江苏省自然科学基金(BK2010004)
- 作品数：6 被引量：25H指数：3
- 相关作者：岳艳胡静平熊思东董春升何进更多>>
- 相关机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CVB3诱导病毒性心肌炎小鼠模型中相关miRNA表达谱分析被引量：10
- 2013年
- 研究CVB3感染诱导的病毒性心肌炎小鼠模型中心脏microRNA(miRNA)表达谱的变化,并对其在心肌炎中可能的免疫学作用进行初步分析。通过设计具有茎环(stem-loop)结构的反转录引物逆转录反应和进行实时定量Real-time PCR,检测对照组和CVB3感染组小鼠心肌组织中10种miRNA的表达。结果显示,与对照组相比,在小鼠感染第7 d,CVB3组miRNA表达出现差异表达,CVB3感染组心肌组织中的miR-92a、miR-126-5p、miR-199a、miR-208b和miR-210表达上调,分别是对照组的411.3、196.04、9.52、1140.32和47.56倍(P<0.0001);miR-21和miR-320表达低于对照组,分别下降了4.55和9.69倍(P<0.001)。均具有统计学差异。功能分析差异表达的调控基因与细胞周期、细胞迁徙、凋亡、血管生成等生物学功能相关。综上所述,CVB3诱导的病毒性心肌炎模型小鼠心肌组织miRNA表达谱与正常对照组相比明显改变,提示miRNA可能参与了病毒性心肌炎的发病过程。
- 何进董春升岳艳胡静平熊思东
- 关键词：MICRORNA病毒性心肌炎
- 暴露N端对趋化因子LTN黏膜佐剂作用的影响
- 2012年
- 我们前期构建了编码CVB3结构蛋白VP1的真核表达质粒(pVP1),通过滴鼻免疫诱导了一定水平的细胞和体液免疫应答。为了进一步增强其免疫效果,我们在该黏膜疫苗中引入新型黏膜佐剂LTN,发现当两种质粒共免疫时可显著增强pVP1诱导的CVB3特异性血清IgG和黏膜IgA水平,促进脾脏及黏膜局部IFN-γ+T细胞产生,显著减轻CVB3感染小鼠心肌病理损伤。随后我们对该疫苗体系进行了优化,使用双顺反子形式将编码VP1和LTN的基因构建在同一质粒上,通过滴鼻免疫小鼠后同样获得了免疫增强作用;当尝试将LTN N端融合至VP1蛋白,以该融合质粒pVP1-LTN滴鼻免疫小鼠后发现其增强免疫应答的能力显著下降;为排除融合蛋白空间构象改变及空间位阻对LTN佐剂功能的影响,我们在蛋白连接处引入柔性接头肽段(G4S)3,构建了融合质粒pVP1-IRES-LTN,发现该疫苗增强全身及黏膜局部特异性抗体细胞免疫应答的能力也非常有限,与pVP1-LTN相比并无明显差异,因此不能有效清除心肌病毒和减轻心肌损伤,提示融合蛋白的空间位阻或构像改变并非是影响LTN佐剂效应的关键因素,而暴露的LTN N端对其增强全身及黏膜局部免疫应答强度、提高心肌炎的免疫保护作用十分关键。
- 胡静平岳艳熊思东徐薇
- 关键词：DNA疫苗黏膜佐剂病毒性心肌炎
- CVB3诱导的病毒性心肌炎小鼠模型中CD4^+T细胞亚群格局及其作用被引量：2
- 2012年
- 本研究主要关注BALB/c小鼠感染柯萨奇病毒B3型(CVB3)后CD4+T细胞亚群格局的变化及其对病毒性心肌炎发病的贡献度。CVB3腹腔感染小鼠后第7d,通过小鼠体重下降率、心肌损伤血清学指标肌酸激酶(CK)活性以及心肌组织病理学改变等多项指标证实小鼠心肌炎模型的成功建立。经Real-time PCR检测感染第7d脾脏CD4+T细胞亚群主要细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-17F及转录因子Foxp3表达情况;以流式细胞术检测了CD4+T细胞各亚群比例,并通过多元线性回归分析法评估了各T细胞亚群对病毒性心肌炎发病的影响。结果显示,与对照组相比,CVB3感染小鼠脾脏IL-17A、IL-17F、IFN-γ表达均显著上升(分别约为12、8.5、5倍),而IL-4和Foxp3表达无明显变化。CVB3感染小鼠脾脏中CD4+IL-17+Th17细胞的上调幅度最为明显,约2.75倍,其次为IFN-γ+Th1细胞,上调约2.27倍,而Th2和Treg细胞无明显变化。进一步统计学分析显示,Th17对病毒性心肌炎发病的贡献度最高(1.808),Th1次之,贡献度为1.581,而Th2和Treg对病毒性心肌炎发病无显著影响,提示CD4+T细胞亚群格局变化与病毒性心肌炎发病密切相关,其中以Th17对心肌炎发病的贡献度尤为显著。
