国家自然科学基金(31101871)
- 作品数：10 被引量：41H指数：3
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- 诱食剂对育肥猪生产性能的影响
- 2012年
- 本试验旨在研究含有诱食剂的预混料对育肥猪生产性能的影响。试验选择60kg左右的杜×大×长育肥猪108头,随机平均分到试验组和对照组中。试验组使用含有诱食剂的预混料,对照组使用不含有诱食剂的预混料。试验结果显示,添加含有诱食剂的预混料能够显著提高育肥猪的日增重15.4%(P<0.05),采食量极显著提高了15.8%(P<0.01),料肉比提高了0.1%,但差异不显著(P>0.05),收入提高了15.3%。试验结果表明,使用含有诱食剂的预混料饲喂育肥猪,可以取得较为满意的经济效益。
- 艾静朱飞晶袁玉国
- 关键词：诱食剂育肥猪
- 锌指核酸酶技术在动物转基因中的研究进展被引量：1
- 2014年
- 锌指核酸酶(zinc-finger nucleases,ZFNs)技术是近年来发展起来的一种基因修饰技术,利用ZFNs可特异识别靶位点DNA序列并使其断裂。与传统基于同源重组的基因打靶相比,ZFNs能使打靶效率提高100000倍,并使基因断裂与突变修复达到同样效果。ZFNs已经应用于多种生物,包括昆虫、两栖类生物、线虫、植物、多种动物和人类细胞。这些应用提高了人们对复杂生理系统的理解,使ZFNs成为一种生产转基因动物、细胞系和植物的有力工具,并在治疗人类疾病中发挥重要作用。文章对ZFNs技术原理及其应用于哺乳类动物转基因的研究进行了回顾和展望。
- 袁玉国彭秋玲
- 关键词：锌指核酸酶动物转基因基因打靶
- 猪喘气病自家苗的制备及其效果观察
- 2013年
- 为控制和预防猪支原体肺炎,试验采用常规方法制备自家喘气病灭活苗,通过自制自家苗与市场上常用的喘气病灭活苗进行免疫比较试验,并用ELISA法检测猪血清抗体水平。结果表明:自家苗的免疫效果可靠,可用于本场猪群的免疫。
- 袁玉国彭秋玲窦昊马培婧
- 关键词：喘气病自家苗
- 犬细小病毒病的流行病学调查被引量：21
- 2012年
- 犬细小病毒病是一种急性、烈性、致死性传染病,特征是非化脓性心肌炎或出血性肠炎,心肌炎型多见于4～6周龄的幼犬,临床症状未出现就突然死亡,出血性肠炎在临床上极为常见,多数能治愈,多发于幼犬,病死率为10%～50%。为了解犬细小病毒病的发病率与犬的月龄、品种、性别、发病时间之间的关系,在2010年3月至2011年2月收治105例犬细小病毒病例,根据流行病学可以看出,2、3月龄的犬发病率最高,纯种犬发病率高,在其秋冬季应当加重预防与治疗,综合本次调查,对本病提出一些科学防治的建议。
- 艾静袁玉国彭秋玲艾妮丝
- 关键词：犬细小病毒流行病学
- 人乳铁蛋白乳腺特异性表达载体的构建及其功能的验证被引量：6
- 2011年
- 构件pbCNCS/LF36经微注射获得转基因小鼠,同时为了准确筛选出整合的单克隆细胞,增加1个Cre/LoxP-GFP-Neo系统构建成pAPLM,将其转染山羊胎儿成纤维细胞筛选阳性细胞。结果表明:小鼠受体妊娠率28.5%,产仔32个,PCR整合检测4只阳性(3♀、1♂,整合率12.5%)。构件产生的3只母鼠和4号后代母鼠乳汁中重组人乳铁蛋白(hLF)用ELISA方法检测,表达量分别为3.8、2.8、0.9mg.mL-1,4号后代3只母鼠表达量分别为4.2、3.9、3.6mg.mL-1。构件pAPLM片段转染细胞后,经G418筛选,挑取单克隆扩大培养,其中8株PCR阳性克隆细胞荧光显微镜观察100%都有GFP的表达。以上结果证实,双启动子能调控外源基因在乳腺中特异高水平表达hLF,双标记基因可提高筛选阳性供核细胞的准确性,这为进一步作体细胞转基因克隆奠定基础。
- 袁玉国安礼友于宝利杨廷佳成勇
- 关键词：人乳铁蛋白双启动子小鼠胎儿成纤维细胞荧光蛋白
- 苏格兰折耳猫骨软骨发育不良的诊疗体会
- 2014年
- 苏格兰折耳猫骨软骨发育不良也称为苏格兰折耳猫骨营养不良,是影响骨骼生长和关节软骨形成、导致四肢远端和尾部畸形的一种遗传性疾病。一例疑似病例中患畜主要表现为双侧后肢跗关节处肿胀,有疼痛感,爪部、尾部变短、厚,弯曲不灵活。经血常规和影像学检查确诊为苏格兰折耳猫骨软骨发育不良。通过一段时间药物治疗,病情好转,后肢可以着地走路。
- 李宇琛彭秋玲袁玉国
