测定和分析。结果 23株分离株与A、B基因型同源性较低;与C4亚型的C4a群代表株的核苷酸和氨基酸同源性分别达到92.8%～93.5%和98.3%～99.3%,明显高于其他亚型代表株的同源性;各分离株间的氨基酸序列比对显示无特征性改变。结论 2009—2010年临沂地区流行的EV71是C4亚型的C4a群,HFMD病例、重症病例和死亡病例分离株VP1区核苷酸序列和氨基酸序列无特征性差异。; 司鲁莹高峰温红玲赵丽宋艳艳许洪芝袁晓晶王志玉; 关键词：VP1基因基因特征

肠道病毒71型疫苗研究进展: 2012年; 肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）是引起手足口病（hand，foot and mouth disease，HFMD）的主要病原体之一，HFMD可并发神经系统疾病，甚至导致死亡。对于EV71感染，目前尚无有效的治疗药物和措施，因此研制有效的疫苗是控制EV71流行的最佳方法。此文就EV71疫苗的研究进展进行综述。; 袁晓晶温红玲王志玉; 关键词：肠道病毒属疫苗手足口病

肠道病毒71型基因组5'非编码区序列分析被引量：2: 2012年; 目的了解2009年山东省临沂市分离的肠道病毒71型(EV71)基因组5'非编码区(5'UTR)序列特征,探讨基因组中引起神经毒性作用的候选位点。方法从手足口病患者的粪便标本中分离EV71,运用一步法逆转录聚合酶链反应扩增8个病毒株的5'UTR区,运用DNAstar和MEGA 4软件进行序列分析。结果 8个病毒株5'UTR区核苷酸为741～745 nt,核苷酸序列同源性介于97.0%～99.9%,8个病毒株的5'UTR区与C4亚型的同源性最高。序列比对发现,在5'UTR区第265 nt及703 nt处出现了核苷酸的突变(G265A,G703T)。遗传进化分析显示,8个病毒株序列与C4亚型的亲缘关系最为密切。结论此8个病毒株为C4亚型,核苷酸突变(G265A,G703T)可能与EV71的致神经毒性作用有关。; 袁晓晶温红玲高峰许洪芝司鲁莹王东旭宋艳艳赵丽王志玉; 关键词：手足口病肠道病毒71型遗传进化分析神经毒性

肠道病毒71型的分子流行病学研究进展被引量：2: 2012年; 肠道病毒71型（Enterovirus71，EV71）自1974年首次报道以来，全世界很多国家和地区，如保加利亚、日本、韩国、新加坡、法国、澳大利亚、马来西亚均报告了EV71的流行。近年来，有研究表明EV71在亚太地区的流行呈上升趋势，已引起人们的广泛关注。在我国，2007年的山东及2008年的安徽、广东的EV71大规模流行，上万名婴幼儿感染，几十名婴幼儿死亡。现在，EV71已取代脊髓灰质炎病毒成为最主要的婴幼儿中枢神经病毒病原。本文主要就EV71分子流行病学特征方面作一综述，以探索基因变化对EV71流行、致病的影响。; 司鲁莹温红玲王志玉; 关键词：EV71 分子流行病学

不同免疫方案制备肠道病毒71型抗血清的免疫效果比较: 2012年; 目的比较不同免疫方案制备肠道病毒71型(EV71)抗血清的免疫效果,选择最佳免疫方案。方法制备EV71,并对病毒进行滴定和灭活。将BALB/c鼠随机分为5组,每组9只。1、2组以灭活病毒免疫,3、4组以活病毒免疫,1、3组的免疫间隔时间为2周,2、4组为3周,第5组为对照组,用磷酸盐缓冲液(PBS)免疫,免疫间隔2周。免疫4次后用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组小鼠血清抗体滴度。结果 4个实验组均产生阳性抗体(A/A0≥2.1),对照组抗体阴性(A/A0<2.1),1～5组吸光度值依次为1.081 7±0.289 7、1.029 6±0.3719、1.074 8±0.374 9、1.492 9±0.215 9、0.168 7±0.021 8。对其进行单因素方差分析,F=23.449,P<0.05,差异有统计学意义,LSD-t检验结果,第4组与1、2、3组差异均有统计学意义(P<0.05),而1、2、3组两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论各组抗体滴度不完全相同,其中第4组即活病毒间隔3周免疫组抗体滴度最高,所以活病毒间隔3周免疫方案可作为制得高滴度EV71抗血清的理想选择。; 王东旭温红玲董华孙成玺司鲁莹袁晓晶褚福禄赵丽王志玉; 关键词：肠道病毒71型免疫方案抗体滴度

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