国家自然科学基金(30900038)
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 相关作者：万翠香魏华章昭琳徐锋彭珍更多>>
- 相关机构：南昌大学中国药品生物制品检定所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 益生菌和致病菌对肠道的黏附及其相互作用研究进展被引量：3
- 2009年
- 探讨益生菌及致病菌对肠道上皮细胞的黏附机制,比较其黏附后的生物学效应差异,重点对二者之间的竞争性黏附作用进行了概述。在上述基础上对益生菌抑制致病菌的研究前景和发展趋势进行了展望。
- 彭珍魏华程波财万翠香曾明徐锋
- 关键词：益生菌致病菌肠上皮细胞
- 高黏附力双歧杆菌的筛选与鉴定被引量：4
- 2012年
- 利用体外细胞培养法,从实验室现有的10株双歧杆菌中筛选具有较强粘附能力的菌株。采用革兰氏染色法和平板计数法,评价了这10株双歧杆菌对HT-29细胞的粘附性能,通过测定这10株双歧杆菌的16S rRNA基因序列(16S rDNA)进行分类学鉴定。结果显示,WBBI01,WBBI02,WBIN03,WBBI06具有极强的黏附力,其黏附指数分别达1.97×103,2.17×103,3.57×103,1.88×103。经16S rDNA测序鉴定WBBI01,WBIN03,WBBI06均与两歧双歧杆菌S17有极高的同源性,而WBBI02属于长双歧杆菌。结果表明,双歧杆菌黏附性能具有明显的种属特异性,不同种属双歧杆菌的粘附能力相差极大,以两歧双歧杆菌的黏附性能最强,婴儿长双歧杆菌为最弱。
- 万翠香章昭琳王报贵魏华甘艳云
- 关键词：益生菌RDNA双歧杆菌
- 益生菌体外增殖因子的初步研究
- 2009年
- 目的研究单糖、pH、温度及时间对青春双歧杆菌、长双歧杆菌和类干酪乳杆菌体外增殖的影响。方法用甘露糖、半乳糖、山梨醇及果糖代替MRS中的葡萄糖,筛选出每种细菌的最适碳源。以此为基础,选择其最佳初始pH、培养温度、碳源添加量及培养时间。结果青春双歧杆菌、长双歧杆菌和类干酪乳杆菌的最适碳源分别为葡萄糖、甘露糖和半乳糖;最佳初始pH为6.0、7.0和6.0;培养温度为42、30和30℃;碳源添加量为20、15和25 g/L;培养时间都为28-48 h。结论益生菌具有不同的最适增殖条件,本文研究结果为优化益生菌的生长条件提供了基础数据。
- 彭珍谭强来陈廷涛魏华徐锋万翠香
- 关键词：双歧杆菌乳杆菌活菌计数碳源
- 两歧双歧杆菌中serpin基因的克隆、表达与功能分析被引量：3
- 2011年
- 从Bifidobacterium bifidum WBBI02基因组中克隆了serpin基因片段,构建了重组Serpin蛋白的原核表达体系,实现了Serpin的表达与纯化。纯化的Serpin蛋白进行了抑制肠道蛋白酶活性检测,以及对双歧杆菌粘附作用影响的显微观察研究。结果表明:WBB I02中长度为768 bp的serpin基因序列,与GENEBANK中Bifidobacterium longum NCC2705serpin序列同源性为99.9%。原核表达载体pBX2-WBBI02表达的Serpin能有效地抑制糜蛋白酶和胰弹性蛋白酶的活性,最高抑制率分别为90%和97%,显微观察结果证实Serpin能促进双歧杆菌对HT-29细胞的粘附。
- 叶若松黎鹏章昭琳万翠香崔佳魏华
- 关键词：双歧杆菌SERPIN克隆表达粘附
- Serpin多抗制备和产Serpin的双歧杆菌菌株的初步筛选被引量：1
- 2011年
- 从长双歧杆菌WBL001基因组中克隆了serpin基因,构建重组Serpin蛋白的原核表达体系pBX2-serpin,纯化表达产物作为抗原,免疫小鼠制备Serpin的多克隆抗体。采用偶联Serpin的磁珠纯化多克隆抗体,并探究了不同溶剂对抗体洗脱效率的影响。纯化的多抗用于斑点杂交筛选产Serpin蛋白的菌株。结果表明:磁珠纯化多克隆抗体以1 mol/L NaOH的洗脱率最高,达50%;纯化后的Serpin抗体消除了与部分乳酸菌和致病菌的非特异性反应;采用斑点杂交方法从11株双歧杆菌中筛选到婴儿双歧杆菌WBAN07具有类Serpin蛋白。
- 崔佳万翠香杨友均黎鹏魏华章昭琳徐迪徐锋李波
- 关键词：SERPIN纯化抗血清斑点杂交
- 双歧杆菌原生质体的制备及其转化系统的建立被引量：4
- 2012年
- 考察了长双歧杆菌WBL001菌体生长状态、酶解浓度、时长、温度以及不同渗透压稳定剂等因素,获得长双歧杆菌WBL001原生质体制备及再生的优化条件:长双歧杆菌以3%接种量活化至MRS培养基,培养至对数中期(OD600∶1),5μg/mL变溶菌素,37℃孵育30 min,以原生质体稳定液SMM为反应缓冲液,原生质体生成率达到81%,其再生率达到48%;在此基础上,通过聚乙二醇PEG融合,将穿梭表达载体pBAX转入双歧杆菌原生质体,成功建立双歧杆菌转化体系。
- 万翠香章昭琳王报贵魏华
- 关键词：双歧杆菌原生质体
- 单核增生李斯特菌Internalin A的克隆表达与抗体制备被引量：7
- 2009年
- 目的克隆表达单核增生李斯特菌Internalin A（InlA）,并以之为抗原制备检测单核增生李斯特菌的抗体。方法通过PCR技术从单核细胞增生李斯特菌4b中扩增出inlA基因,克隆筛选和测序鉴定后,最终构建该基因的原核表达质粒pGEX-4T-InlA,谷胱甘肽树脂亲和层析纯化表达产物后,免疫小鼠分别制备相应的多抗和单抗。结果在大肠埃希菌中成功表达了InlA,并对其进行了纯化,融合表达产物分子量约为110 kD;免疫小鼠获得的抗血清效价达到1∶1600;得到了3株抗InlA的单克隆抗体杂交瘤细胞株,腹水单抗效价为1∶1×10^5-1∶3×10^5。2种抗体与其他病原菌均无交叉反应。结论通过表达单核增生李斯特菌的特异性蛋白制备的抗体,能有效地消除交叉反应,提高检测的特异性。
- 彭珍魏华万翠香熊勇华赖卫华徐锋
- 关键词：纯化抗血清特异性
