国家自然科学基金(81172642)
- 作品数：12 被引量：42H指数：4
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- 安徽省281名一般人群外周血淋巴细胞核分裂指数
- 2016年
- 目的研究安徽省一般人群外周血淋巴细胞核分裂指数（NDI）的参考值范围，并分析可能的影响因素。方法2010—2011年在安徽地区招募无职业性遗传毒物接触史及慢性疾病史的一般人群281名。采用调查问卷的方式收集调查对象的年龄、性别、地区、职业暴露史、BMI、吸烟和饮酒状况等信息，采集被调查者外周血，通过胞质分裂阻滞法微核组学计算NDI，分析影响因素，并以NDI为因变量，年龄、性别等因素为自变量采用多重逐步线性回归法进行分析。结果安徽省调查人群的NDI数据为正态分布，NDI为1．71±0．22，最小值为1．10，最大值为2．36。男性人群的NDI值（1．67±0．20）低于女性人群（1．76±0．24），差异有统计学意义（t=-3．65，P〈0．001）；吸烟人群的NDI（1．66±0．18）低于非吸烟人群（1．73±0．24），差异有统计学意义（t=3．06，P=0．002）；饮酒人群的NDI（1．66±0．20）低于非吸烟人群（1．74±0．23），差异有统计学意义（f=3．15，P=0．002）。采用多重逐步线性回归对相关因素进行分析后发现，性别是NDI的独立影响因素，且女性高于男性（β=0．098，sf=0．027，t=3．66，P〈0．001）。结论调查地区的一般人群NDI的参考值范围，可以为同类研究提供参考，可用于评估有害因素对机体的细胞增殖能力的影响。
- 滕晶晶杨同金叶林冯学庆郑玉新段化伟
- 关键词：胞质分裂淋巴细胞细胞毒性
- 焦炉逸散物致HL-60细胞急性损伤及机制研究被引量：1
- 2017年
- 目的建立焦炉逸散物(COE)对离体培养的人白血病细胞株HL-60细胞的染毒模型,探讨COE对血液细胞的急性毒性作用及机制。方法取对数生长期HL-60细胞,分别以终浓度为2.5、5.0、10.0、20.0 mg/L的COE染毒并培养24 h后,以CCK-8法检测细胞存活率,以乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒性,以2',7'-二氯荧光素二乙酸酯荧光探针法和硝基蓝四氮唑染料法检测细胞活性氧(ROS)水平,以蛋白免疫印迹法检测核转录因子κB(NF-κB)信号通路蛋白表达情况。结果随着COE染毒剂量的增加,HL-60细胞毒性上升(P<0.01),细胞存活率下降(P<0.01),细胞内ROS水平下降(P<0.01),细胞外ROS水平上升(P<0.01),均呈剂量-效应关系。4个剂量组HL-60细胞p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白相对表达水平均高于对照组(P<0.05),但均无剂量-效应关系。结论 COE可导致HL-60细胞急性损伤,呈剂量-效应关系;其作用机制可能与COE诱导HL-60细胞发生ROS释放与清除失衡,进而导致NF-κB信号通路活化有关。HL-60细胞可作为COE对血液细胞毒性分析的常用细胞模型。
- 沈美丽解秋艳李红丽王艳华纪乾鹏王庆荣戴宇飞段化伟
- 关键词：焦炉逸散物HL-60细胞活性氧核转录因子ΚB
- 低水平焦炉逸散物对接触人群尿中8-羟基脱氧鸟苷影响分析被引量：10
- 2015年
- 目的探讨低水平焦炉逸散物（COE）接触与焦炉作业工人尿中8-羟基脱氧鸟苷（8-OHd G）的剂量-效应关系。方法采用横断面调查方法,以某焦化厂263名焦炉作业工人为接触组,以某氧气厂113名非焦炉作业工人为对照组。检测2组人群工作场所空气中COE短时间接触浓度（CSTEL）。分别采用高效液相色谱法和超高效液相色谱-质谱法测定研究对象尿中1-羟基芘（1-OHP）和8-OHd G水平。