国家自然科学基金(81172669) 作品数:10 被引量:40 H指数:3 相关作者: 周继昌 莫俊銮 杨慧 龚春梅 郑世杰 更多>> 相关机构: 深圳市慢性病防治中心 中山大学 广东药学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 深圳市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
DNCB致敏诱导BALB/c小鼠特应性皮炎模型的建立 被引量:24 2013年 目的探索建立1-氯-2,4-二硝基苯(DNCB)经皮肤致敏诱导BALB/c小鼠特应性皮炎(AD)模型的方法。方法将6只7周龄BALB/c小鼠随机分为3组(n=2),常规饲养。3组小鼠分别接受1%+0.2%DNCB溶液(A组)、1%+0.1%DNCB(B组)和基质(橄榄油:丙酮=4:1)溶液(正常对照C组)处理。用上述溶液反复刺激小鼠的背部和耳廓皮肤,观察皮炎症状和皮肤病理等指标,并检测血浆总IgE浓度。结果在首次致敏后的4周中,B组小鼠出现明显皮炎症状,A组小鼠出现轻微皮炎症状后恢复正常,C组无明显皮炎症状。B组小鼠的抓挠动作次数、皮炎症状评分显著高于A组和C组。皮肤病理观察显示B组棘层细胞增厚、炎症细胞浸润,其嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、中性粒细胞和肥大细胞较其它两组有显著差异。B组血浆总IgE浓度高于A、C两组,但样本例数过少,尚未得到统计学支持。结论先后用含1%和0.1%DNCB的丙酮-橄榄油溶液涂拭BALB/c小鼠皮肤能够成功建立AD模型。 莫俊銮 周继昌 刘小立 郑世杰 龚春梅 何山 肖勇梅 杨慧关键词:特应性皮炎 BALB C小鼠 DNCB 动物模型 Serum 25(OH)D and Lipid Levels in Chinese Obese and Normal Weight Males before and after Oral Vitamin D Supplementation 被引量:8 2013年 Objective To study the effect of oral vitamin D (VD) supplementation on VD status and serum lipid in Chinese obese and healthy normal-weight men. Methods Twenty-one obese men with their body mass index (BMI)〉28 kg/m2 served as an obese group and 22 healthy normal-weight men with their BMI〈24 kg/m2 served as a control group in this study. After they were given 50 000 IU of oral VD, once a week for 8 weeks, the serum 25-hydroxyvitamin D [25(OH)D] concentration was measured with an enzyme-immunoassay kit. Results After oral VD supplementation, the serum 25(OH)D concentration significantly increased from 46.1+9.1 nmol/L to 116.7_+20.3 nmol/L in the obese subjects (P〈O.01) and from 52.8_+17.8 nmol/L to 181.3_+30.2 nmol/L in the control ones (P=0.13). The serum high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) level was reduced within the normal reference range in the obese group. However, no significant change was observed in the level of other serum lipids (triglycerides, total cholesterol, and low-density lipoprotein cholesterol) in either of the two groups. Conclusion The effect of high-dose oral VD supplementation is weaker on VD status in the obese group than in the control group. High-dose oral VD supplementation has no side effect on serum lipid level in obese and control groups. ZHOU Ji Chang ZHU Yu Mei GUO Ping CHEN Zheng XIE Feng Zhu LIU Xiao Li HE Shan关键词:OBESITY 不同剂量硒对大鼠四种组织器官硒蓄积浓度的影响 被引量:1 2014年 目的观察不同剂量硒喂饲SD大鼠后,对其肝、肾、血、睾丸中硒蓄积浓度的影响。