国家自然科学基金(81172496) 作品数:18 被引量:66 H指数:4 相关作者: 邓世山 侯令密 幸天勇 赵小波 钟雪梅 更多>> 相关机构: 川北医学院附属医院 川北医学院 遂宁市中心医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 四川省自然科学基金 四川省教育厅重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
膜联蛋白A2在乳腺癌及乳腺纤维腺瘤中的表达及意义 2012年 目的研究膜联蛋白A2(Annexin II,ANX A2)在乳腺浸润性导管癌和乳腺纤维腺瘤中表达,以探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。方法分别使用免疫组织化学染色(SP)法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测乳腺浸润性导管癌和乳腺纤维腺瘤中ANX A2的蛋白表达水平和mRNA表达水平,并分析其在不同病理分级、临床分期及有无淋巴结转移的乳腺浸润性导管癌组织中的表达情况。结果免疫组化结果显示乳腺浸润性导管癌组织中ANX A2表达高于乳腺纤维腺瘤(P<0.05),RT-PCR结果也显示乳腺浸润性导管癌中ANX A2mRNA的表达高于乳腺纤维腺瘤(P<0.05)。乳腺癌中ANX A2的表达与年龄、病理分级、临床分期和淋巴结转移呈正相关。结论乳腺浸润性导管癌中annexinA2表达明显高于乳腺纤维腺瘤,annexinA2可能是乳腺癌的生物学标记物之一,其在乳腺癌的发生发展中可能扮演重要的角色。 李金穗 赵锐 幸天勇 李敬东 陈果 杨正伟 敬保迁 邓世山关键词:乳腺浸润性导管癌 膜联蛋白A2 免疫组化染色法 逆转录聚合酶链反应法 siRNA干扰膜联蛋白AI表达对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞凋亡的影响 2017年 目的通过小干扰RNAs(siRNA)干扰膜联蛋白A1(ANX A1)在甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中的表达,探讨ANX A1对PTC细胞的生物学特性的影响。方法设计并筛选使用高效的siRNA在PTC TPC-1细胞株特异性干扰ANX A1的表达,然后用流式细胞术观察ANX A1干扰后对PTC细胞TPC-1凋亡的影响。结果筛选的siRNA可高效沉默ANX A1在PTC细胞中的表达,促进PTC细胞的凋亡。结论 siRNA干扰ANX A1表达,可促进PTC细胞的凋亡,提示ANX A1可能是PTC治疗的一个重要的生物学靶标。 钟雪梅 林一民 周源 邓世山 丁浩关键词:甲状腺肿瘤 乳头状瘤 膜联蛋白A1 E6-AP基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中调节膜联蛋白A2的表达 被引量:3 2016年 目的检测E6-AP基因及膜联蛋白A2(Annexin A2)在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达,探讨其对癌细胞增殖、凋亡及浸润转移的影响。方法设计1条无关序列Negative-siRNA作为阴性对照组和针对E6-AP基因的3条特异性E6-AP-siRNAs片段转染至MDA-MB-231细胞内作为实验组,未经处理细胞作为空白对照组,加入脂质体处理的细胞为脂质体组,利用RT-PCR检测干扰E6-AP后在MDA-MB-231细胞中E6-AP和Annexin A2 mRNA相对表达水平。选择出转染效率最高的E6-APsiRNA1组及阴性对照组、空白对照组继续行后续实验。Western blot检测干扰E6-AP后E6-AP和Annexin A2在MDA-MB-231细胞中的蛋白的相对表达水平。利用CCK-8试剂盒法、流式细胞术、Transwell小室侵袭实验分别检测干扰E6-AP后MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡、侵袭能力。基因的mRNA及蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞数的组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD法,吸光度比较采用重复测量的方差分析。结果转染72 h后,E6-AP基因干扰后各实验组(E6-AP-siRNA1组、E6-AP-siRNA2组、E6-AP-siRNA3组)及空白对照组、阴性对照组及脂质体组中的E6-AP mRNA相对表达水平分别为0.159±0.003、0.325±0.006、0.229±0.007、0.593±0.031、0.594±0.012、0.612±0.016,Annexin A2 mRNA相对表达水平分别为0.929±0.017、1.013±0.082、0.992±0.024、1.341±0.037、1.323±0.010、1.326±0.012,差异均有统计学意义(F=850.792、417.447,P均<0.050)。