国家自然科学基金(81270216) 作品数:7 被引量:38 H指数:5 相关作者: 刘洁琳 王佐广 刘雅 温绍君 文杰 更多>> 相关机构: 首都医科大学附属北京安贞医院 北京市计算中心 北京安贞医院 更多>> 发文基金: 北京市自然科学基金 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
汉族人群醛固酮合成酶CYP11B2基因多态性位点(rs1799998)与原发性高血压相关性研究的Meta分析 被引量:5 2014年 目的:评价醛固酮合酶CYP11B2基因多态性位点rs1799998与原发性高血压(EH)的关系。方法:检索PubMed、EmBase、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、维普中文期刊数据库及万方数据库。检索时间范围至2013年11月之前的所有文献。采用RevMan和R软件进行定量分析、计算汇总OR值、发表偏移、敏感性分析及累计Meta分析等。结果:分别检索到研究我国汉族人群CYP11B2基因rs1799998位点与EH相关性的文献42篇,按入选/排除标准筛选后共有17篇合格文献入选,涉及5 835例EH患者,5278例健康对照者。结论:未发现CYP11B2基因rs1799998位点与EH在中国汉族人群中具有明显相关性。 王丽娟 周家蓬 刘洁琳 张蓓 李梅 李闯 温绍君关键词:醛固酮合成酶 基因多态性 META分析 转录因子c-Jun对人血管平滑肌细胞中线粒体融合基因2表达调控作用的实验研究 被引量:1 2019年 目的:探讨转录因子c-Jun对培养的人血管平滑肌细胞(hVSMCs)中线粒体融合基因2(Mfn2)表达的调控作用。方法:①siRNA干扰实验:设正常对照组、阴性siRNA对照组和siRNA干扰组,用c-Jun siRNA转染hVSMCs,培养26 h后提取细胞mRNA和总蛋白。通过RT-PCR和Western blot检测Mfn2基因和蛋白质的表达。②过表达实验:设正常对照组、阴性病毒对照组和慢病毒过表达组。用慢病毒载体感染细胞,培养96 h后提取细胞mRNA和总蛋白。通过RT-PCR和Western blot检测Mfn2基因和蛋白质的表达。结果:siRNA敲减c-Jun后,与阴性siRNA对照和正常对照组相比,siRNA干扰组Mfn2 mRNA明显降低[(0.671±0.061)vs.(1.110±0.080),P<0.01;(0.671±0.061)vs.(1.000±0),P<0.01],蛋白质的表达也显著降低[(0.571±0.049)vs.(1.042±0.039),P<0.01;(0.571±0.049)vs.(1.000±0),P<0.01],hVSMCs的数量明显增加。相反,用慢病毒表达载体过表达c-Jun后,与阴性病毒对照和正常对照组相比,慢病毒过表达组Mfn2 mRNA明显增加[(1.414±0.063)vs.(1.056±0.020),P<0.01;(1.414±0.063)vs.(1.000±0),P<0.01],蛋白质的表达也显著增加[(1.449±0.044)vs.(1.089±0.026),P<0.01;(1.449±0.044)vs.(1.000±0),P<0.01],hVSMCs的数量则明显下降。结论:c-Jun能显著正调控Mfn2的表达,并影响hVSMCs的增殖。因此,它可能是Mfn2表达的转录调控因子。 李笑 罗兴才 王佐广 吴琼 辛毅 刘洁琳 刘雅 魏永祥关键词:C-JUN 转录因子 转录调控 血管平滑肌细胞 线粒体融合蛋白2在原发性高血压患者血管组织和平滑肌细胞中表达的研究 被引量:3 2013年 目的观察线粒体融合蛋白2(Mfn2)在人血管组织和平滑肌细胞(VSMCs)中的表达情况。