方法将40只4周龄雄性断乳大鼠,以缺硒饲料(BD)喂饲35 d后,按体重随机分为4组,每组10只。1组继续BD饲养,其它3组的饲料在BD基础上分别加含0.25、3.0、5.0 ppm亚硒酸钠形式的硒。经过28 d硒蓄积性毒性试验,处死采样,测定肝、肾、血细胞(全血离心沉淀)和睾丸中硒元素蓄积浓度。结果适量硒摄入的大鼠肾与睾丸的硒浓度最高。高硒暴露时,组织硒浓度依次为:肾>肝>血细胞>睾丸。高浓度硒对4种组织硒浓度变化的影响依次是:血细胞>肝>肾>睾丸。结论肝与血细胞硒蓄积浓度的变动幅度大,提示它们对维持其它组织硒含量的相对稳定具有重要作用;而睾丸硒蓄积量的稳定性印证了该元素对雄性生殖功能的重要性。 王舟 周继昌 张慧敏 莫俊銮 郑世杰 潘柳波 徐新云关键词:硒 硒对特应性皮炎小鼠CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的影响 被引量:2 2016年 目的分析膳食硒对特应性皮炎小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的影响。方法 40只BALB/c小鼠随机分为致敏组和对照组,致敏组(G1、G2、G3)分别以缺硒(0.01μg/m L)、中量硒(0.25μg/m L)和高量硒(3.00μg/m L)饲料喂养,对照组(G4)以中量硒饲料喂养。8周后致敏组采用DNCB诱导特应性皮炎症状,G4组作为对照。致敏期间监测皮炎症状。致敏3周后,检测血浆总Ig E、全血细胞计数、脾脏CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平和组织硒含量,分析组间各指标差异和变量间关系。结果 G1、G2、G3组小鼠第6天皮炎症状评分、第8天抓挠计数、第21天血浆总Ig E和全血炎症细胞数均高于G4组,差异有统计学意义(P<0.05)。G1、G2、G3、G4组CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+CD25+T细胞百分比分别为(79.6±7.6)%、(59.0±27.5)%、(37.6±5.4)%、(85.26±9.2)%,差异有统计学意义(P=0.000);其中G3组降低最为明显,与G1、G2和G4组比较差异具有统计学意义(t=0.174,40.828,1.466,P<0.01);相关回归分析发现,CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平与皮肤组织硒含量呈直线负相关(r=-0.623,P=0.001)。结论膳食硒通过其免疫学效应影响特应性皮炎小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的增殖分化水平。 莫俊銮 周继昌 张丽君 杨慧 李青 张芸 郑世杰关键词:特应性皮炎 调节性T细胞 硒 免疫 硒干预和DNCB致敏实验小鼠的基因表达分析参考基因的筛选 被引量:1 2016年 目的为1-氯2,4二硝基苯(1-chloro 2,4-dinitrobenzene,DNCB)致敏诱导的特应性皮炎小鼠动物实验的基因定量检测筛选内参基因。方法选取DNCB致敏诱导特应性皮炎动物实验中4个组别小鼠的皮肤、肝脏和脾脏样品各3份,利用q PCR方法对Atp5f1、Pgk1、Gusb、B2m、Ppia、Hprt1、Actb、Ywhaz、Tbp、Gapdh、Tfrc、Rplp1、Rps18等13种候选管家基因进行定量检测,采用Ge Norm分析软件分析基因表达稳定性,筛选在所有实验条件下各个组织中均稳定表达的管家基因作为内参基因。结果在全部组别皮肤和肝脏组织样品中稳定性最好的都是Gapdh(甘油醛-3-磷酸脱氢酶);在脾脏样品中稳定性最好的是Atp5f1(三磷酸腺苷合成酶5f1)和Ppia(肽酰脯氨酰异构酶A)。在全部组别所有样品中稳定性最好的依次是Gapdh、Pgk1和Atp5f1。结论 Gapdh和Atp5f1可以作为DNCB致敏诱导特应性皮炎小鼠基因定量检测的参考基因。 莫俊銮 梁雄顺 周继昌 张丽君 龚春梅 朱玉梅 杨慧关键词:内参基因 管家基因 特应性皮炎 过量硒加重二硝基氯苯诱导的小鼠特应性皮炎样表现 被引量:2 2018年 目的 观察硒对小鼠特应性皮炎样表现的影响。方法 40只BALB/c小鼠随机等分为缺硒组(0.01 mg/kg)、正常硒组(0.25 mg/kg)、过量硒组(3.00 mg/kg)和对照组(0.25 mg/kg),4组小鼠先用缺硒饲料饲养4周后,再分别以缺硒、正常硒、过量硒和正常硒饲料喂养4周。