- 关键词：骨软骨发育不良血常规影像学检查
- 人白细胞介素-2原核表达条件优化和表达产物纯化被引量：3
- 2013年
- 通过构建原核表达载体、优化原核表达条件和纯化表达产物来获得人白细胞介素-2(IL-2)的融合蛋白(His-IL2)。将IL-2基因连接到pET100/D-TOPO载体中,经酶切鉴定和测序,构建了pET-IL2质粒。将质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,通过优化诱导温度、诱导时间及IPTG诱导终浓度来减少包涵体的生成,从而提高可溶性蛋白的产量,由SDS-PAGE和Western blot证明IPTG诱导终浓度为0.6 mmol/L、温度为25℃,诱导5 h时可溶性蛋白含量明显高于包涵体,且该融合蛋白能够被特异性抗体所识别。分别以葡聚糖凝胶层析和Ni-IDA树脂亲和层析纯化His-IL2融合蛋白,比较两种不同的纯化方法对其蛋白纯化效率的影响,SDS-PAGE分析得出Ni-IDA树脂亲和层析对此融合蛋白纯化的特异性高,纯度达到85%左右。His-IL2融合蛋白的优化表达和纯化为进一步研究融合蛋白的活性与功能奠定了基础。
- 吉学桥张利清陆睿成勇
- 关键词：IL-2可溶性蛋白蛋白纯化
- 家兔超数排卵和胚胎移植妊娠率的影响因素分析被引量：3
- 2013年
- 应用FSH和HCG相结合的不同方法 (递减量与恒量法),对不同兔龄和是否经产的中国家兔进行了超数排卵处理。其中,递减量法超排处理:每间隔12 h依次肌肉注射15、15、10、10、5及5 U/只共60 U的FSH,6次之后间隔12 h,经耳缘静脉注射HCG 100 U/只,合笼;恒量法超排处理:每间隔12 h肌肉注射10 U/只共60 U的FSH,6次之后间隔12 h,经耳缘静脉注射HCG 100 U/只,合笼。17 h后,取卵经显微注射后移植到排卵点分布不同的家兔输卵管中,比较分析了超数排卵及胚胎移植妊娠率的影响因素,旨在优化兔超数排卵和胚胎移植方法。结果显示,①总量为60 U的FSH递减量肌肉注射法超排效果略优于恒量法(688枚、671枚),但差异不显著(P>0.05);②9～11月龄的母兔超排效果明显优于6～8月龄的母兔(794枚、565枚),差异显著(P<0.05);③经产母兔的超排效果明显优于未经产的母兔(887枚、472枚),差异显著(P<0.05);④经显微注射重组DNA的胚胎移植受体时,两侧卵巢均有排卵点的胚胎移植受体妊娠率明显高于一侧卵巢有排卵点和两侧卵巢均无排卵点的受体(81.25%、38.46%、37.50%),差异显著(P<0.05)。试验证明,通过肌肉注射递减总量为60 U的FSH对9～11月龄经产母兔的超排效果最佳,且两侧卵巢均有排卵点的受体胚胎移植妊娠率最高,为胚胎研究工作者提供了一定的参考依据。
- 宋绍征葛欣张利清成姚斌荣耀顾迎迎吉学桥刘昊成勇
- 关键词：超数排卵胚胎移植妊娠率显微注射
- 江苏中部地区猪大肠杆菌病血清型鉴定及毒力基因的调查被引量：6
- 2013年
- 为了调查江苏中部地区猪大肠杆菌病的流行情况，笔者从江苏中部地区的发病猪场采集413份疑似猪大肠杆菌病病料进行细菌分离和生化鉴定，采用PCR方法对毒力基因进行检测，以期对江苏地区研制猪大肠杆菌疫苗和筛选防治猪大肠杆菌病敏感药物提供参考。
- 袁玉国彭秋玲陈思李宇琛
- 关键词：猪大肠杆菌病毒力基因血清型鉴定大肠杆菌疫苗PCR方法
- 人工锌指核酸酶突变EGFP基因的功能分析被引量：1
- 2013年
- 锌指核酸酶技术在基因定点修饰中具有效率高和特异性好等特点,并成功应用于数十种生物。目前,该技术是否能应用羊上尚未报道。为了敲除转基因山羊标记基因(EGFP),构建了一对针对EGFP外显子上的锌指核酸酶表达载体,将其电转染至转EGFP基因胎儿成纤维细胞中,研究了锌指核酸酶突变EGFP基因的效率和方式,利用基因显微注射单细胞获得获得的转基因(EGFP)细胞系作为锌指核酸酶的靶细胞。结果显示,通过锌指核酸酶的突变作用,转染后的细胞发绿色荧光比例下降,测序结果显示在EGFP外显子中插入1个碱基G,导致编码EGFP基因的阅读框改变,从而起到基因突变的作用。结果表明,文中构建的锌指核酸酶对EGFP基因有突变作用,可以为以后获得无标记基因供核细胞进行体细胞核移植生产克隆羊奠定基础。
- 袁玉国于宝利宋绍征周峰张利清顾迎迎禹明慧成勇
- 关键词：核移植EGFP基因打靶