方法选取2006年10月至2007年10月在北京安贞医院行冠状动脉旁路移植术的患者60例,分为高血压组和正常血压组各30例,收集术中剩余桥血管(乳内动脉)。取1例正常产妇产新生婴儿脐带,进行人乳内动脉和VSMCs培养。提取乳内动脉组织和VSMCs总RNA,RNA的反转录-cDNA的聚合酶链式扩增(RT—PCR),观察2组患者Mfn2的表达情况。用不同浓度血小板源性生长因子(PDGF—BB)诱导VSMCs增殖并检测Mfn2表达情况。结果2组患者血压水平、体质指数差异有统计学意义(P〈0.05)。人乳内动脉血管组织和VSMCs均有Mfn2表达,高血压组Mfn2表达水平均低于正常血压组(人乳内动脉血管组织:0.42±0.10比0.49±0.12,P=0.014;VSMCs:0.29±0.07比0.334-0.08,P=0.041)。高血压组原代VSMCs细胞计数高于正常血压组(0.48±0.15比0.38±0.11,P=0.005)。与对照组相比,随PDGF—BB浓度增加VSMCs计数增加(对照组:0.36±0.09,10μg/L组:0.53±0.13,100μg/L组:0.54±0.12),VSMCs的Mfn2表达减少(对照组:0.31±0.08,10μg/L组:0.22±0.06,100μg/L组:0.21±0.05,P〈0.05);100μg/L组与10μg/L组相比,VSMCs细胞计数和VSMCs的Mfn2表达差异无统计学意义(P值分别为0.862和0.755)。结论在人血管组织和培养的VSMCs中验证了高血压和正常血压人选者存在Mfn2的表达差别。 刘雅 赵莉敏 刘洁琳 文杰 王佐广 刘亚萍 温绍君 王世奇关键词:原发性高血压 乳内动脉 平滑肌细胞 基于高通量测序的全基因组关联研究策略 被引量:12 2014年 全基因组关联研究(Genome-wide association study,GWAS)是人类复杂疾病研究的重要组成部分之一,在群体水平检测全基因组范围的遗传变异与可观测性状间的遗传关联。传统的GWAS是以芯片(Array)技术获得高密度的遗传变异,尽管硕果累累,但也存在不少问题。如:所谓的"缺失的遗传力",即利用关联分析检测达到全基因组水平显著的遗传变异位点只能解释小部分遗传力;在某些性状上不同研究的结果一致性较弱;显著关联的遗传变异位点的功能较难解释等。高通量测序技术,也称第二代测序(Next-generation sequencing,NGS)技术,可以快速、准确地产出高通量的变异位点数据,为解决以上问题提供了可行的方案。基于NGS技术的GWAS方法(NGS-GWAS)可在一定程度上弥补传统GWAS的不足。文章对NGS-GWAS策略和方法进行了系统性调研,提出了目前较为可行的NGS-GWAS的实施策略和方法,并对NGS-GWAS如何应用于个体化医疗(Personalized medicine,PM)进行了展望。 周家蓬 裴智勇 陈禹保 陈润生关键词:全基因组关联研究 个体化医疗 转录因子c-Jun对人血管平滑肌细胞增殖的调控作用及其机制的实验研究 被引量:6 2021年 目的:通过下调和上调c-Jun在人血管平滑肌细胞(hVSMCs)中的表达,研究c-Jun对hVSMCs增殖的调控作用及其机制。方法:①l-Jun基因低表达实验:体外培养hVSMCs,将细胞分为空白对照组、阴性对照组(转染阴性对照siRNA)和siRNA干扰组(转染靶向c-Jun的siRNA)三组,用构建好的siRNA转染各组细胞并培养24 h。②c-Jun基因过表达实验:体外培养hVSMCs,将细胞分为空白对照组、阴性对照组(转染阴性对照病毒载体)和慢病毒组(转染过表达c-Jun的慢病毒载体)三组,用构建好的慢病毒转染各组细胞并培养48 h。