此后,3个致敏组(缺硒组、正常硒组、过量硒组)采用二硝基氯苯(DNCB)诱导特应性皮炎样表现。激发期间监测小鼠皮炎表现严重程度。激发3周后检测小鼠血浆总IgE、全血炎症细胞计数,并剪取小鼠背部皮肤组织进行组织病理检查,分析组织中硒含量。单因素方差分析方法评估多组间IgE、硒水平和细胞计数等检测结果差异, Pearson相关性分析和线性回归分析评估IgE等检测指标与硒水平的相关性。结果 致敏6 d后,致敏组小鼠皮肤表现评分明显高于对照组(致敏第6、8、11、13、15、18天时各组间比较,F值分别为44.897、76.622、114.866、33.352、28.605、11.271,均P 〈 0.01),第11天过量硒组皮肤表现评分明显高于缺硒组和正常硒组(均P 〈 0.05)。与对照组相比,致敏小鼠均发生明显的皮炎病理改变,但3个致敏组之间皮损中炎症细胞计数差异无统计学意义(均P 〉 0.05)。致敏小鼠全血炎症细胞和血浆总IgE水平均随膳食硒水平的增加而升高;其中过量硒组血浆总IgE水平升高最明显,与缺硒组、正常硒组和对照组比较,差异均有统计学意义[(167.17 ± 8.49) μg/L比(124.78 ± 5.32) μg/L、(132.61 ± 4.71) μg/L、(109.13 ± 0.79) μg/L,t值分别为3.919、3.222、6.485,均P 〈 0.05]。致敏组小鼠皮肤组织硒含量与小鼠血浆总IgE水平(r = 0.579,P 〈 0.001)、全血白细胞(r = 0.414,P 〈 0.05)、中性粒细胞(r = 0.439,P 〈 0.05)、淋巴细胞(r = 0.417,P 〈 0.05)和嗜酸性粒细胞(r = 0.505,P 〈 0.01)均呈线性正相关。结� 莫俊銮 张丽君 周继昌 龚春梅 徐远飞 杨慧关键词:硒 免疫球蛋白E 硒吸收和转运机制研究进展 被引量:4 2013年 硒是人体必需的微量元素,是谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidases,GPXs)及其他含硒酶的活性中心,在机体内发挥多种生物学功能。适量硒对重金属和非金属毒性具有解毒作用。 郑世杰 余日安 刘小立 周继昌关键词:硒 转运 肠道 血液 RNA干扰硒蛋白V基因对人恶性黑色素瘤细胞A375生物学行为的影响(英文) 2014年 目的体外观察sh RNA靶向干扰硒蛋白V(SELV)基因对人恶性黑色素瘤A375细胞生物学行为的影响。方法构建以SELV为靶基因的sh RNA表达载体,将其转染至体外培养的A375细胞中,并利用嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株。采用实时荧光定量反转录PCR(q RT-PCR)和Western blotting法分别检测转染细胞SELV的m RNA和蛋白表达水平;采用MTT法检测转染后细胞的增殖能力,并利用流式细胞术检测转染细胞的细胞周期和早期凋亡率。采用q RT-PCR和ELISA法对转染细胞的SELV功能相关因子含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族9(ASB9)和O-乙酰氨基葡萄糖转移酶(OGT)的表达情况进行检测。结果成功构建靶向SELV的sh RNA重组质粒,并获得稳定转染的A375细胞。转染后SELV的表达显著降低(P<0.05),细胞增殖和细胞周期未发生明显变化,但细胞早期凋亡率显著增加(P<0.05)。而转染细胞的ASB9和OGT表达量也明显增加(P<0.05)。结论靶向SELV的sh RNA重组质粒能够下调SELV在A375细胞中的表达,提高细胞早期凋亡率,并导致ASB9和OGT的表达升高。 侯彬 周继昌 龚春梅 徐远飞 刘小立 钟燕 沈秀华关键词:RNA干扰 高敏C-反应蛋白在预防医学中的应用价值 C-反应蛋白(CRP)是一种急性时相的血浆蛋白,其浓度低于10mg/L时,常称为高敏CRP(hs-CRP)。临床上CRP常被用作炎症的检测指标,而动脉粥样硬化、2型糖尿病等很多疾病的发生和发展都与炎症存在很强的关联。因此... 朱玉梅 胡佳哲 刘小立 周继昌关键词:C-反应蛋白 炎症 文献传递 Effects of RNA Interference to Selenoprotein V Gene on Cytobiological Behaviors in Human Malignant Melanoma A375 Cells To investigate the effects of RNA interference to selenoprotein V(SELV) gene on cytobiological behaviors in hu... HOU Bin ZHOU Ji Chang GONG Chunmei XU Yuanfei ZHONG Yan SHEN Xiuhua LIU Xiaoli文献传递