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羊口疮的PCR检测及病理组织学观察被引量：1: 2012年; 对自然感染疑似羊口疮的4只病羊的嘴角皮进行采样,采用石蜡包埋,H.E染色,在显微镜下进行病理组织学观察。结果显示:上皮细胞发生"气球样变";"气球样变"的细胞破裂,与细胞间脓性水肿液融合成水疱或脓疱;并可见到出血现象。; 向智龙水超程振涛鲜思美欧德渊禾彩虹黄露; 关键词：羊口疮病理组织学

山羊痘病毒和羊口疮病毒双重PCR检测方法的建立与初步应用被引量：20: 2011年; 根据GenBank发表的山羊痘病毒(goatpox virus,GPV)和羊口疮病毒(orf virus,ORFV)基因序列,分别合成针对GPVITR和ORFVH2L基因片段的2对引物,以GPV和ORFV的核酸混合物作为模板,经优化反应条件,成功建立了快速鉴别检测GPV、ORFV的双重PCR方法。特异性试验结果显示,该方法对GPV与ORFV核酸的扩增能获得289和507 bp的特异性目的片段,而对FMDV、FPV、BTV、健康山羊皮肤的核酸扩增均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法对GPV核酸的最小检出量为4 pg,对ORFV核酸为0.4 pg;对临床采集的12份病料进行双重PCR扩增,GPV检出率为25%(3/12),ORFV的检出率为75%(9/12)。结果表明,建立的双重PCR方法具有特异性强、敏感性高、快速简便等特点,可用于GPV或/和ORFV临床感染病例的联合检测与鉴别诊断。; 向智龙程振涛卓建华周碧君欧德渊鲜思美刘芳冉光鑫; 关键词：山羊痘病毒羊口疮病毒双重PCR

贵州省羊口疮的调查研究被引量：21: 2012年; 对贵州省的5个养羊大县羊只发生的羊口疮进行了确诊。流行病学调查显示,任何年龄的黑马羊、沿河黑山羊、麻江黄羊和波尔山羊均可感染羊口疮,发病率为2.2%～17.7%。病死率为0～51.4%;发病部位可分为唇形、乳房型、外阴型和混合型,其中以唇形较为常见;患病皮肤在光学显微镜下可见细胞发生"气球样变";电子显微镜观察到卵圆形的线团样病毒粒子;PCR扩增出507bp的特异性条带。通过流行病学调查、临床症状、病理剖检变化可对该病作出初步诊断,经病理组织切片镜检、电镜负染和PCR方法确诊为羊口疮。; 鲜思美胡廷帅熊朝丽向智龙陈秀华; 关键词：羊口疮

贵州省羊口疮病例分子生物学诊断被引量：1: 2011年; 为了更好地鉴别诊断疑似羊口疮病例,采用PCR技术、分子克隆技术和生物信息技术对毕节地区羊口疮疑似病例进行实验室诊断。结果显示,从疑似病例组织病料中扩增出与预期大小相符的1 137 bp的B2L基因片断,且该基因核苷酸同源性与GenBank中已发表羊口疮病毒序列间的同源性为97.1%～99.1%。试验结果表明,该病例为羊口疮病毒感染。研究结果为羊口疮临床病例的快速鉴别诊断提供了1种快速可靠的方法。; 刘廷江程振涛向智龙江楠龙雨清李廷强; 关键词：羊口疮分子生物学

羊口疮病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立及应用被引量：15: 2011年; 参照GenBank中登录的羊口疮病毒(ORFV)序列(Gu320351),针对OrfV的B2L基因保守区域设计了4条引物,通过优化反应条件,建立了检测OrfV的环介导等温扩增技术(LAMP),并进行了特异性试验、敏感性试验及临床样本检测。结果显示,用建立的LAMP方法对OrfV阳性样品扩增产物的电泳呈特征性梯状条带,而绵羊痘病毒、蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、丝状支原体山羊亚种、山羊痘病毒及健康山羊皮肤的扩增产物电泳后均无扩增条带。建立的LAMP方法对OrfV的最低检出量为5.3fg,比常规PCR方法高1 000倍。表明建立的LAMP方法特异性强,敏感性高。对6份临床样本的检测结果显示,OrfV阳性检出率为83.33%(5/6),与常规PCR的符合率为100%。本试验为羊口疮病例的临床诊断和OrfV的快速检测提供了新的方法。; 向智龙卓建华鲜思美欧德渊李启发徐雄真; 关键词：羊口疮病毒环介导等温扩增技术

贵州地区羊口疮病毒B2L基因克隆及原核表达载体构建被引量：14: 2011年; 用H2L基因特异性引物对羊口疮临床疑似病料进行鉴定,采用PCR扩增出阳性样品羊口疮病毒结构蛋白B2L基因,回收纯化PCR产物,克隆至pMD18-T,测序结果表明插入的片段为目的基因,全长1137 bp。将目的基因定向克隆至pET-32a构建了B2L基因原核表达载体pET-32a-B2L,经PCR鉴定、酶切及进一步测序证明表达载体构建成功,为下一步的表达及基因工程疫苗的研究奠定了良好基础。; 向智龙卓建华程振涛欧德渊鲜思美尹传宝黄璐禾彩红; 关键词：羊口疮病毒克隆原核表达载体

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贵州省科学技术基金(J[2010]2260)