完成上述的细胞转染后,光镜观察各组细胞的生长情况,加入CCK-8试剂检测各组细胞的0D值。Western Blot检测c-Jun基因、线粒体融合基因2(Mfn2)的表达以及RAS-RAF-MEK-ERK1/2信号通路蛋白的表达。结果:siRNA干扰c-Jun表达后,与阴性对照组(1.301±0.027)或空白对照组(1.223±0.016)相比,siRNA干扰组(1.759±0,023)的0D值显著增加(P<0.05),Mfn2的表达下调,RAS、RAF、MEK以及ERK1/2蛋白的表达显著增加(P<0.05)。相反,慢病毒过表达c-Jun后,与阴性对照组(1.660±0,009)或空白对照组(1.862±0,123)相比,慢病毒组(1.101±0,101)的0D值显著减少(P<0.05),Mfn2的表达上调,RAS、RAF、MEK以及ERK1/2蛋白的表达显著减少(P<0.05)。结论:c-Jun可能通过调控Mfn2-RAS-RAF-MEK-ERK1/2信号通路调节hVSMCs的增殖。 吴琼 刘洁琳 刘雅 辛毅 曾荣 程文立 王佐广关键词:血管平滑肌细胞 C-JUN 中国北方汉族人群尾加压素Ⅱ基因多态性与原发性高血压相关性研究 被引量:6 2013年 目的:研究高血压候选基因尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UTS2)在中国北方汉族人群的分布,探讨UTS2基因Ser89Asn多态性与原发性高血压(essential hypertension,EH)的关系。方法:采集健康体检人群临床资料,分析体质量指数、血脂及血糖等临床指标,同时调查受检者吸烟和饮酒等生活习惯;TaqMan-MGB法分析UTS2基因Ser89Asn多态性在中国北方汉族人群(样本总数1 146例,其中EH病患者682例,血压正常的健康体检者464例)的分布及其与临床指标的相关性。结果:结果显示:UTS2的Ser89Asn基因型(P=0.037)和等位基因频率(P=0.039)在两组总体的差异具有统计学意义,性别亚组差异无统计学意义;调整其他影响因素后,Logistic回归模型分析显示,UTS2 EH总体和性别亚组的Ser89Asn基因多态性与EH无关。结论:在中国北方汉族人群中,未见UTS2基因Ser89Asn突变与原发性高血压相关。 刘雅 张蓓 刘洁琳 王佐广 文杰 李梅 王皓 王丽娟 温绍君关键词:原发性高血压 单核苷酸多态性 线粒体融合基因2启动子的生物信息学研究 被引量:6 2013年 目的线粒体融合基因2是一个新发现的负调控血管平滑肌细胞增殖的基因,在原发性高血压患者血管平滑肌细胞中低表达,但其调控机制还不明确。本研究通过生物信息学方法研究线粒体融合基因2的转录和调控机制。方法通过使用在线软件,对线粒体融合基因2上游5'端的启动子分布、转录因子及其结合位点、CpG岛、TATA box分析、保守区域等进行分析。同时对该区SNP的分布及其功能进行研究。结果线粒体融合基因2上游5'端存在5个启动子,但是起核心作用的可能只有2个;有2个保守区域,存在69个转录因子结合位点,后者主要与炎症反应、氧化应激、细胞增殖与分化和MAPK、STAT信号传导通路相关;一个CpG岛;15个TATA box,有8个处于-2000 bp以内;32个SNP位点,其中9个处于核心启动子区,5个可能会影响线粒体融合基因2的转录。结论线粒体融合基因2上游5'端-400 bp以内可能存在着核心启动子,该启动子区存在着一些重要的与线粒体融合基因2功能相关的转录因子。同时,启动子区存在的大量SNP可能会影响基因的转录调控。 王佐广 牛秋丽 刘雅 刘洁琳 顾伟 刘阔 楼煜清 文杰 吴兆苏 温绍君关键词:启动子 转录调控 转录因子 生物信息学