- 李振平岳艳胡静平董春升熊思东
- 关键词：病毒性心肌炎柯萨奇病毒B3CD4+T细胞TH17细胞
- MDSCs诱导调节性T细胞改善CVB3诱导的病毒性心肌炎被引量：4
- 2012年
- 目的探讨骨髓来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)在CVB3诱导的病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)中的保护作用。方法通过流式细胞术分选获得足量MDSCs,体外证实具有免疫抑制功能后行体内转输实验,观察疗效及免疫机制。结果与对照PBS组相比,MDSCs处理组体质量呈上升趋势,肌酸激酶(CK)活性明显降低(P<0.001),心脏局部炎症浸润及坏死病灶显著减少,7天生存率高达70%(P<0.01),而心肌病毒滴度无明显改变,却上调了CD4+FoxP3+调节性T细胞比例。结论 MDSCs可显著改善CVB3诱导的病毒性心肌炎,有望成为心肌炎防治的新型策略和手段。
- 苏楠岳艳胡静平董春升熊思东
- 关键词：MDSCS病毒性心肌炎CVB3TREG
- 雌激素通过调节IRF4促进巨噬细胞向M2型极化被引量：7
- 2013年
- 病毒性心肌炎、系统性红斑狼疮及肝癌等多种疾病其发病及严重情况呈现明显的性别差异,其中巨噬细胞不同极化是引起上述差异的重要原因。目前发现,雌激素(estrogen)可显著影响巨噬细胞极化,然而其涉及的分子免疫学机制尚不明了。本研究我们探讨了雌激素对骨髓来源巨噬细胞(BMM)极化的影响极其分子机制。雌激素虽不影响巨噬细胞的分化,但可显著促进巨噬细胞向M2型极化。进一步研究发现雌激素可上调M2型巨噬细胞重要转录因子IRF4的表达,且上调水平与M2极化程度呈正相关。提示,雌激素通过上调转录因子IRF4进而促进了M2型巨噬细胞极化。本研究为雌雄小鼠对疾病发病敏感差异性作出了一定理论解释,同时为通过调控巨噬细胞极化治疗疾病提供了新的线索。
- 刘黎胡静平岳艳
- 关键词：雌激素巨噬细胞M2
- HMGB1不同结构域对CVB3心肌炎疫苗免疫增强作用的比较研究被引量：3
- 2012年
- 目的本研究在已构建好的柯萨奇病毒B3型(CVB3)疫苗pVP1的基础上,分别引入编码HMGB1不同结构域的质粒DNA,通过检测共免疫诱导的免疫应答强度,比较其各结构域介导的免疫增强作用。方法首先构建了编码HMGB1的不同结构域的质粒pHMGB1-A、B、C-box,分别与pVP1疫苗混合后肌注免疫小鼠,于末次免疫后10 d检测其诱导的特异性抗体和细胞免疫应答。结果与pVP1单独免疫组相比,pHMGB1-B box共免疫组可显著提高特异性血清IgG水平,同时也显著增加了脾脏IFN-γ+T的细胞数量;C-box仅显示出促进T细胞免疫的效应且程度较B-box小,对抗体水平无明显增强作用;A-box对抗体水平和细胞免疫应答的促进作用都不明显。结论 HMGB1不同结构域对病毒性心肌炎DNA疫苗诱导的体液和细胞免疫应答具有不同程度的增强效应,其中B-box可综合增强CVB3特异性体液和细胞免疫应答,C-box仅有促进T细胞应答效应,而对抗体水平无促进作用,A-box对抗体水平增加和细胞免疫应答的促进作用不明显。该研究不仅有助于深入了解HMGB1不同结构域的免疫佐剂效果差异,更为科学合理应用HMGB1增强免疫应答提供了一定的基础数据。
- 王茂伟岳艳胡静平董春升熊思东
- 关键词：病毒性心肌炎DNA疫苗免疫佐剂