转染72 h后,E6-AP-siRNA1组、空白对照组和阴性对照组中E6-AP及Annexin A2蛋白相对表达水平为分别为0.271±0.017、0.492±0.018、0.477±0.016及0.447±0.034、0.887±0.022、0.849±0.033,组间差异均有统计学意义(F=256.850、350.149,P均<0.050)。转染24、48、72、96 h后,E6-AP-siRNA1组、阴性对照组和空白对照组间比较,不同时间点之间比较,细胞吸光度差异均有统计学意义(F=524.828,P<0.001;F=904.079,P<0.001);分组与时间点存在交互作用(F=28.116,P<0.001)。转 侯令密 谢少利 陈茂山 李敬东 Emmanuel Ajedichiga Aduah 王明浩 邓世山 幸天勇 赵小波关键词:乳腺肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 肿瘤侵润 镇静对腹股沟疝修补术中痛觉的影响 被引量:1 2015年 目的:观察不同镇静药对局麻下腹股沟疝修补术过程中痛觉感受的影响。方法:选择拟在局麻下行腹股沟疝修补术的男性患者60例,年龄20~60岁,ASA分级Ⅰ~Ⅱ级。随机分为对照组( C组)、咪达唑仑镇静组( M组)和右美托咪定镇静组( D组),每组20例。观察记录各组患者术中痛觉评分及术后满意度评分。结果:与C组比较,M组患者术中的痛觉评分增高而满意度评分无显著差异,D组患者痛觉评分降低而满意度评分增高。结论:镇静对痛觉的影响与使用的镇静药物相关,对于局麻下行腹股沟疝修补术的患者咪达唑仑镇静时可增加痛觉感受而右美托咪定可降低痛觉感受。 陈昌林 李金穗关键词:疝修补术 痛觉 siRNA干扰膜联蛋白A1基因对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖的影响 被引量:1 2017年 目的通过小干扰RNA(siRNA)干扰膜联蛋白(ANX)A1基因在甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中的表达,探讨ANXA1对甲状腺乳头状癌细胞生物学特性的影响。方法设计并筛选使用高效的siRNA在甲状腺乳头状癌TPC-1细胞株中特异性干扰ANXA1的表达,然后用CCK8法观察ANXA1干扰后对TPC-1细胞增殖能力的影响。结果筛选的siRNA可高效沉默ANXA1在TPC-1细胞中的表达,显著抑制甲状腺乳头状癌的增殖。结论 siRNA干扰ANXA1表达,可抑制甲状腺乳头状癌的增殖,提示ANXA1可能是甲状腺乳头状癌治疗的一个重要的生物学靶标。 钟雪梅 林一民 李倩倩 邓世山 邵如月 丁浩关键词:甲状腺乳头状癌 膜联蛋白A1 小分子干扰RNA USP7在喉癌组织中的表达及其临床意义 被引量:7 2015年 目的探讨泛素特异性蛋白酶7(ubiquitin specific peptidase 7,USP7)在喉癌组织中的表达与其临床病理特征间的联系。方法收集经病理科确诊的喉癌组织标本73例,同时选取癌旁组织52例作为对照。采用免疫组织化学法检测USP7在喉癌和癌旁组织中的表达情况。结果 73例喉癌组织中,61例(83.5%)USP7呈阳性表达,较癌旁组织阳性表达(19/52,36.5%)显著升高(χ2=29.1446,P<0.05)。病理分型中,肿瘤分化程度越低,USP7阳性表达率越高。结论喉癌组织中USP7的高阳性表达与肿瘤分化程度相关,对晚期USP7阳性表达喉癌患者治疗提供新思路。 周芨 邓世山 刘海关键词:喉癌 免疫组织化学 泛素化调节膜联蛋白A2表达异常在乳腺癌中的作用研究 被引量:3 2013年 目的探讨乳腺癌组织中膜联蛋白(annexin)A2表达异常及其泛素化调节机制,annexin A2与乳腺癌TNM临床分期的关系,泛素化调节annexin A2表达异常在乳腺癌发生发展中的作用。方法选择2008年9月至2009年9月在本院普外三科确诊为乳腺癌的10例患者手术切除的新鲜组织,包括组织病理学证实的乳腺癌组织10份及癌旁形态学相对正常组织10份(直径>2cm)为研究对象。组织切除后,立即液氮保存待用。采用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)技术,对乳腺癌组织及其癌旁正常组织的蛋白质进行分离,Western bloting法检测该蛋白质的泛素化(免疫蛋白质组学)情况,取稳定出现的差异阳性蛋白质点进行基质辅助激光解吸/电离时间飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、质谱/质谱串联(MS-MS)及生物信息学分析。