结果对照组和接触组工作场所空气中COE的CSTEL分别为0.020~0.070（0.042±0.018）、0.100~0.320（0.208±0.069）mg/m3;接触组人群工作场所空气中COE的CSTEL高于对照组（P〈0.01）;对照组和接触组炉底、炉侧、炉顶亚组工作场所空气中COE的CSTEL分别为0.020~0.070（0.042±0.018）、0.100~0.160（0.132±0.023）、0.180~0.300（0.223±0.040）、0.190~0.320（0.269±0.049）mg/m3,呈从低到高趋势（P〈0.01）。接触组人群尿中1-OHP和8-OHd G水平均高于对照组[0.466（0.160,1.420）vs 0.026（0.011,0.110）μmol/mol肌酐,237.990（128.727,458.055）vs 160.000（94.578,274.256）μg/mol肌酐,P〈0.01]。研究对象尿中1-OHP水平从低到高依次为对照组〈接触组炉底亚组〈接触组炉侧亚组〈接触组炉顶亚组（P〈0.05）。多重线性回归分析结果显示,在排除性别、年龄、工龄、吸烟、饮酒和体质量超重等混杂因素的影响后,尿中1-OHP水平和8-OHd G水平均与COE接触有关联（P〈0.05）;接触组人群COE接触水平与尿中1-OHP水平呈剂量-效应关系（P〈0.01）,尿中1-OHP水平与8-OHd G水平呈剂量-效应关系（P〈0.01）。结论低水平COE接触仍可导致焦炉作业工人DNA氧化损伤,其COE接触水平与DNA氧化损伤标志物尿中8-OHd G水平呈剂量-效应关系。
- 王艳华刘仲赵红伟纪乾鹏张志虎宿文革郑玉新段化伟
- 关键词：焦炉逸散物8-羟基脱氧鸟苷1-羟基芘剂量-效应关系
- 有害结局路径策略在毒理学研究中的发展和应用被引量：4
- 2015年
- 有害结局路径（AOP）是综合已有的毒理学信息，在个人或群体的水平上，关于外源性化学物引发的分子起始事件（MIE）和有害结局之间相互联系的框架。可以通过这个框架将分子起始事件引起损害作用的毒性试验结果外推到人，为收集和评估相关化学、生物学和毒理学信息提供框架，在毒理学风险评估中发挥重要作用。本文对AOP的概念及其框架的建立和评定进行了论述，并列举了已经在毒理学研究中建立的AOP框架的实例，以及其在毒理学应用方面的展望和挑战。
- 王艳华段化伟
- 关键词：毒理学分子生物学
- 焦炉逸散物致支气管上皮细胞Th17细胞因子改变被引量：1
- 2014年
- 目的检测焦炉逸散物(COE)致Th17细胞因子谱表达改变,探讨其致炎性损伤过程中的生物标志物。方法焦化厂炉顶采集COE,COE 5,10和20 mg·L-1处理人支气管上皮细胞(16HBE),分别为24 h和连续染毒5 d。MTT方法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶释放实验检测细胞炎性损伤,高通量悬浮芯片测定细胞上清中Th17细胞相关多种因子的改变情况。结果染毒24 h模型,COE 20 mg·L-1组出现明显的炎性损伤改变,未检测到IL-17F和IL-1β的表达;IL-10在COE 5,10和20 mg·L-1组的表达量依次为1.25±0.54,1.39±0.13和(1.90±0.73)pg·mL-1,呈较好的剂量-效应关系(r=0.98,P<0.05);IL-23只在COE 10和20 mg·L-1组表达,表达量依次为3.38±3.90和(1.74±2.00)pg·mL-1,其他细胞因子未发现明显剂量依赖性改变。染毒5 d模型中,IL-17A在COE 5和10 mg·L-1组的表达量升高,且在COE10 mg·L-1组有统计学意义(P<0.05)。IL-17F仅在COE 5和10 mg·L-1组表达,分别为10.2±11.78和(6.79±7.84)pg·mL-1;IL-10在COE 5,10和20 mg·L-1组的表达量依次为1.71±0.02,1.49±0.25和(2.82±0.33)pg·mL-1;COE 5,10和20 mg·L-1组IL-1β表达量分别为2.72±0.62,2.25±0.33和(0.93±0.21)pg·mL-1,与处理剂量负相关;COE染毒组TNF-α表达量均高于染毒24 h组,但无剂量相关性。结论 COE可以影响16HBE细胞中Th17细胞因子的表达改变,其中IL-23和IL-1β可以分别反映COE早期和长期作用的炎性损伤;IL-10可以作为COE致炎性损伤生物标志物。
