陕西省自然科学基金(2007B22)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 相关领域：理学生物学化学工程更多>>
- 铜离子固定金属亲和色谱在生物大分子中的应用被引量：4
- 2008年
- 铜离子固定金属亲和色谱作为一种有效的分析方法,已普遍应用于生物大分子的分离与纯化。本文从理论和应用两个方面就新型基质、螯合配体、色谱动力学、联用技术以及蛋白质分离纯化、复性等方面进行了评述。
- 王燕李蓉陈国亮王小刚
- 关键词：生物大分子螯合配体
- 不同配体硅胶弱阳离子交换剂的再生与应用
- 2010年
- 将不同配体的硅胶填料回收酸洗后,以亚氨基二乙酸(IDA)为新配体,分别用直接法和间接法合成IDA-回收硅胶,研究合成填料的色谱性能,并与制备的IDA-新硅胶色谱柱进行比较。结果表明,尽管IDA-回收硅胶柱的各项性能均略低于新硅胶色谱柱,但也能有效分离蛋白。用直接法合成得到的IDA-回收硅胶柱的性能要比用间接法合成得到的IDA-回收硅胶柱的性能好,并且成功的提取和纯化了蛋清中的溶菌酶(Lys)和猪心中的细胞色素-C(Cyt-C)。研究证明了硅胶回收再利用的可行性。
- 王燕张番李蓉陈国亮王小刚
- 关键词：酸处理
- 蛋白质在金属螯合亲和色谱中的竞争洗脱被引量：2
- 2010年
- 以细胞色素C和溶菌酶为代表,研究了蛋白质在强亲和性金属螯合柱(IDA-Cu(Ⅱ))上的保留行为。考察了竞争剂、缓冲体系对蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上保留值的影响。发现在PBS和NaAc-HAc缓冲体系用咪唑(Imid)和甘氨酸(Gly)作竞争剂,可使蛋白质得到较好分离;在Gly和Imid竞争体系,分别研究了pH值变化对蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上保留值的影响。为使蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上得到有效分离且减少固定金属Cu2+的流失,对Gly体系,最好采用竞争置换和降低pH值相结合的方式进行洗脱。对Imid体系,溶液pH值应控制在6.0为宜,低pH值下蛋白质则不宜被洗脱。结果表明,竞争剂浓度与蛋白质在IDA-Cu(Ⅱ)柱上的保留关系均符合计量置换模型。随着竞争剂浓度的增加,蛋白质的保留值减小。保留因子(k′)的对数与竞争剂浓度倒数(1/[D])的对数具有良好的线性关系,其线性相关系数分别在0.984和0.986以上。
- 李蓉王燕陈国亮王小刚郑建斌
- 关键词：蛋白质
