山东省自然科学杰出青年基金(JQ200914)
- 作品数：5 被引量：23H指数：4
- 相关作者：秦松邵明飞刘兆普赵楠张宏宇更多>>
- 相关机构：中国科学院烟台海岸带研究所南京农业大学曲阜师范大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学杰出青年基金国家自然科学基金国家海洋公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：化学工程生物学医药卫生动力工程及工程热物理更多>>
- 产乙醇大肠杆菌的构建及其活性检测方法的改进
- 2011年
- adhB和pdc是运动发酵单胞菌产乙醇途径的关键基因,分别编码乙醇脱氢酶和丙酮酸脱羧酶,将添加有聚球藻PCC7942rbcLS基因RBS序列的adhB和pdc基因插入pUC18载体,经双重菌液PCR检验和酶切检验得到分别含有pUC-adhB、pUC-pdc和pUC-adhB-pdc载体的3个重组菌株。活性检测实验表明聚球藻PCC7942的rbcLS基因的RBS序列能有效介导运动发酵单胞菌的adhB和pdc基因在大肠杆菌中表达,摇瓶发酵实验表明重组大肠杆菌的产乙醇能力较出发菌株大幅提升。鉴于乙醛指示平板法存在着对希夫试剂的要求较高、易产生较强的背景色等缺点,对定性检测丙酮酸脱羧酶和乙醇脱氢酶表达菌株的方法做了改进,即:将菌液诱导表达,然后分别添加对应于两种酶的底物,让酶与底物反应0.5至1小时,之后再加希夫试剂进行显色反应,结果表明改进后的方法比乙醛指示平板法更加简便、快速、可靠。
- 姜进举张宏宇任宝永施斐崔玉琳秦松
- 关键词：生物乙醇丙酮酸脱羧酶乙醇脱氢酶运动发酵单胞菌蓝藻
- 一步柱层析纯化螺旋藻藻蓝蛋白被引量：6
- 2013年
- 采用硫酸铵盐析结合疏水层析技术分离纯化螺旋藻中的藻蓝蛋白。试验结果表明,在磷酸盐缓冲体系下藻蓝蛋白粗提液经1.25 mol/L硫酸铵盐析处理后离心脱气,只需采用一步Macro-Prep Methyl疏水层析,藻蓝蛋白的纯度(A620/A280)可提高到4.017,回收率为19.38%。特征吸收峰和荧光光谱证实纯化后的产物符合藻蓝蛋白的性质,Native-PAGE电泳只出现单一染色带,表明纯化得到的藻蓝蛋白是均一的;SDS-PAGE电泳出现分子量为15.4kDa、17.3 kDa的2条染色带,分别为藻蓝蛋白的α亚基与β亚基。
- 邵明飞赵楠李勇勇谷洋洋刘兆普秦松
- 关键词：藻蓝蛋白纯化METHYLNATIVE-PAGESDS-PAGE
- 规模化制备藻蓝蛋白工艺技术研究进展被引量：4
- 2013年
- 藻蓝蛋白作为蓝色天然色素蛋白,具有抗氧化、清除体内自由基、增强机体免疫力、抗炎、保肝护肝等生理功能及高效的荧光特性,被广泛应用于食品、化妆品、医药、分子探针等领域。现今制约藻蓝蛋白大规模商业化生产的主要原因是没有稳定、高效、经济的制备工艺。文中综述了近几年藻蓝蛋白制备工艺中发展较快、实用性较强的工艺技术,并在此基础上提出了一种工艺方案。
- 邵明飞赵楠刘冰秦松
- 关键词：藻蓝蛋白规模化
- 钝顶螺旋藻藻蓝蛋白抗百草枯诱导大鼠肺纤维化的研究被引量：7
- 2012年
- 目的探讨钝顶螺旋藻（spirulina platensis）藻蓝蛋白（C-phycocyanin，C—PC）对百草枯（paraquat，PQ）染毒诱导大鼠肺纤维化的治疗作用。方法选取健康Wistar大鼠90只，随机分为正常对照组、模型组（PQ组）和藻蓝蛋白治疗组（C—PC组），每组30只。PQ组、C—PC组以PQ（50mg／kg）一次灌胃染毒造模。造模后，正常对照组、PQ组大鼠每天给予生理盐水（1m/100g）灌胃，C—PC组每天给予C—PC（50mg／kg）灌胃，并在第1、3、7、14、28天各组随机取6只大鼠右肺下叶肺组织匀浆测羟脯氨酸（HYP）、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力；取左肺部分组织行HE染色、Masson染色进行病理观察，并用免疫组化方法观察肺组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）、核因子-κB亚基p65（NF—κB p65）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达。结果各观察时点C—PC组大鼠肺组织中HYP和14、28d MDA含量明硅低于PQ组，差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。1、7、14、28d时C—PC组大鼠肺组织中SOD活力明显高于PQ组，差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。PQ组和C—PC组肺组织中TGF-β1的表达及NF—κB p65和TNF-α表达明显高于正常对照组，C—PC组肺组织的TGF-β1表达及NF-κB p65和TNF-α表达明显低于PQ组，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。病理学观察显示C—PC能减轻PQ染毒大鼠肺泡炎和肺纤维化程度。结论C—PC对PQ诱导的大鼠肺泡炎及肺纤维化有抑制作用。
- 孙英新张娟于功昌闫永建陈雯雯迟明峰秦松
- 关键词：百草枯藻蓝蛋白肺纤维化
- 响应面法优化螺旋藻藻蓝蛋白的超声波提取工艺被引量：9
- 2013年
- 利用超声波破壁技术提取螺旋藻中的藻蓝蛋白,采用响应曲面法对工艺条件进行优化,模型决定系数(R2=99.95%)表明模型的拟合性好,得到的最佳工艺条件为:液料比为21 mL/g,超声波功率为640W,超声时间为14min。此条件下藻蓝蛋白的得率为10.76%,与模型预测值10.77%相近。对超声波提取法、冻融法、恒温浸提法进行比较研究,藻蓝蛋白的得率分别为10.76%、7.89%、6.57%,得知超声波提取法用时短、藻蓝蛋白得率高。
- 邵明飞张宏宇杨金萍张允允刘兆普秦松
- 关键词：超声波提取藻蓝蛋白螺旋藻响应曲面法