- 李红丽解秋艳刘秀玲牛勇戴宇飞郑玉新姚林段化伟
- 关键词：焦炉逸散物支气管上皮细胞乳酸脱氢酶TH17细胞细胞因子
- 人尿液中8-羟基脱氧鸟苷的超高效液相色谱-串联质谱联用检测方法被引量：7
- 2016年
- 目的 建立尿液中8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG ）的超高效液相色谱-串联质谱快速检测方法。方法 配制浓度为0.01~0.1 μg/ml的8-OHdG标准溶液，以7 μl/min的速度导入离子源，找出母离子、子离子质荷比，逐步优化每个离子对的解簇电压、碰撞电压和出口电压等质谱参数。以浓度为10.0 μg/L的加标尿液做样品，分别用1 mol/L甲酸铵溶液和甲酸体积比为5∶1、4∶1、3∶1、2∶1和1∶1的甲酸-甲酸铵溶液调节样品pH值。分别选用HLB、MCX、MAX 3种不同极性的固相萃取柱进行测试。分别测试甲醇和水比例为90∶10、80∶20、50∶50、20∶80、10∶90的洗脱效果，测试乙腈和水比例为90∶10、80∶20、50∶50、20∶80、10∶90的洗脱效果。以标准系列应用液浓度对应化合物定量离子对峰面积的比值绘制标准曲线。以响应值为3倍信噪比对应的8-OHdG浓度计为检出限，以响应值为10倍信噪比对应的8-OHdG浓度计为定量下限。采用空白尿液加标回收的方式来评价精密度和加标回收率。结果 母离子质荷比为284.1，子离子质荷比分别为168.1、140.1、123.0、112.0，定量离子对284.1/168.1的碰撞电压为18 V, 284.1/140.1碰撞电压为42 V, 284.1/123.0碰撞电压为48 V, 284.1/112.0碰撞电压为53 V。由10 ml 1 mol/L甲酸铵溶液、2 ml甲酸、88 ml水混合溶液与样品体积1∶5的比例进行pH调节的方式回收率最高，为87.9%～104.3%。用3 ml甲醇和3 ml水活化的HLB柱进行样品提取净化，用1.0 ml甲醇进行洗脱的方式回收率最高，为87.9%～104.3%。在1.0~100.0 μg/L的浓度范围内，8-OHdG标准应用液检测结果呈良好的线性关系。回归方程y=1.25x＋0.74，相关系数r=0.999 5。方法的检出限是0.2 μg/L，定量下限是0.7 μg/L。方法加标回收率范围在87.9%～104.3%，批内精密度在1.5%～3.7％范围内，批间精密度在1.6%～5.4％范围内。结论 本研究建立的方法灵敏度高，精密度和
- 刘仲于志刚王艳华慈颖孙湛焦海涛段化伟
- 关键词：脱氧鸟苷
- 焦炉工尿中多环芳烃羟基代谢产物影响因素分析被引量：4
- 2017年
- 目的观察焦炉工尿中4种多环芳烃(PAHs)羟基代谢产物水平及其影响因素,探讨其作为焦炉逸散物(COEs)接触的生物标志物的可行性。方法采用横断面调查方法,以某焦化厂261名焦炉工为接触组,以某氧气厂111名非焦炉作业工人为对照组。采用超高液相色谱-质谱法检测2组人群尿中1-羟基芘、1-羟基萘、2-羟基萘和3-羟基菲4种PAHs羟基代谢产物的水平。结果接触组人群尿中4种PAHs羟基代谢产物水平均高于对照组(P<0.01);接触组3个亚组人群尿中1-羟基芘、1-羟基萘和2-羟基萘水平从低到高依次为炉底亚组<炉侧亚组<炉顶亚组(P<0.05)。多重逐步回归分析结果显示:在排除性别、年龄、吸烟和饮酒等混杂因素的影响后,尿中1-羟基芘、1-羟基萘和2-羟基萘水平均与接触COEs有关联(P<0.05);在排除性别、年龄、工龄、吸烟和饮酒等混杂因素的影响后,接触组人群尿中1-羟基芘、1-羟基萘和2-羟基萘水平均呈随COEs接触水平增加而增加的剂量-效应关系(P<0.01);接触组人群尿中1-羟基萘和2-羟基萘水平还与吸烟有关联(P<0.01)。结论 1-羟基芘可作为COEs内暴露评价的可靠生物标志物,1-羟基萘和2-羟基萘可作为COEs内暴露评价的辅助生物标志物。
- 孟潇段化伟刘仲张志虎
- 关键词：焦炉逸散物多环芳烃生物标志物1-羟基芘