通过免疫组化染色技术,对annexin A2在乳腺癌组织及其癌旁正常组织中的表达水平,与乳腺癌TNM临床分期的关系进行观察,并对结果进行统计学分析(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,征得受试对象本人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。结果对4个在乳腺癌组织标本及其癌旁正常组织中明显表达差异的蛋白质点,经质谱鉴定和数据库比对的结果为小泛素相关修饰因子3前体(SMT3A)、蛋白酶体亚单位a型1(PSMA1)、annexin A2及核糖体蛋白S12(RPS12)。免疫组化检测在TNM临床分期为0,Ⅰ,Ⅱ及Ⅲ期的乳腺癌组织标本中,annexin A2表达的阳性率及强阳性率分别为75.0%(6/8)与37.5%(3/8),100.0%(14/14)与42.9%(6/14),100.0%(10/10)与66.7%(4/6)及100.0%(6/6)与50.0%(5/10)。在TNM临床分期不同的乳腺癌组织中,annexin A2表达的阳性率及强阳性率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。annexin A2的表达水平与乳腺癌的TNM临床分期呈正相关(r=0.508,P<0.05)。结论 annexin A2在乳腺癌组织中的表达受泛素化调节, 幸天勇 侯令密 邓世山关键词:乳腺癌 泛素化 激素联合手术治疗肉芽肿性乳腺炎25例 被引量:25 2014年 肉芽肿性乳腺炎是一种较少见的乳腺无菌性炎症反应性疾病,因为其临床体征与乳腺癌表现相似,常造成误诊。本病的发病机制到目前为止尚未得到证实,治疗方案也没有统一。川北医学院附属医院于2008~2012年共收治肉芽肿性乳腺炎患者25例,采用皮质激素联合手术治疗取得一定疗效,现将诊治情况报道如下。 侯令密 谢少利 赵小波 高砚春 幸天勇 蹇顺海 邓世山关键词:乳腺炎 激素 手术 肉芽肿性 AnnexinA1在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义 被引量:2 2015年 目的通过检测Annexin A1在甲状腺乳头状癌中的表达,探讨其与甲状腺乳头状癌的关系与意义。方法取69例甲状腺乳头状癌患者癌组织及癌旁正常组织切片,使用二步法免疫组织化学染色观察Annexin A1在甲状腺乳头状癌和癌旁正常组织中的表达情况。结果 Annexin A1在癌组织中高表达。癌组织表达61例(88.41%),癌旁正常组织表达6例(8.69%),差异有统计学意义(P<0.05);在淋巴结转移和肿瘤直径大于或等于1cm的患者中,Annexin A1表达高于肿瘤小于1cm的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲状腺乳头状癌组织中Annexin A1的高表达,提示其可能为甲状腺乳头状癌潜在的生物学标记物。 钟雪梅 陈敏 邓世山 谢少利关键词:ANNEXIN A1 免疫组织化学 下调泛素蛋白连接酶E3A表达对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响 被引量:2 2018年 目的:探讨降低泛素蛋白连接酶E3A(UBE3A)的表达对三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:采用慢病毒载体分别将构建的3条UBE3A shRNA序列转染人三阴性乳腺癌细胞株MDAMB-231,检测干扰效率后,筛选出干扰效率最高的序列用于实验。分别采用CCK8法、Transwell小室实验、流式细胞术观察MDA-MB-231细胞经所选用的UBE3A shRNA序列转染后侵袭能力、增殖能力与细胞周期的变化,以转染阴性对照组序列和无处理的MDA-MB-231细胞作为阴性对照及空白对照。结果:成功构建UBE3A shRNA慢病毒表达载体并筛选出干扰率最高的UBE3A shRNA序列(UBE3A基因和蛋白表达抑制率分别为89.5%、45.3%)。与空白对照组细胞比较,下调UBE3A的MDAMB-231细胞的增殖、侵袭能力均明显降低,且细胞周期出现明显的S期阻滞(均P<0.05);阴性对照组细胞各项观察指标无统计学差异(均P>0.05)。结论:下调UBE3A表达能诱导三阴性乳腺癌细胞的细胞周期阻滞,从而抑制其增殖与侵袭能力,提示UBE3A在三阴性乳腺癌细胞的恶性生物学行为中发挥了重要作用。 谢少利 王碧娟 刘家有 李金穗 赵小波 邓世山 侯令密关键词:三阴性乳腺癌 RNA干扰 细胞周期