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黑龙江省杰出青年科学基金(JC2005-04)
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1
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2009
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近红外荧光染料标记表皮生长因子探针在荷人乳腺癌裸鼠移植瘤中的分子成像研究
被引量:5
2009年
目的探讨近红外荧光(NIRF)染料Cy5.5标记的表皮生长因子(EGF)在乳腺癌EGF受体(EGFR)特异性显像中的价值。方法流式细胞仪检测人乳腺腺癌细胞株(MDA—MB-231)和人乳腺导管腺癌细胞株(MDA—MB-435S)的EGFR表达水平。激光共聚焦显微镜观察MDA—MB-231和MDA—MB-435S对EGF—Cy5.5的摄取。建立MDA-MB-231和MDA-MB-435S裸鼠胸部乳腺癌移植瘤模型,经尾静脉注射EGF-Cy5.5(1nmol/0.2ml)后,即刻进行NIRF活体成像,在不同时间点连续采集图像,利用ROI技术检测EGF-Cy5.5在MDA-MB-231和MDA-MB-435S肿瘤组织摄取情况,通过体外及活体阻断实验观察抗EGFR单克隆抗体C225对细胞摄取EGF—Cy5.5的阻断作用。对离体肿瘤进行荧光成像并进行病理切片HE染色。采用t检验比较肿瘤区与对侧正常区平均荧光强度及阻断实验对荧光强度的影响。结果流式细胞学检测显示MDA—MB-231 EGFR阳性表达百分比为41.96%,MDA—MB-435S为0.12%。激光共聚焦显微镜显示MDA—MB-231对EGF—Cy5.5的摄取可被C225阻断,MDA—MB-435S对EGF—Cy5.5无特异性摄取。静脉注射EGF—Cy5.524h后MDA-MB-231肿瘤区平均荧光强度为(38220±3144)all,明显高于对侧正常组织区的(11980±1496)au(t=17.491,P〈0.01)及MDA—MB-435S肿瘤区的(11885±1144)all(t=17.600,P〈0.01)。用C225预处理后的MDA—MB-231肿瘤平均荧光强度为(10472±842)au,与MDA-MB-231未阻断组相比平均荧光强度明显减弱(t=16.772,P〈0.01);而阻断组MDA.MB-435S肿瘤区平均荧光强度为(11460±896)au,与MDA—MB-435S未阻断组的平均荧光强度差异无统计学意义(t=0.6504,P=0.551)。离体MDA-MB-231肿瘤内可探测到明显的荧光信号,HE染色证实为低分化腺癌。结论EGF-Cy5.5能与乳腺癌细胞的EGFR特异性结合,NIRF成像能实时、无创示踪EGF—Cy5.5在EGFR阳性肿瘤中的分布。
王可铮
申宝忠
李伟华
王凯
黄涛
卜丽红
王丹
李任飞
王知非
马玉彦
姬洪飞
王波
杨悦
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分子探针技术
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