- 核酸内切酶改良型彗星实验用于检测遗传毒物致DNA氧化损伤被引量：5
- 2014年
- 目的 建立核酸内切酶改良型体外彗星实验方法,并应用该方法检测DNA氧化损伤.方法 分别应用苯并[a]芘[B（a）P,20 μmol/L]、甲基磺酸甲酯[MMS,25 μg/ml]、秋水仙素（COL,5 mg/L）和长春新碱（VCR,0.5 mg/L）处理人支气管上皮（16HBE）细胞.采用噻唑蓝（MTT）实验评估细胞生存率,常规彗星实验和内切酶改良型彗星实验分别检测DNA损伤和氧化损伤,流式细胞术检测细胞内活性氧改变.结果 MTT实验显示,B（a） P、MMS、COL、VCR染毒后可引起较高水平的细胞内活性氧升高,4个组的细胞生存率分别为：（59.69±2.60）％、（54.33±2.81）％、（53.11±4.00）％、（51.43±3.92）％.常规彗星实验及甲酰胺嘧啶-DNA-糖基化（formamidopyrimidine-DNA-glycosylase,FPG）酶彗星实验均检测到B（a）P、MMS、COL、VCR引发的DNA损伤.FPG酶彗星实验中,Olive尾矩改变最明显,缓冲液组的B（a） P、MMS、COL、VCR组Olive尾矩分别为22.99±17.33、31.65±18.86、19.86 ±9.56和17.02 ±9.39,FPG酶处理后Olive尾矩分别为34.50±17.29、43.80±10.06、33.10±12.38和28.60±10.53,较缓冲液组分别增加58.94％、38.48％、66.86％和68.21％（t值分别为3.91、3.89、6.66和3.87,P值均＜0.05）.相关性分析显示,Olive尾矩与细胞内活性氧也有较好的相关性（r=0.77,P＜0.05）.结论 FPG酶改良型彗星实验可以有效的检测遗传毒物所致的DNA氧化损伤改变.
- 赵健李红丽翟庆峰邱玉刚牛勇戴宇飞郑玉新段化伟
- 关键词：诱变剂核酸内切酶彗星实验
- 一般人群尿中8-羟基脱氧鸟苷水平及其影响因素被引量：4
- 2016年
- [目的]探讨一般人群尿8-羟基脱氧鸟苷（8-OHd G）水平,以及可能影响因素的作用。[方法]选择华东某市的城市居民共257名作为研究对象,采用超高效液相色谱-串联质谱方法测定尿中8-OHd G水平,高效液相色谱法检测尿中肌酐的浓度,校正尿中的8-OHd G的浓度。影响因素分析采用多重线性回归分析,交互作用采用多因素方差分析模型分析。[结果]该地区一般人群尿中的8-OHd G的质量浓度M（P25～P75）为1.50（0.39～2.24）μg/L,肌酐校正后M（P25～P75）为129.82（50.79～235.58）μg/mol。经吸烟、饮酒情况和体质指数（BMI）分层后,没有发现吸烟、饮酒和BMI单独对尿中8-OHd G改变的影响。多重线性回归分析结果显示,在排除其他混杂因素的影响后,饮酒对尿中8-OHd G水平有影响（P=0.040）。进一步分析发现超重人群中随年龄升高8-OHd G水平有升高趋势（Ptrend〈0.05）。[结论]年龄与BMI的交互作用是尿中8-OHd G水平的重要影响因素,尤其是高年龄的超重者更易发生DNA氧化损伤。
- 王艳华李红丽解秋艳邢杰纪乾鹏孟涛牛勇段化伟
- 关键词：8-羟基脱氧鸟苷
- 焦炉逸散物对接触工人肾功能的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨焦炉逸散物(COE)对接触工人肾功能的影响。方法采用横断面调查方法,对某焦化厂575名在职焦炉作业工人职业健康检查资料的肾功能指标尿素氮、肌酐、尿酸进行分析。结果COE接触工人血清中尿素氮的异常率呈现炉底、炉侧、炉顶组依次增高的趋势,且差异有统计学意义(P<0.05)。血清中肌酐和尿酸平均值呈炉底组、炉侧组、炉顶组依次上升的趋势,有剂量-效应关系。均未发现接害工龄和吸烟对上述肾功能指标的影响,但在饮酒者中的3个肾功能指标均有明显升高(P<0.05)。结论 COE可导致接触工人的肾脏功能异常。
- 纪乾鹏王艳华刘秀玲赵红伟邢杰宿文革王春平段化伟
- 关键词：焦炉逸散物肾功能尿素氮肌酐尿酸
